本文關(guān)鍵詞：丙酸睪酮對BMSCs復(fù)合神經(jīng)脫細胞支架修復(fù)犬坐骨神經(jīng)缺損的作用

  更多相關(guān)文章： 丙酸睪酮 骨髓間充質(zhì)干細胞 組織工程化神經(jīng) 坐骨神經(jīng)缺損 犬

【摘要】：外周神經(jīng)缺損是臨床常見的損傷并發(fā)癥,該病患者中的大多數(shù)終生伴有部分神經(jīng)功能喪失或殘疾。隨著組織工程技術(shù)研究的飛速發(fā)展,應(yīng)用組織工程化神經(jīng)移植物替代自體移植修復(fù)外周神經(jīng)缺損的研究已初見成效。本試驗采用同種異體骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs)和神經(jīng)脫細胞支架(ANA)制備組織工程化神經(jīng),并移植修復(fù)模型犬坐骨神經(jīng)3 cm缺損,同時在修復(fù)肢小腿外側(cè)注射丙酸睪酮(TP),并設(shè)工程化神經(jīng)移植組、支架組、自體神經(jīng)翻轉(zhuǎn)移植組和缺損組作對照。術(shù)后5個月,行神經(jīng)電生理檢測、FG逆行追蹤、腓腸肌濕重比率、腓腸肌和修復(fù)神經(jīng)的組織形態(tài)學(xué)觀察。獲得結(jié)果如下：1.TP-聯(lián)合組和自體組均恢復(fù)運動感覺功能,恢復(fù)時間(3.5 M)接近,工程組恢復(fù)時間(4 M)稍晚,三組均可正常負重,后肢站立,輕度跛行,其中TP-聯(lián)合組試驗犬可跳躍離地,其他組未見此情況,支架組恢復(fù)效果較差,缺損組未恢復(fù)運動感覺功能。2.TP-聯(lián)合組的傳導(dǎo)速度患/健側(cè)百分比(33.19±3.59%)與自體組(39.79±12.03%)沒有顯著性差異(P0.05),TP-聯(lián)合組的波幅患/健側(cè)百分比(A：48.84±3.28%,B：48.06±6.17%)顯著高于自體組(A：45.55±3.50%,B：43.25±3.42%)和工程組(A：28.22±1.73%,B：44.97±1.37%)(P0.05)。3.自體組、TP-聯(lián)合組、工程組之間的腓腸肌濕重比率(TP-聯(lián)合組：80.62±0.96%,自體組：76.64±3.93%,工程組：72.02±10.22%)兩兩之間沒有顯著性差異,TP-聯(lián)合組的肌纖維面積患/健側(cè)百分比(48.78±8.18%)與自體組(43.78±11.45%)無顯著性差異,顯著優(yōu)于工程組(35.88±8.10%)(P0.05)。4.解剖觀察自體組和TP-聯(lián)合組的再生神經(jīng)接近正常神經(jīng),明顯優(yōu)于其他組。5.FG逆行示蹤顯示TP-聯(lián)合組、工程組之間的背根感覺神經(jīng)元的熒光量相似,稍低于自體組,TP-聯(lián)合組的脊髓運動神經(jīng)元的熒光量稍高于自體組與工程組。6.神經(jīng)三色染色觀察可見TP-聯(lián)合組的再生有髓神經(jīng)纖維密度稍高于自體組與工程組,TP-聯(lián)合組的有髓神經(jīng)纖維直徑患/健側(cè)百分比(47.84±10.38%)與自體組(43.58±12.60%)無顯著差異,但極顯著高于工程組(33.16±6.72%)(P0.01),髓鞘厚度患/健側(cè)百分比(63.48±9.85%)極顯著高于自體組(53.76±12.01%)。以上結(jié)果表明,TP對BMSCs-ANA工程化神經(jīng)修復(fù)犬坐骨神經(jīng)缺損具有很好的促進作用。BMSCs-ANA工程化神經(jīng)和TP聯(lián)合BMSCs-ANA工程化神經(jīng)均可用于修復(fù)犬3 cm坐骨神經(jīng)缺損,但后者的修復(fù)效果更好,可達到或超過白體神經(jīng)移植修復(fù)效果。
【關(guān)鍵詞】：丙酸睪酮 骨髓間充質(zhì)干細胞 組織工程化神經(jīng) 坐骨神經(jīng)缺損 犬
【學(xué)位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R745.4;R318.08
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-11
• 第一章 組織工程化神經(jīng)修復(fù)外周神經(jīng)缺損的研究進展11-22
