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網(wǎng)狀玻璃碳聯(lián)合犬骨髓基質(zhì)干細胞體外培養(yǎng)及體內(nèi)組織相容性的實驗研究

發(fā)布時間:2017-05-26 07:14

  本文關(guān)鍵詞:網(wǎng)狀玻璃碳聯(lián)合犬骨髓基質(zhì)干細胞體外培養(yǎng)及體內(nèi)組織相容性的實驗研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:本研究旨在通過體外實驗明確網(wǎng)狀玻璃碳無毒性且有利于細胞生長,通過體內(nèi)實驗將網(wǎng)狀玻璃碳植入股骨大轉(zhuǎn)子6周、12周后采用組織病理切片,masson染色觀察骨組織與網(wǎng)狀玻璃碳的組織相容性。方法:體外實驗:提取犬的股骨干遠端的骨髓基質(zhì)干細胞,采用差數(shù)貼壁和培養(yǎng)基選擇法提取骨髓基質(zhì)干細胞,在體外培養(yǎng)傳代,取第3代細胞系通過細胞流式分析法進行細胞鑒定。通過MTT實驗檢測網(wǎng)狀玻璃碳的細胞毒性。取第3代細胞,以2.0×109 L-1的細胞濃度種植在網(wǎng)狀玻璃碳表面,聯(lián)合培養(yǎng)14d后觀察細胞的黏附與增殖情況。體內(nèi)實驗:選取犬為實驗動物,手術(shù)切開暴露股骨大轉(zhuǎn)子,用鉆頭從股骨頸長軸與股骨外側(cè)交點沿著股骨頸方向鉆孔到達軟骨下4-5mm處后植入網(wǎng)狀玻璃碳,在術(shù)后6周、12周分批將犬處死,取植入材料的大轉(zhuǎn)子處標本,采用固定、脫鈣液脫鈣,做病理切片,行masson染色觀察骨組織及結(jié)締組織在網(wǎng)狀玻璃碳的長入情況。結(jié)果:(1)倒置顯微鏡觀察結(jié)果顯示:網(wǎng)狀玻璃碳聯(lián)合犬骨髓基質(zhì)干細胞培養(yǎng)7天后材料近周細胞較少,材料外圍有較多的細胞黏附生長;14天后細胞逐漸向支架材料靠近,材料表面及材料各個空隙內(nèi)都有大量的細胞黏附,并有少量的細胞基質(zhì)分泌;21天后細胞大量增殖,連接成片,填充在材料表面及空隙內(nèi),并有大量的細胞基質(zhì)分泌,部分細胞出現(xiàn)接觸性抑制。(2)掃描電鏡觀察結(jié)果顯示:細胞與材料共同培養(yǎng)14天后,細胞大多呈梭形,部分為多角形,延展性良好,細胞周圍有大量細胞外基質(zhì),少量細胞伸出偽足黏附于材料表面及空隙中。(3)體內(nèi)實驗結(jié)果顯示:大量的結(jié)締組織、骨組織填充在網(wǎng)狀玻璃碳的各空隙中。結(jié)論:體外實驗結(jié)果表明網(wǎng)狀玻璃碳無毒性且有利于骨髓基質(zhì)干細胞黏附及生長。體內(nèi)實驗結(jié)果表明網(wǎng)狀玻璃碳支架材料在動物體內(nèi)有良好的組織相容性。
【關(guān)鍵詞】:網(wǎng)狀玻璃碳 骨髓基質(zhì)干細胞 組織相容性 組織工程材料 骨缺損
【學位授予單位】:遵義醫(yī)學院
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R687.3;R318.08
【目錄】:
  • 中英縮略詞對照表4-5
  • 中文摘要5-6
  • 英文摘要6-8
  • 前言8-9
  • 材料與方法9-12
  • 結(jié)果12-18
  • 討論18-20
  • 結(jié)論20-21
  • 參考文獻21-24
  • 綜述24-33
  • 參考文獻31-33
  • 致謝33-34
  • 作者簡介34

【參考文獻】

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本文編號:396083

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