背景:細(xì)胞體外培養(yǎng)情況下無法在遠(yuǎn)離營養(yǎng)物質(zhì)200μm以上的區(qū)域存活,血管網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建對組織工程領(lǐng)域厚組織和器官再生至關(guān)重要,同軸細(xì)胞打印為體外構(gòu)建類血管通道提供了一種新的方式。目的:優(yōu)化生物墨水的同軸細(xì)胞打印性能,制備具有類血管結(jié)構(gòu)的組織工程支架。方法:通過間歇式巴氏滅菌制備無菌海藻酸鈉溶液,冷凍保存;以脫膠蠶絲為原料制備無菌絲素蛋白凍干粉,密封保存;將絲素蛋白凍干粉加入解凍的海藻酸鈉溶液中,再加入人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,作為生物墨水;將生物3D打印機(jī)的外軸連接生物墨水,內(nèi)軸連接交聯(lián)劑,同軸打印類血管支架材料,進(jìn)行光學(xué)相干層析成像掃描、掃描電鏡觀察;拉伸測試海藻酸鈉與絲素蛋白/海藻酸鈉同軸打印環(huán)形試件(不含細(xì)胞)的彈性模量。采用冷凍保存7 d的海藻酸鈉溶液與人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞制作同軸打印支架,冷凍保存7 d的海藻酸鈉溶液、人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞與密封保存6個月的絲素蛋白凍干粉制作同軸打印支架,培養(yǎng)24 h后死活染色觀察細(xì)胞存活率。設(shè)計打印串聯(lián)與并聯(lián)結(jié)構(gòu)的類血管支架,培養(yǎng)1,3,7,10,14 d后檢測細(xì)胞增殖情況。結(jié)果與結(jié)論:①光學(xué)相干層析成像掃描顯示,該混合生物墨水最高打印高度為9層,整體厚度約為4....

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圖1材料制備流程示意圖

使用優(yōu)化后雙網(wǎng)絡(luò)生物墨水能順利制備類血管支架，支架脫水干燥后掃電鏡結(jié)果表明中空纖維絲不同部位材料孔隙結(jié)構(gòu)有所不同，由于交聯(lián)劑由內(nèi)而外存在一定的擴(kuò)散速率和濃度差異，形成了內(nèi)密外疏的孔隙結(jié)構(gòu)，F(xiàn)127的析出形成微孔結(jié)構(gòu)，有利于內(nèi)外營養(yǎng)物質(zhì)和代謝廢物的交換，為細(xì)胞生長提供了更多的空間[....

圖1材料制備流程示意圖

圖1材料制備流程示意圖圖2類血管支架設(shè)計模型

圖2類血管支架設(shè)計模型

圖1材料制備流程示意圖圖3材料保質(zhì)期及生物相容性測試

圖6類血管支架可打印高度及光學(xué)相干層析成像縱向截面掃描圖

圖5類血管支架材料表面形貌掃描電鏡觀(標(biāo)尺為10μm)圖7不同類血管通道結(jié)構(gòu)對細(xì)胞增殖的影響

本文編號：3961293