干細胞是近年來利用外源性轉錄因子將已分化成熟的細胞進行重編程得到誘導多能干細胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs),而這類干細胞具有與胚胎干細胞相似的功能和特征,利用誘導多能干細胞構建三維神經(jīng)網(wǎng)絡,對研究中樞神經(jīng)系統(tǒng)和神經(jīng)疾病具有十分重要的意義。利用帶有疾病基因的成熟體細胞,將其重編程為多能干細胞,由這種細胞分化而來的神經(jīng)細胞具有疾病的原特質,這種疾病特異性iPSCs為研究疾病的機制和發(fā)病過程提供了樣本,也為藥物開發(fā)、治療方案的制定提供了動力。基于三維支架和人源誘導多能干細胞,本論文構建了3D神經(jīng)網(wǎng)絡結構,完成了人源誘導干細胞定向分化為運動神經(jīng)元及神經(jīng)網(wǎng)絡的構建,主要開展的工作及得到的結論如下:1.通過加入誘導因子,將hiPSCs定向分化為神經(jīng)細胞(hiPSCs-NC),通過倒置顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)分化后的細胞呈現(xiàn)神經(jīng)細胞生理形態(tài),免疫熒光染色和逆轉錄-聚合酶鏈式反應結果顯示hiPSCs-NC能表達其特異性蛋白和特征基因。2.通過加入誘導因子,將hiPSCs定向分化為運動神經(jīng)元,通過免疫熒光染色和流式細胞術分別對分化后的細胞進行鑒定,證明通過現(xiàn)階段探索...

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.1三維構建疾病模型

其已在生命科學/醫(yī)學等領域表現(xiàn)出了驚人的價值和前景[13-15]，它首先利用光刻技術在硅片上制作出實驗所需的結構，接著利用聚二甲基硅氧烷（PDMS）將結構復制出來，然后利用plasma將聚二甲基硅氧烷和玻璃片進行表面修飾，使其表面帶上羥基，最后將修飾好的PDMS和玻璃片貼....

圖1.2靜電紡絲的原理

圖1.2靜電紡絲的原理靜電紡絲在組織工程中的應用電紡絲可以制備直徑在微米甚至納米級別的纖維，可以在一定程的仿生。眾所周知，纖維和蛋白在生物體這個系統(tǒng)中是必不可少皮中，一旦出現(xiàn)傷口時，成纖維細胞產(chǎn)生大量的膠質纖維等物質合做出了重大貢獻，可是說是結締組織中重要的一部分[28]；而膠....

圖1.3神經(jīng)元細胞結構

其結構可分為細胞體和突觸兩個部分（如圖1.3），突觸包括樹突和軸突[85]。神經(jīng)膠質細胞在中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng)中大量存在；單從細胞的數(shù)量來看，神經(jīng)膠質細胞的數(shù)量是遠遠大于神經(jīng)元細胞的。星形膠質細胞、少突膠質細胞、小膠質細胞等[86-89]都屬于神經(jīng)膠質細胞的一種。在傳統(tǒng)的認知中，大....

圖2.1iPSCs向神經(jīng)細胞分化時間表

江漢大學碩士研究生論文第23頁4）在分化的第7天，以神經(jīng)細胞分化培養(yǎng)基I（KSRmedium）：神經(jīng)細胞分化培養(yǎng)基II（N2medium）為1:3的比例配制培養(yǎng)基，對細胞進行培養(yǎng)。5）在分化的第8天，加入神經(jīng)細胞分化培養(yǎng)基II（N2medium），對細....

本文編號：3963790