目的 軟骨缺損一直是臨床工作的一大難題,自體軟骨來源少,異體軟骨吸收明顯,均限制了同種軟骨組織的應(yīng)用,近年組織工程的研究發(fā)展為這一難題的解決帶來了新的機遇,大量軟骨組織工程的研究,帶動了人工軟骨時代的到來。本實驗體外誘導(dǎo)外周血源性間充質(zhì)干細胞獲得軟骨種子細胞,分離異體兔肋軟骨獲取脫細胞軟骨,兩者共同培養(yǎng)以構(gòu)建新型軟骨組織,為臨床修復(fù)器官缺損及再造提供實驗基礎(chǔ)。 材料與方法 創(chuàng)建新西蘭兔創(chuàng)傷模型,提取兔外周血間充質(zhì)干細胞,體外行干細胞原代培養(yǎng)、傳代、凍存、復(fù)蘇及誘導(dǎo)分化成軟骨。體外誘導(dǎo)培養(yǎng)生長良好的第三代間充質(zhì)干細胞14d獲得軟骨種子細胞,顯微鏡下觀察各期細胞生長特性及形態(tài)特征,制作種子細胞爬片行甲苯胺藍染色、Ⅱ型膠原免疫細胞化學(xué)：聯(lián)合中性去垢劑—酶法獲得同種異體兔肋軟骨脫細胞支架,制備石蠟切片行HE染色、甲苯胺藍染色、Ⅱ型膠原免疫細胞化學(xué),鏡下觀察染色結(jié)果；制備掃描電鏡樣本,掃描電鏡下觀察支架形態(tài)與結(jié)構(gòu)。自體間充質(zhì)源性軟骨種子細胞與異體脫細胞軟骨體外復(fù)合培養(yǎng)7d獲得復(fù)合軟骨,將復(fù)合軟骨植入自體實驗兔皮下,根據(jù)植入材料的差異分為A、B、C、D四組(A組：植入異體新鮮軟骨B組：植...

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
符號說明
前言
實驗一 兔外周血間充質(zhì)干細胞體外分離培養(yǎng)凍存及分化成軟骨特性的實驗研究
    1 實驗材料
    2 實驗方法
    3 實驗結(jié)果
實驗二 兔肋軟骨脫細胞基質(zhì)的制備
    1 實驗材料
    2 實驗方法
    3 實驗結(jié)果
實驗三 間充質(zhì)源性軟骨種子細胞復(fù)合脫細胞軟骨構(gòu)建軟骨組織的實驗研究
    1 實驗材料
    2 實驗方法
    3 實驗結(jié)果
討論
結(jié)論
附圖
參考文獻
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文
學(xué)位論文評閱及答辯情況表



本文編號：4016345