納米級多孔負載人骨形成蛋白2基因修飾支架對前成骨細胞株分化的影響
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【摘要】:背景:對于骨缺損,通常需要通過骨組織或成骨材料的移植或充填進行修復(fù)。切取自體骨組織會給患者帶來額外的損傷和繼發(fā)畸形,為此,新一代的成骨材料研究迫在眉睫。目的:構(gòu)建含人骨形成蛋白2質(zhì)粒DNA的β-磷酸三鈣/膠原支架材料,并觀察其對小鼠前成骨細胞MC3T3-E1分化的影響。方法:制備納米級多孔β-磷酸三鈣/膠原支架并負載含人骨形成蛋白2目的基因的質(zhì)粒DNA形成基因修飾的支架材料。建立小鼠前成骨細胞細胞株MC3T3-E1與復(fù)合支架的體外培養(yǎng)體系。將其分為支架組和平皿組,再根據(jù)質(zhì)粒的濃度每組再分為2個小組。復(fù)合培養(yǎng)后取樣通過掃描電鏡和光鏡進行細胞形態(tài)學(xué)觀察;誘導(dǎo)1,3,7,14 d行茜素紅染色觀察鈣結(jié)節(jié)情況;實時熒光定量PCR檢測細胞周期;誘導(dǎo)1,3,7,14 d觀察成骨細胞相關(guān)基因Ⅰ型膠原αⅠ鏈基因、鋅指結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)錄因子、骨唾液酸蛋白的表達。結(jié)果與結(jié)論:(1)含人骨形成蛋白2為目的基因的質(zhì)粒DNA修飾納米β-磷酸三鈣/Ⅰ型膠原溶液復(fù)合材料上細胞黏附數(shù)、分化數(shù)量及材料表面分布都高于單純含人骨形成蛋白2為目的基因的質(zhì)粒DNA(P0.05);(2)通過用茜素紅染色、實時熒光定量PCR檢測,結(jié)果顯示支架組對小鼠前成骨細胞MC3T3-E1成骨能力的影響優(yōu)于平皿組;(3)結(jié)果提示,負載人骨形成蛋白2基因修飾的β-磷酸三鈣/膠原支架材料將具有骨傳導(dǎo)性的支架與具有生物活性的成骨因子復(fù)合,形成復(fù)合支架同時具備骨傳導(dǎo)性和骨誘導(dǎo)性,是一種理想的骨缺損修復(fù)材料。
【作者單位】: 佳木斯大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】: 骨形態(tài)發(fā)生蛋白質(zhì)類 膠原 細胞分化 組織工程 生物材料 骨生物材料 人骨形成蛋白 β-磷酸三鈣/膠原 分化 骨缺損 黑龍江省自然科學(xué)基金
【基金】:黑龍江省自然科學(xué)基金項目(H201487) 佳木斯大學(xué)研究生創(chuàng)新項目(LZR2015_015)~~
【分類號】:R318.08
【正文快照】: 文章快速閱讀: 高濃縮成骨基因聚合物包裹DNA支架對小鼠前成骨細胞MC3T3-E1成骨能力的影響 A:納米級β-磷酸小倒置顯微鏡下觀察細胞實驗結(jié)果: 三鈣平皿組C鼠形態(tài)負載人骨形成蛋白2基 前因修飾的β-磷酸三鈣/ B:Ⅰ型膠原溶液成骨茜情況素(紅第染1,色3檢,7測,鈣14結(jié)天節(jié))膠
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,本文編號:577722
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