目的制備人包皮組織脫細(xì)胞基質(zhì)移植物(AMGs),探討其浸提液對(duì)兔尿道黏膜細(xì)胞毒性。方法制備人包皮組織脫細(xì)胞基質(zhì)后,通過(guò)Masson染色觀察脫細(xì)胞后基質(zhì)的表征,掃描電子顯微鏡觀察其孔徑大小。體外培養(yǎng)尿道黏膜細(xì)胞,采用免疫熒光鑒定其AE3表達(dá)。尿道黏膜細(xì)胞與AMGs基質(zhì)浸提液體外共培養(yǎng),MTT法檢測(cè)AMGs浸提液對(duì)尿道黏膜細(xì)胞毒性。結(jié)果 Masson染色顯示細(xì)胞去除干凈,只有膠原蛋白構(gòu)成的支架,掃描電鏡顯示支架的孔徑為20～50μm,分布均勻,形態(tài)良好。適當(dāng)濃度的AMGs基質(zhì)浸提液對(duì)尿道黏膜細(xì)胞無(wú)明顯毒性。結(jié)論人包皮組織脫細(xì)胞基質(zhì)為理想的AMGs支架材料,制備的AMGs材料細(xì)胞毒性小,有一定的實(shí)用價(jià)值。

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圖1 脫細(xì)胞基質(zhì)移植物Masson染色

支架材料是組織工程中常用的材料，在機(jī)體組織和器官修復(fù)過(guò)程中具有重要作用，對(duì)于維持機(jī)體一定的生物學(xué)性能及組織和細(xì)胞的增殖也有不可或缺的影響[6,7]。理想的支架材料應(yīng)具有良好的生物相容性，降解性，無(wú)毒副作用，且不會(huì)對(duì)其他組織產(chǎn)生免疫排斥[8,9]。利用天然組織進(jìn)行改造制備的支架材料....

圖2 脫細(xì)胞基質(zhì)移植物掃描電子顯微鏡表征

圖1脫細(xì)胞基質(zhì)移植物Masson染色圖3免疫熒光鑒定兔尿道黏膜細(xì)胞標(biāo)尺示100μm

圖3 免疫熒光鑒定兔尿道黏膜細(xì)胞標(biāo)尺示100μm

圖2脫細(xì)胞基質(zhì)移植物掃描電子顯微鏡表征圖4尿道黏膜細(xì)胞在脫細(xì)胞基質(zhì)移植物浸提液中生長(zhǎng)狀態(tài)標(biāo)尺示100μm

圖4 尿道黏膜細(xì)胞在脫細(xì)胞基質(zhì)移植物浸提液中生長(zhǎng)狀態(tài)標(biāo)尺示100μm

圖3免疫熒光鑒定兔尿道黏膜細(xì)胞標(biāo)尺示100μm免疫熒光染色對(duì)兔尿道黏膜細(xì)胞的鑒定結(jié)果顯示，該細(xì)胞有大量的AE3蛋白的表達(dá)。AE3又稱為堿性細(xì)胞角蛋白，在黏膜和上皮細(xì)胞中大量存在，從細(xì)胞形態(tài)看呈多觸角不規(guī)則的形態(tài)，因此鑒定為尿道黏膜細(xì)胞。

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