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桑蠶絲低溫成形組織工程支架預(yù)研與PLGA支架的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2017-06-27 05:12

  本文關(guān)鍵詞:桑蠶絲低溫成形組織工程支架預(yù)研與PLGA支架的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:隨著社會(huì)的發(fā)展、人們生活水平的提高,人類對(duì)損傷、疾病的治療要求也越來越高,傳統(tǒng)的修復(fù)方法有自體組織移植術(shù)和同種異體器官移植法,雖然能夠取得一定的療效,但會(huì)導(dǎo)致很多并發(fā)癥及附加損傷。由此可見,應(yīng)用傳統(tǒng)的治療方法已經(jīng)難以滿足需求,必須尋找新的治療途徑。"組織工程學(xué)"這一概念,是RobertLanger和Joseph P Vacanti在80年代的時(shí)候首次提出的,為千千萬萬需要器官移植以及組織修復(fù)的患者帶來了曙光。 組織工程學(xué)是預(yù)先在體外構(gòu)建一個(gè)有生物活性的種植體,培養(yǎng)一段時(shí)間后,移植入體內(nèi),從而修復(fù)缺損的組織,最后替代組織、器官的一部分或全部功能,或者不移植入體內(nèi),在體外作為替代組織、器官部分功能的裝置,以延長生命活動(dòng),提高生活的質(zhì)量。組織工程學(xué)的研究內(nèi)容主要有三個(gè)方面:種子細(xì)胞、生物支架材料及生長因子。其中,支架是細(xì)胞生長的場所,,細(xì)胞在其上生長、增殖、分化,并最終長成一個(gè)器官或組織,因此,生物支架材料的研究是組織工程學(xué)研究的一個(gè)非常重要的方面。 本文包括兩部分內(nèi)容,即桑蠶絲低溫成形組織工程支架的研究和修復(fù)脊髓損傷的動(dòng)物實(shí)驗(yàn),其中,第一章、第二章、第三章、第四章闡述了桑蠶絲低溫成形組織工程支架的研究的有關(guān)內(nèi)容,第五章闡述了修復(fù)脊髓損傷的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的有關(guān)內(nèi)容。 桑蠶絲是由桑蠶體內(nèi)的絹絲腺合成、分泌的纖維蛋白,是一種天然的高分子生物材料,具有良好的生物相容性和力學(xué)性能,以及較慢的降解速度,在醫(yī)療領(lǐng)域已經(jīng)獲得了廣泛的應(yīng)用。然而,低溫沉積制造工藝是一種將材料的擠壓/噴射過程和熱致相分離過程集成起來的一種快速成型技術(shù),主要是在低溫室中形成所需模形,然后再利用熱致相分離法將材料和溶劑相分離。此方法成形的支架具有較高的孔隙率;具有精確的三維結(jié)構(gòu);可以很好的保持材料的生物性能。綜上,本文考慮采用低溫沉積制造工藝將桑蠶絲成形為三維的支架,并進(jìn)行了相關(guān)內(nèi)容的研究,希望將二者的優(yōu)勢結(jié)合,擴(kuò)大桑蠶絲的應(yīng)用領(lǐng)域。 組織工程的迅速興起給脊髓損傷后的神經(jīng)功能恢復(fù)帶來了新的希望,而支架的三維結(jié)構(gòu)成為用組織工程方法治療脊髓損傷的關(guān)鍵因素。本文采用PLGA作為生物支架材料,通過低溫快速成形工藝制備了脊髓支架,對(duì)支架的各項(xiàng)性能進(jìn)行表征后,結(jié)果表明支架的孔隙率、親水性、降解性等滿足組織工程脊髓支架的要求。然后采用雪旺細(xì)胞進(jìn)行了支架的體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),觀察顯示,雪旺細(xì)胞在PLGA支架上生長、增殖情況良好,實(shí)驗(yàn)表明支架的細(xì)胞相容性良好,適合雪旺細(xì)胞粘附和生長。最后采用大鼠進(jìn)行了支架修復(fù)脊髓損傷的動(dòng)物實(shí)驗(yàn),即先將大鼠的脊髓損傷,然后將粘附有雪旺細(xì)胞的PLGA支架移植到大鼠的脊髓損傷部位,正常飼養(yǎng)一個(gè)月,觀察大鼠的恢復(fù)情況,每周進(jìn)行一次BBB評(píng)分。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在實(shí)驗(yàn)后的第1周,脊髓損傷后的大鼠均有不同程度的截癱,但是從第2周開始,大鼠的BBB評(píng)分開始慢慢的恢復(fù)。
【關(guān)鍵詞】:組織工程 桑蠶絲 低溫沉積制造 支架 脊髓損傷
【學(xué)位授予單位】:杭州電子科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R318.08
