水凝膠因具有類(lèi)似軟組織的性質(zhì)和能夠?qū)崿F(xiàn)細(xì)胞的均勻包載而被廣泛的認(rèn)為是三維細(xì)胞培養(yǎng)的理想支架。然而,水凝膠納米級(jí)孔徑限制了細(xì)胞的黏附和增殖以及新組織的形成,甚至限制了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和細(xì)胞代謝廢物在凝膠內(nèi)外的擴(kuò)散。為了克服這些缺點(diǎn),有學(xué)者利用各種方法在凝膠結(jié)構(gòu)中創(chuàng)造了大孔,其中,通過(guò)孔原浸出法引入大孔,可以方便地控制凝膠體中的孔隙度,有利于研究大孔結(jié)構(gòu)對(duì)細(xì)胞行為和新組織形成的誘導(dǎo)作用。盡管近年來(lái),大孔的水凝膠支架在三維細(xì)胞培養(yǎng)和組織工程方面取得了很大的進(jìn)展,但其未來(lái)的發(fā)展仍面臨著一些挑戰(zhàn),表現(xiàn)為在凝膠體中形成較大的孔也會(huì)導(dǎo)致凝膠結(jié)構(gòu)的滲透性大幅度增加,進(jìn)而導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的迅速擴(kuò)散以及加速了水凝膠的降解速率。為此對(duì)人們期望通過(guò)設(shè)計(jì)或引入生物活性因子來(lái)促進(jìn)細(xì)胞的增殖及黏附。在本工作中,我們制備了一種基于聚谷氨酸-g-酪胺/cRGDfk(PLG-g-TA/RGD)的新型酶催化交聯(lián)水凝膠,用于兔透明軟骨細(xì)胞黏附和三維細(xì)胞培養(yǎng)的研究。成膠實(shí)驗(yàn)證明,PLG-g-TA/RGD聚合物材料在辣根過(guò)氧化物酶(HRP)和H2O2存在下,能夠通過(guò)酪氨基團(tuán)的自交聯(lián)快速形成水凝膠。而相同條件下,環(huán)狀多肽(cRGDfk)的引入...

【文章頁(yè)數(shù)】：50 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１?ＰＬＧ－ｐ－ＴＡ／ＲＧＤ酶交聯(lián)水凝膠的交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)示意??

肽對(duì)透明軟骨細(xì)胞黏附和三維細(xì)胞培養(yǎng)的影響。我們依據(jù)先前的研究??工作，通過(guò)共價(jià)鍵合制備了?ｃＲＧＤｆｋ接枝率０．８％的聚氨基酸材料％??（圖１）。通過(guò)核磁共振氫譜確定該聚聚合物材料的結(jié)構(gòu)，采用動(dòng)態(tài)??流變學(xué)分析表征了水凝膠的動(dòng)態(tài)力學(xué)性能，同時(shí)考察了?ＰＬＧ－ｇ－ＴＡ／??ＲＧＤ水....

圖２?ＰＬＧ－ｆＴＡ／ＲＧＤ聚合物的合成路線(xiàn)??－

?ｃＲＧＤｆｋ??圖２?ＰＬＧ－ｆＴＡ／ＲＧＤ聚合物的合成路線(xiàn)??如圖２所示，首先由正己胺引發(fā)ＢＬＧ－ＮＣＡ開(kāi)環(huán)聚合制備得到聚??谷氨酸芐酯（ＰＢＬＧ），再脫掉芐基保護(hù)獲得ＰＬＧ?（聚Ｌ－谷氨酸）。然??后再通過(guò)ＥＤＣ／ＮＨＳ活化的酰胺化反應(yīng)將酪胺（ＴＡ）及ｃＲＧＤｆｋ分別??依....

圖３芐基保護(hù)基不同脫除時(shí)間后聚合物的１Ｈ?ＮＭＲ譜圖??

ｐｐｍ圖３芐基保護(hù)基不同脫除時(shí)間后聚合物的１Ｈ?ＮＭＲ譜圖??１９??

圖５聚合物溶液經(jīng)酶催化反應(yīng)后的成膠照片??

圖５聚合物溶液經(jīng)酶催化反應(yīng)后的成膠照片??

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