• 1.1 外周神經(jīng)的結(jié)構(gòu)與功能11
• 1.2 外周神經(jīng)的缺損修復(fù)機理11
• 1.3 外周神經(jīng)缺損的臨床治療方法11-12
• 1.4 構(gòu)建組織工程化神經(jīng)的要素12-19
• 1.4.1 種子細胞的選擇12-14
• 1.4.1.1 施旺細胞12-13
• 1.4.1.2 胚胎干細胞13
• 1.4.1.3 神經(jīng)干細胞13
• 1.4.1.4 骨髓間充質(zhì)干細胞13-14
• 1.4.1.5 脂肪干細胞14
• 1.4.2 支架材料的選擇14-18
• 1.4.2.1 天然生物支架材料15-16
• 1.4.2.2 天然高分子材料16-17
• 1.4.2.3 不可生物降解的合成材料17
• 1.4.2.4 可生物降解的合成材料17-18
• 1.4.3 生物活性因子的選擇18-19
• 1.4.3.1 神經(jīng)生長因子18
• 1.4.3.2 腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子18
• 1.4.3.3 神經(jīng)營養(yǎng)素-318
• 1.4.3.4 睪酮18-19
• 1.4.3.5 胰島素19
• 1.5 組織工程化神經(jīng)的構(gòu)建19
• 1.5.1 種子細胞植入支架的過程19
• 1.5.2 組織工程化神經(jīng)的體外培養(yǎng)19
• 1.6 組織工程化神經(jīng)在修復(fù)外周神經(jīng)缺損中的應(yīng)用19-21
• 1.7 存在的問題及展望21-22
• 第二章 組織工程化神經(jīng)的構(gòu)建22-27
• 2.1 材料與方法22-24
• 2.1.1 試驗材料22-23
• 2.1.1.1 試劑與藥品22
• 2.1.1.2 主要試劑的配制方法22
• 2.1.1.3 主要儀器設(shè)備與耗材22-23
• 2.1.2 試驗方法23-24
• 2.1.2.1 同種異體神經(jīng)脫細胞支架的制備23-24
• 2.1.2.2 組織工程化神經(jīng)的構(gòu)建24
• 2.2 結(jié)果24-26
• 2.2.1 脫細胞支架的鑒定結(jié)果24
• 2.2.2 BMSCs的分離與鑒定24-25
• 2.2.3 組織工程化神經(jīng)的鑒定結(jié)果25-26
• 2.3 討論26-27
• 第三章 丙酸睪酮對BMSCs復(fù)合同種異體神經(jīng)脫細胞支架修復(fù)犬坐骨神經(jīng)3cm缺損作用的研究27-39
• 3.1 材料與方法27-30
• 3.1.1 試驗材料27-28
• 3.1.1.1 試驗動物27
• 3.1.1.2 試劑與藥品27
• 3.1.1.3 主要試劑的配制方法27-28
• 3.1.1.4 主要儀器設(shè)備與耗材28
• 3.1.2 試驗方法28-30
• 3.1.2.1 犬坐骨神經(jīng)缺損模型的制備和組織工程化神經(jīng)的橋接修復(fù)28-29
• 3.1.2.2 術(shù)后一般觀察29
• 3.1.2.3 神經(jīng)電生理學(xué)評估29-30
• 3.1.2.4 FG逆行追蹤30
• 3.1.2.5 組織學(xué)觀察30
• 3.1.2.6 統(tǒng)計學(xué)處理30
• 3.2 結(jié)果30-36
• 3.2.1 移植修復(fù)后模型犬的眼觀恢復(fù)效果30-31
• 3.2.2 神經(jīng)電生理學(xué)檢測31-32
• 3.2.3 FG逆行追蹤32-33
• 3.2.4 解剖觀察結(jié)果33
• 3.2.5 腓腸肌組織形態(tài)學(xué)觀察33-34
• 3.2.6 移植物組織學(xué)觀察34-36
• 3.3 討論36-39
• 3.3.1 丙酸睪酮和BMSCs-ANAs工程化神經(jīng)在修復(fù)犬坐骨神經(jīng)缺損中的作用36-37
• 3.3.2 工程化神經(jīng)移植過程中的注意事項37
• 3.3.3 試驗動物的護理37-38
• 3.3.4 神經(jīng)電生理檢測時的注意事項38
• 3.3.5 FG逆行追蹤檢測時的注意事項38
• 3.3.6 組間比較方法的改進38-39
• 結(jié)論39-40
• 參考文獻40-48
• 致謝48-49
• 作者簡介49

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本文編號：690400