本文關(guān)鍵詞：GABA_B受體變構(gòu)調(diào)節(jié)劑CGP7930構(gòu)效關(guān)系的研究

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【摘要】：γ-氨基丁酸(γ-gammaaminobutyricacid，GABA)是最為重要的神經(jīng)遞質(zhì)，主要在脊椎動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)中發(fā)揮抑制性作用，調(diào)節(jié)許多重要的生理進(jìn)程。代謝型γ-氨基丁酸受體GABA_B受體與代謝型谷氨酸受體、鈣敏感受體、信息素受體和味覺受體等同屬于G蛋白偶聯(lián)受體家族C，介導(dǎo)緩慢的、長時間的突觸抑制效應(yīng)。GABA_B受體是最具有藥理學(xué)意義的藥物靶點之一，具有精細(xì)和復(fù)雜的調(diào)控機(jī)制，過度抑制和激活都會導(dǎo)致各種疾病的發(fā)生。GABA_B受體傳統(tǒng)的靶點藥物開發(fā)集中于激動劑和拮抗劑，然而這類藥物在臨床應(yīng)用上受到許多的限制，如機(jī)體藥物代謝困難、較強(qiáng)的副作用、耐藥性差等等。變構(gòu)調(diào)節(jié)劑結(jié)合于天然配體結(jié)合位點之外，能夠調(diào)節(jié)異源二聚體亞基或結(jié)構(gòu)域間的相互作用，并具有較高的特異性和藥物安全性，同時還能夠保持GABA_B受體信號在時間和空間上的可控性。因此變構(gòu)調(diào)節(jié)劑為GABA_B受體靶點藥物開發(fā)提供了新思路。 本文主要針對GABA_B受體變構(gòu)調(diào)節(jié)劑小分子化合物的高通量篩選和作用分子機(jī)制的研究。目前針對GABA_B受體的變構(gòu)調(diào)節(jié)劑的研究尚僅僅集中于CGP7930(2001)、GS39783(2003)、BHF177(2008)、CMPPE(2011)四種正向變構(gòu)調(diào)節(jié)劑，而且負(fù)向變構(gòu)調(diào)節(jié)劑還未見報道。通過與上海國家新藥篩選中心(NCDS)的合作，由新藥篩選中心運用組合化學(xué)的方法以CGP7930為母核改造并合成了多種小分子化合物。我們通過放射性IP3功能檢測技術(shù)對小分子化合物進(jìn)行藥物篩選，并構(gòu)建CGP7930構(gòu)效關(guān)系圖譜。 我們使用工具細(xì)胞人胚腎細(xì)胞HEK293，進(jìn)行電穿孔轉(zhuǎn)染GB1、GB2及Gqi9質(zhì)粒，孵育[3H]myo-inositol后，50μM藥物與不同濃度GABA同時刺激細(xì)胞，用50μMCGP7930與不同濃度GABA同時刺激細(xì)胞作為正對照，不同濃度的GABA單獨刺激作為負(fù)對照，然后進(jìn)行放射性IP3功能檢測。從合成的小分子化合物庫中挑選15種在結(jié)構(gòu)上具有代表性和規(guī)律性的小分子化合物，15種小分子化合物分別在R1、R2、R3、R4、R5共5個基團(tuán)位置進(jìn)行改造。根據(jù)改造后的小分子化合物放射性IP3功能檢測的結(jié)果，分別總結(jié)出了R1-R5不同基團(tuán)位置的作用，并成功構(gòu)建出了CGP7930構(gòu)效關(guān)系圖譜。并推測R1基團(tuán)位置的羥基和R2基團(tuán)位置的兩個叔丁基支鏈?zhǔn)荂GP7930識別GB2亞基位點所必需的；在CGP7930三維結(jié)構(gòu)中，R5基團(tuán)位置碳原子所連接的基團(tuán)對CGP7930的變構(gòu)調(diào)節(jié)活性有關(guān)鍵的影響，改變該位置結(jié)構(gòu)可能會使CGP7930的特性發(fā)生改變，從而篩選獲得更加高效和不同特性的藥物。 總之，我們對GABA_B受體變構(gòu)調(diào)節(jié)劑CGP7930構(gòu)效關(guān)系圖譜的建立，對我們下一步的改造優(yōu)化提供了依據(jù)，，同時對GABA_B受體新藥研發(fā)奠定了基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：GABA_B受體 CGP7930 構(gòu)效關(guān)系 藥物篩選 變構(gòu)調(diào)節(jié)劑
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R318.04
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-9
• 1 緒論9-26
• 1.1 GABA_B受體結(jié)構(gòu)、定位和分布9-13
• 1.2 GABA_B受體激活機(jī)制13-15
• 1.3 GABA_B受體介導(dǎo)的下游信號通路及生理意義15-19
• 1.4 GABA_B受體變構(gòu)劑藥學(xué)及變構(gòu)劑CGP793019-24
• 1.5 本研究的目的，內(nèi)容和意義24-26
• 2 實驗技術(shù)原理26-30
• 2.1 電穿孔轉(zhuǎn)染26-27
• 2.2 IP3功能檢測技術(shù)27-28
• 2.3 組合化學(xué) (COMBINATORIAL CHEMISTRY)28-30
• 3 材料與方法30-36
• 3.1 實驗材料30-31
• 3.2 實驗方法31-36
• 4 實驗結(jié)果與討論36-53
• 4.1 結(jié)果與分析36-50
• 4.2 討論與展望50-53
• 致謝53-54
• 參考文獻(xiàn)54-59
• 附錄 主要符號和縮略詞表59

