高黏度殼聚糖止血材料的制備及其應(yīng)用性研究
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【摘要】:殼聚糖作為資源豐富且可再生的生物資源高分子材料,在生態(tài)材料及生物材料的研究中占據(jù)了相當(dāng)?shù)谋壤。其諸多優(yōu)良的物理化學(xué)性質(zhì)和生物可降解性,生物相容性等優(yōu)點,對于拓寬殼聚糖在生物醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用范圍,開發(fā)出一系列生物相容性好的殼聚糖生物醫(yī)用材料具有重要意義。然而,殼聚糖在作為可吸收止血材料的應(yīng)用時,制備工藝尚不完善,且殼聚糖原料脫乙酰度和黏度對其止血性能影響的研究較少。基于這些原因,本文研究了高黏度、高脫乙酰度殼聚糖的制備方法和殼聚糖復(fù)合止血膜的制備工藝,并對制備產(chǎn)物進行了安全性和實用性檢測。主要結(jié)論如下: 1、按以下方法進行脫乙酰反應(yīng)可在降低能耗和物耗的前提下獲得高黏度和較高脫乙酰度殼聚糖。將洗滌干燥后的甲殼素粉碎至60-80目加入40%質(zhì)量分?jǐn)?shù)的NaOH溶液,使NaOH溶液與甲殼素質(zhì)量比為12:1,40℃下攪拌10min后立即放入800W、2450MHz微波爐內(nèi)加熱預(yù)處理3min取出,過濾后將產(chǎn)物加入50%濃度NaOH溶液,使NaOH溶液與殼素質(zhì)量比為12:1,混勻并控溫加熱至90℃,保持恒溫并攪拌40min,產(chǎn)物用純水沖洗至pH值7.2~7.5,在105℃下烘干3h。最后獲得的殼聚糖產(chǎn)物脫乙酰度為85.32%,表觀黏度為1271mPa·s,黏均分子量為1.16×106。 2、按以下方法制備殼聚糖復(fù)合膜,不僅止血性能優(yōu)秀,還具有良好的柔韌性和吸水性。①殼聚糖凝膠制備:取4g殼聚糖,加入2%乙酸溶液200mL,室溫(20~25℃)攪拌至完全溶解,配制成2%的殼聚糖溶液,靜置脫泡,之后過濾,得澄清殼聚糖溶液,在70℃下烘干1h,然后將上述殼聚糖溶液注入培養(yǎng)皿中,并放入沉析液過夜(沉析液由無水乙醇、5%濃度丙三醇、8%濃度NaOH按體積比100:10:1混合配制),至殼聚糖完全沉析形成殼聚糖凝膠,用去離子水沖洗至中性。②殼聚糖表面羧化:在密閉玻璃器皿中加氯乙酸、異丙醇(質(zhì)量比1:10),堿化后加熱至70℃,將步驟①獲得的殼聚糖凝膠放入并反應(yīng)30min后取出,用足量乙醇反復(fù)洗滌5-6次。③交聯(lián)反應(yīng)及凝血因子的引入:將經(jīng)過步驟②制得的殼聚糖凝膠浸入1%濃度的氯化鈣中進行交聯(lián)反應(yīng)30min,后用去離子水洗滌。④增塑反應(yīng):將步驟③得到的殼聚糖凝膠放入30%質(zhì)量濃度的丙三醇溶液中進行增塑反應(yīng)6h,取出瀝干,在70℃下鼓風(fēng)干燥3h,即得到高黏度殼聚糖復(fù)合止血膜。 3、溶血實驗和急性全身毒性實驗初步證明,本文方法制備的高黏度殼聚糖復(fù)合膜具有生物安全性。其中:溶血實驗發(fā)現(xiàn),本材料溶血率為0.73%,不會引發(fā)溶血,具有血液相容性;急性全身毒性實驗結(jié)果說明,本材料浸提液的大劑量注射不會引起小鼠體重異常及代謝紊亂,即不會引起急性全身毒性反應(yīng)。 4、體外降解實驗和凝血實驗說明,在相同條件下制備止血材料后,本文方法制備的高黏度殼聚糖較其他脫乙酰度和黏度的殼聚糖,生物降解速度史快,凝血效果更好。其中·:體外降解實驗中,脫乙酰度85%的殼聚糖材料在20000U/mL的PBS-Lysozyme溶液中在5h內(nèi)完全降解,說明85%左右的脫乙酰度有助于加速生物降解;體外凝血實驗中,本實驗獲得的高黏度殼聚糖材料使凝血時間較空白對照組縮短55.4%,兔耳動脈止血實驗中,實驗獲得的高黏度殼聚糖材料使止血時間較空白對照組縮短70.8%,兩實驗結(jié)果均優(yōu)于其他殼聚糖材料,這說明1000mPa·s以上的高黏度有助于加快凝血,此外,殼聚糖止血材料對經(jīng)過抗凝處理的血液同樣具有促進凝血的作用。
【關(guān)鍵詞】:殼聚糖 可吸收 止血 脫乙酰度 黏度 復(fù)合膜
【學(xué)位授予單位】:中央民族大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類號】:R318.08
【目錄】:
- 摘要2-5
- ABSTRACT5-10
- 第一章 緒論10-26
- 第一節(jié) 生物可吸收止血材料的研究進展及意義10-13
- 一、引言10
- 二、生物可吸收止血材料的主要分類及發(fā)展10-12
- 三、發(fā)展生物可吸收止血材料研究的意義12-13
- 第二節(jié) 殼聚糖止血材料的研究進展及意義13-26
- 一、殼聚糖止血材料的簡介13-18
- 二、殼聚糖止血材料的制備18-21
- 三、殼聚糖止血材料的發(fā)展趨勢21-22
- 四、本研究的研究目的及意義22-23
- 五、本研究的研究內(nèi)容與技術(shù)路線23-26
- 第二章 殼聚糖止血材料的制備26-50
- 第一節(jié) 甲殼素脫乙;苽涓唣ざ葰ぞ厶堑难芯26-39
- 一、材料與方法26-30
- 二、結(jié)果與討論30-39
- 第二節(jié) 高黏度殼聚糖止血膜的制備39-50
- 一、材料與方法40-42
- 二、結(jié)果與討論42-50
- 第三章 高黏度殼聚糖復(fù)合止血膜的生物安全性檢測50-55
- 第一節(jié) 溶血實驗50-55
- 一、材料與方法50-51
- 二、結(jié)果與討論51-53
- 二、結(jié)果與討論53-55
- 第四章 高黏度殼聚糖復(fù)合止血膜的實用性評價55-64
- 第一節(jié) 體外降解實驗55-58
- 一、材料與方法55-56
- 二、結(jié)果與討論56-58
- 第二節(jié) 體外凝血實驗58-61
- 一、材料與方法59
- 二、結(jié)果與討論59-61
- 第三節(jié) 兔耳動脈止血實驗61-64
- 一、材料與方法61
- 二、結(jié)果與討論61-64
- 第五章 全文結(jié)論64-66
- 參考文獻66-73
- 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄73-74
- 致謝74-75
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