目的 軟骨缺損一直是臨床工作的一大難題,自體軟骨來源少,異體軟骨吸收明顯,均限制了同種軟骨組織的應用,近年組織工程的研究發(fā)展為這一難題的解決帶來了新的機遇,大量軟骨組織工程的研究,帶動了人工軟骨時代的到來。本實驗體外誘導外周血源性間充質干細胞獲得軟骨種子細胞,分離異體兔肋軟骨獲取脫細胞軟骨,兩者共同培養(yǎng)以構建新型軟骨組織,為臨床修復器官缺損及再造提供實驗基礎。 材料與方法 創(chuàng)建新西蘭兔創(chuàng)傷模型,提取兔外周血間充質干細胞,體外行干細胞原代培養(yǎng)、傳代、凍存、復蘇及誘導分化成軟骨。體外誘導培養(yǎng)生長良好的第三代間充質干細胞14d獲得軟骨種子細胞,顯微鏡下觀察各期細胞生長特性及形態(tài)特征,制作種子細胞爬片行甲苯胺藍染色、Ⅱ型膠原免疫細胞化學：聯(lián)合中性去垢劑—酶法獲得同種異體兔肋軟骨脫細胞支架,制備石蠟切片行HE染色、甲苯胺藍染色、Ⅱ型膠原免疫細胞化學,鏡下觀察染色結果；制備掃描電鏡樣本,掃描電鏡下觀察支架形態(tài)與結構。自體間充質源性軟骨種子細胞與異體脫細胞軟骨體外復合培養(yǎng)7d獲得復合軟骨,將復合軟骨植入自體實驗兔皮下,根據(jù)植入材料的差異分為A、B、C、D四組(A組：植入異體新鮮軟骨B組：植...

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學位級別】：碩士

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中文摘要
Abstract
符號說明
前言
實驗一 兔外周血間充質干細胞體外分離培養(yǎng)凍存及分化成軟骨特性的實驗研究
    1 實驗材料
    2 實驗方法
    3 實驗結果
實驗二 兔肋軟骨脫細胞基質的制備
    1 實驗材料
    2 實驗方法
    3 實驗結果
實驗三 間充質源性軟骨種子細胞復合脫細胞軟骨構建軟骨組織的實驗研究
    1 實驗材料
    2 實驗方法
    3 實驗結果
討論
結論
附圖
參考文獻
致謝
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本文編號：4016345