目的:探究納米形貌誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)分化中的作用以及相關(guān)分子機(jī)制。方法:利用陽(yáng)極氧化法制備二氧化鈦納米管形貌,使用qRT-PCR技術(shù),RNA-seq技術(shù),分析接種在納米形貌表面的間充質(zhì)干細(xì)胞的基因表達(dá)情況。并篩選對(duì)成骨相關(guān)的信號(hào)通路中的成員,觀察他們基因上調(diào)或下調(diào)情況。結(jié)果:在鈦金屬表面構(gòu)建出了納米形貌,利用實(shí)時(shí)定量PCR確定了成骨相關(guān)的基因:堿性磷酸酶(ALP),骨橋蛋白(OPN)和骨鈣素(OCN)相比沒(méi)有納米形貌的鈦片上培養(yǎng)的細(xì)胞均發(fā)生上調(diào)。通過(guò)對(duì)這些基因相關(guān)的成骨信號(hào)通路進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析(篩選基因P<0.05),發(fā)現(xiàn)在BMP2信號(hào)通路中的相關(guān)蛋白基因表達(dá)沒(méi)有太大變化,同時(shí)Notch以及Wnt非經(jīng)典信號(hào)通路中相關(guān)蛋白基因發(fā)生較為明顯變化。結(jié)論:通過(guò)分析間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化相關(guān)基因,以及轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析表明在納米形貌誘導(dǎo)BMSC分化過(guò)程中,相對(duì)于平坦的表面,納米形貌啟動(dòng)了Notch以及非經(jīng)典的Wnt信號(hào)通路,因此表現(xiàn)出更加優(yōu)良的促成骨分化的效果。

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【文章目錄】：
前言
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 材料制備
        1.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.3 qRT-PCR
        1.2.4 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序及數(shù)據(jù)分析
    1.3 統(tǒng)計(jì)分析
2 結(jié)果
    2.1 材料表面形貌
    2.2 成骨基因表達(dá)
    2.3 轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析
3 討論



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