免疫反應大小是決定可植入生物材料能否開展臨床應用的關鍵因素之一。研究評估了輻照和環(huán)氧乙烷(EO)兩種滅菌方式處理后的小腸黏膜下層(SIS)脫細胞外基質材料在體內的免疫反應,旨在為其臨床試驗的開展提供可行依據。將兩種滅菌方式處理的SIS脫細胞外基質材料皮下植入到BALB/c小鼠,第14和28天取樣后,系統(tǒng)性地評估了其免疫反應。與僅手術不植入材料的陰性對照組相比,免疫器官(脾和淋巴結)的形態(tài)、質量、細胞數、淋巴細胞的體外增殖及酶聯(lián)免疫吸附檢測結果均無顯著性差異,證明兩種滅菌方式處理后的SIS脫細胞外基質材料都不會對小鼠引起明顯的免疫排斥反應。流式細胞術分析及局部H&E染色結果表明,經EO滅菌處理的SIS脫細胞外基質材料對小鼠的免疫刺激更小,是更適用于此材料的滅菌方法。研究結果為SIS脫細胞外基質材料的滅菌程序及其臨床應用提供了支持。

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【部分圖文】：

圖1不同取樣點代表性脾和淋巴結形態(tài)

T細胞和B細胞分別約占正常脾淋巴細胞的40%和60%,CD4+T細胞與CD8+T細胞的比值約為2∶1。因此,通過分析脾淋巴細胞的表型變化(CD4/CD8),也能在一定程度上反映機體的免疫功能狀態(tài)。本實驗分析了脾淋巴細胞的表型,每組實驗至少重復3次,規(guī)律類似,各組脾淋巴細胞中CD4....

圖2不同取樣點的免疫器官質量及其細胞數(*p<0.05,**p<0.01)

圖1不同取樣點代表性脾和淋巴結形態(tài)圖3不同取樣點的脾淋巴細胞的流式細胞圖

圖3不同取樣點的脾淋巴細胞的流式細胞圖

圖2不同取樣點的免疫器官質量及其細胞數(*p<0.05,**p<0.01)2.3淋巴細胞增殖

圖4淋巴細胞體外增殖情況(*p<0.05)

CCK-8是基于WST-8法檢測細胞的活性和增殖。在電子耦合試劑存在的情況下,WST-8可以被線粒體內的脫氫酶還原生成水溶性的橙黃色甲臜產物,其顏色的深淺與活細胞的數量成正比,通過測定吸光度,可以間接檢測出活細胞的數量,繼而反映細胞的活化情況。淋巴細胞的增殖情況如圖4所示。在手術....

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