FoxO1在持續(xù)張應(yīng)力促M(fèi)C3T3-E1細(xì)胞成骨向分化中的表達(dá)變化
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【摘要】:目的研究體外持續(xù)張應(yīng)力對MC3T3-E1細(xì)胞成骨向分化過程中Forkhead轉(zhuǎn)錄因子1(Forkhead box protein O1,Fox O1)表達(dá)的影響,探討Fox O1在持續(xù)張應(yīng)力促進(jìn)骨向分化機(jī)制中的作用。方法 MC3T3-E1細(xì)胞接種,應(yīng)用FX-4000TTM細(xì)胞應(yīng)力加載系統(tǒng)予以體外力學(xué)干預(yù)。施加頻率1 Hz、幅度10%的張應(yīng)力,按照加力時(shí)間長短分為對照和1、4、6、12、24、48、72 h組。運(yùn)用酶化學(xué)染色、實(shí)時(shí)熒光定量PCR、蛋白免疫印跡、細(xì)胞免疫熒光等方法觀察持續(xù)張應(yīng)力對MC3T3-E1成骨能力變化的影響及Fox O1基因、蛋白表達(dá)和細(xì)胞定位情況。結(jié)果 (1)持續(xù)張應(yīng)力能夠促進(jìn)MC3T3-E1骨向分化。細(xì)胞堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)表達(dá)量在24、48 h顯著高于對照組,骨鈣素(osteocalcin,OCN)表達(dá)水平于72 h達(dá)峰值并顯著高于對照組,骨特異性轉(zhuǎn)錄因子(runt-related transcription factor-2,Runx2)表達(dá)量在4 h與對照組相比顯著升高,其蛋白表達(dá)量也隨加力時(shí)間而改變。加力組ALP染色結(jié)果與對照組有顯著差異。(2)持續(xù)張應(yīng)力促進(jìn)Fox O1的基因和蛋白表達(dá)。Fox O1基因表達(dá)水平24 h增高最明顯,其蛋白表達(dá)量于12 h顯著上升。(3)加力6 h Fox O1胞核聚集,胞漿可見,但于24 h轉(zhuǎn)位在胞漿大量表達(dá)。結(jié)論 10%持續(xù)張應(yīng)力可以促進(jìn)MC3T3-E1的成骨向分化,同時(shí)Fox O1基因和蛋白表達(dá)上調(diào)、蛋白定位改變。探尋Fox O1表達(dá)水平和定位情況在力學(xué)刺激下的變化規(guī)律,可為研究其在力學(xué)刺激中發(fā)揮的作用提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
【作者單位】: 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院口腔顱頜面科上海市口腔醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】: Forkhead轉(zhuǎn)錄因子 持續(xù)張應(yīng)力 骨向分化 成骨細(xì)胞
【基金】:國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81371121,11342005,30901698,10972142) 上海市自然科學(xué)基金項(xiàng)目(13ZR1423700) 上海交通大學(xué)“醫(yī)工交叉基金”(YG2012MS40) 上海市科委基礎(chǔ)研究重點(diǎn)項(xiàng)目(12JC1405700) 上海交通大學(xué)SMC-晨星青年學(xué)者獎(jiǎng)勵(lì)計(jì)劃優(yōu)秀青年教師(B類計(jì)劃) 上海市教委創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)
【分類號】:R318.01
【正文快照】: 眾所周知,力學(xué)刺激是維持骨細(xì)胞生存和生長的重要因素,它能夠調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖及分化,在骨骼的發(fā)育、形成、重建中起關(guān)鍵作用。機(jī)械刺激對于骨組織的重建與再生尤為重要,不同大小、刺激方式及頻率的力可引發(fā)不同的生物學(xué)效應(yīng)。機(jī)械信號轉(zhuǎn)化為生物學(xué)信號的過程錯(cuò)綜復(fù)雜,作為眾多
【共引文獻(xiàn)】
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中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條
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【相似文獻(xiàn)】
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本文關(guān)鍵詞:FoxO1在持續(xù)張應(yīng)力促M(fèi)C3T3-E1細(xì)胞成骨向分化中的表達(dá)變化,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
,本文編號:509966
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