目的通過(guò)體外模擬生物可降解鎂基金屬植入材料促進(jìn)骨修復(fù)的過(guò)程,檢測(cè)鎂離子對(duì)于成骨細(xì)胞成骨、遷移、抗堿性應(yīng)激的作用,并通過(guò)基因沉默瞬態(tài)感受器陽(yáng)離子電壓通道7(Transient receptor potential cation channel member 7,TRPM7)的表達(dá),探索TRPM7介導(dǎo)在鎂離子促進(jìn)骨修復(fù)過(guò)程中的作用。方法設(shè)立梯度濃度鎂離子(0.8、2、5、10、20、40mM)處理hFOB1.19成骨細(xì)胞系,分別進(jìn)行茜素紅染色、堿性磷酸酶染色以及Transwell實(shí)驗(yàn),確定鎂離子對(duì)成骨以及遷移作用的影響。運(yùn)用siRNA技術(shù)干擾成骨細(xì)胞TRPM7基因表達(dá),而后在上述鎂離子梯度濃度中再次進(jìn)行茜素紅染色、堿性磷酸酶染色以及Transwell實(shí)驗(yàn),確定TRPM7基因?qū)︽V離子誘導(dǎo)的成骨以及遷移作用的影響。設(shè)立5mM鎂離子處理伴有或不伴有TRPM7基因沉默組,利用PCR方法檢測(cè)各組中基因的表達(dá)量變化,包括核心結(jié)合因子(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、堿性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)、骨形成蛋白(Bone...

【文章頁(yè)數(shù)】：45 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖3.4鎂離子通過(guò)TRPM7上調(diào)了成骨基因以及遷移相關(guān)基因的表達(dá)水平Fig.3.4Magnesiumionsup-regulateup-regulatedtheexpressionoftheosteogenesisandmigration

子通過(guò)TRPM7上調(diào)了遷移以及成骨相關(guān)基因的表達(dá)水平三組實(shí)驗(yàn)證實(shí)，當(dāng)鎂離子濃度在2~10mM時(shí)，遷移以及成骨能力均比0著增加，證明該范圍是促進(jìn)成骨細(xì)胞遷移與成骨的有效濃度。因而我們選5mM進(jìn)一步研究鎂離子刺激成骨細(xì)胞的分子機(jī)制。通過(guò)RT-qPCR，我們移相關(guān)基因....

本文編號(hào)：3944961