海藻酸鈣微膠珠具有良好的生物相容性、可降解、機械強度高、韌性好等優(yōu)點,已被廣泛應(yīng)用于組織工程研究。骨粉中含有大量的羥基磷灰石及BMP等生長因子,具有良好的骨誘導(dǎo)活性。結(jié)合上述兩種材料的優(yōu)點,制備了一種復(fù)合海藻酸鈣/骨粉微膠珠,并系統(tǒng)研究了人源脂肪干細胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)在其中的最佳包埋密度。通過正交實驗綜合考慮海藻酸鈉溶液濃度、氯化鈣溶液濃度和骨粉密度對海藻酸鈣/骨粉微膠珠機械強度及傳質(zhì)性能的影響,并采用液滴法制備了最優(yōu)化的用于ADSCs體外增殖分化的微膠珠。結(jié)果表明,海藻酸鈉溶液的濃度對微膠珠傳質(zhì)能力和機械強度的影響最大,CaCl2溶液濃度其次,骨粉密度的影響最小。當(dāng)海藻酸鈉溶液濃度、CaCl2溶液濃度和骨粉密度分別為2.5%,4.5%和5.0mg/mL時,微膠珠的性能最好。對細胞擴增倍數(shù)的比較和死活染色等檢測表明,當(dāng)ADSCs的初始包埋密度為5×106 cells/mL時,更適于ADSCs的擴增與分化。

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圖４脂肪干細胞在微膠珠內(nèi)最佳包埋密度的確定Ｆｉｇ４ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅｄｄｅｎｓｉｔｙｏｆＡＤ－

ｍＬ。３．５ＡＤＳＣｓ的最佳包埋密度測定選�。唇M不同密度的ＡＤＳＣｓ包埋，培養(yǎng)１０ｄ后，分別加入適量檸檬酸鈉溶液以收獲細胞，結(jié)果如圖４所示。圖４脂肪干細胞在微膠珠內(nèi)最佳包埋密度的確定Ｆｉｇ４ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅｄｄｅｎｓｉｔｙｏｆＡＤ－ＳＣｓｉｎｍ....

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