【目錄】:
  • 摘要5-7
  • ABSTRACT7-9
  • 目錄9-12
  • 第1章 緒論12-23
  • 1.1 組織工程與組織工程支架12-14
  • 1.1.1 組織工程概述12-13
  • 1.1.2 組織工程支架的作用13-14
  • 1.2 制備支架的方法14-17
  • 1.2.1 制備支架的傳統(tǒng)方法14-16
  • 1.2.2 快速成形支架的技術(shù)16-17
  • 1.3 低溫沉積成形技術(shù)(LDM)17-19
  • 1.4 本文的意義和主要研究內(nèi)容19-23
  • 1.4.1 本文的意義19-21
  • 1.4.2 本文的主要研究內(nèi)容21-23
  • 第2章 桑蠶絲簡介23-28
  • 2.1 桑蠶絲的結(jié)構(gòu)與組成23
  • 2.2 桑蠶絲的性能23-24
  • 2.2.1 桑蠶絲的生物相容性23
  • 2.2.2 桑蠶絲的生物力學(xué)性能23-24
  • 2.2.3 桑蠶絲的降解性24
  • 2.3 細(xì)胞對(duì)桑蠶絲的反應(yīng)24-26
  • 2.4 桑蠶絲用作組織工程支架材料26-28
  • 第3章 桑蠶絲素溶液的制備28-33
  • 3.1 實(shí)驗(yàn)材料28
  • 3.2 實(shí)驗(yàn)器材28
  • 3.3 實(shí)驗(yàn)方法28-29
  • 3.3.1 脫膠28
  • 3.3.2 溶解工藝28
  • 3.3.3 溶解方法28-29
  • 3.4 結(jié)果和討論29-33
  • 3.4.1 磷酸溶解桑蠶絲素纖維29-30
  • 3.4.2 溴化鋰溶解桑蠶絲素纖維30
  • 3.4.3 硫氰酸鋰溶解桑蠶絲素纖維30-31
  • 3.4.4 氫氧化鈉溶解桑蠶絲素纖維31
  • 3.4.5 硝酸鈣溶解桑蠶絲素纖維31-32
  • 3.4.6 氯化鈣溶解桑蠶絲素纖維32-33
  • 第4章 低溫成形桑蠶絲組織工程支架33-46
  • 4.1 低溫沉積工藝過程33-39
  • 4.2 低溫成形桑蠶絲組織工程支架39-43
  • 4.2.1 桑蠶絲和殼聚糖的組織工程支架39-41
  • 4.2.2 桑蠶絲和 PLGA 的組織工程支架41-43
  • 4.3 支架的性能表征43-46
  • 4.3.1 支架的降解性能表征43-44
  • 4.3.2 支架的孔隙率表征44-46
  • 第5章 組織工程支架修復(fù)脊髓損傷的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)46-61
  • 5.1 實(shí)驗(yàn)背景46-48
  • 5.1.1 支架材料聚乳酸-羥基乙酸(PLGA)46-47
  • 5.1.2 PLGA 支架的制備47-48
  • 5.2 支架性能表征48-50
  • 5.2.1 支架的孔隙率測定48
  • 5.2.2 支架的力學(xué)性能測定48-49
  • 5.2.3 支架的降解速率測定49-50
  • 5.3 大鼠雪旺細(xì)胞的體外培養(yǎng)和純化50-53
  • 5.3.1 雪旺細(xì)胞簡介50
  • 5.3.2 值塊法和酶消化法相結(jié)合50-51
  • 5.3.3 結(jié)論51
  • 5.3.4 實(shí)驗(yàn)材料和方法51-52
  • 5.3.5 結(jié)果和分析52-53
  • 5.4 PLGA 支架的體外細(xì)胞培養(yǎng)53-55
  • 5.4.1 實(shí)驗(yàn)材料和方法53
  • 5.4.2 結(jié)果53-55
  • 5.4.3 討論55
  • 5.5 支架修復(fù)脊髓損傷的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)55-61
  • 5.5.1 實(shí)驗(yàn)材料和方法55-56
  • 5.5.2 修復(fù)效果評(píng)估56-59
  • 5.5.3 結(jié)果及結(jié)論59-61
  • 第6章 總結(jié)與展望61-63
  • 致謝63-64
  • 參考文獻(xiàn)64-69
  • 附錄69

【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞:桑蠶絲低溫成形組織工程支架預(yù)研與PLGA支架的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):488671

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