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 金義超;王桂松;;γ-氨基丁酸能系統(tǒng)在阿片類藥物及可卡因成癮中的作用機(jī)制研究進(jìn)展[J];立體定向和功能性神經(jīng)外科雜志;2011年06期

2 蔣明;黃思羅;林昕;春雷;皮振鈞;孫兵;張文華;趙菡;劉劍峰;;GABA_B受體變構(gòu)劑藥學(xué)研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2011年14期

3 張文華;孫倩;胡勇箭;劉劍峰;;GABA_B受體與跨膜受體交叉對話研究新進(jìn)展[J];生物物理學(xué)報;2013年10期

4 楊澤偉;王龍海;朱莉;郎志宏;羅學(xué)剛;;γ-氨基丁酸代謝旁路在植物響應(yīng)逆境脅迫中的作用機(jī)制研究[J];生物技術(shù)進(jìn)展;2014年02期

5 陳鋒;Andrew J Lawrence;梁建輝;;酒精濫用與成癮中樞神經(jīng)遞質(zhì)的研究進(jìn)展[J];中國藥物依賴性雜志;2007年01期

6 任麗敏;王磊;李新旺;;γ-氨基丁酸對藥物成癮的調(diào)節(jié)及機(jī)制[J];中國藥物濫用防治雜志;2008年03期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 章小兵;大鼠海馬抑制性氨基酸受體的功能調(diào)控[D];中國科學(xué)技術(shù)大學(xué);2008年

2 曹全梁;磁靶向系統(tǒng)中磁流體動態(tài)特性和行為控制研究[D];華中科技大學(xué);2013年

3 蔡洪信;白香丹膠囊對肝氣逆證大鼠海馬GABA_B受體表達(dá)及其G蛋白偶聯(lián)的離子通道和信號通路的影響[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2012年

4 朱槞槞;頻率和時間模式依賴的海馬突觸可塑性及其機(jī)制研究[D];中國科學(xué)技術(shù)大學(xué);2012年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 任麗敏;巴氯芬對嗎啡及應(yīng)激激發(fā)大鼠CPP恢復(fù)的影響[D];首都師范大學(xué);2008年

2 周健;磁性熒光納米粒子分離家蠅GABA受體蛋白[D];上海師范大學(xué);2010年

3 張陽慧;培養(yǎng)海馬CCK+神經(jīng)元電生理學(xué)特性研究[D];石河子大學(xué);2013年

4 王海東;藥物及其代謝產(chǎn)物的四極桿飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜研究[D];中南民族大學(xué);2013年

5 雷津平;酒依賴患者GABRA1基因組蛋白H3K9乙�；捌浠虮磉_(dá)的變化[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院;2013年

6 宋曉盛;用于藥物篩選的mGluR2突變體和用于失敏機(jī)制研究的mGluR5突變體的構(gòu)建及其功能檢測[D];華中科技大學(xué);2013年

7 楊海龍;GABA_B受體對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)的神經(jīng)元凋亡的保護(hù)效應(yīng)及其機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2013年

8 郭浩浩;GABA_B受體介導(dǎo)的JNK激活分子機(jī)制及其功能的初步研究[D];華中科技大學(xué);2013年

9 馬曉偉;GABA_BR二聚體及其輔助亞基（KCTD）功能的初步研究[D];華中科技大學(xué);2013年

本文編號：724124