背景:脫細胞羊膜支架是一種天然支架,具有良好的生物相容性,已經(jīng)廣泛應用于組織工程的相關領域。Scleraxis能夠促進人羊膜間充質(zhì)干細胞向人韌帶細胞分化,進而促進腱-骨愈合。目的:探討脫細胞羊膜支架復合Scleraxis慢病毒轉(zhuǎn)染的人羊膜間充質(zhì)干細胞能否促進兔腱-骨愈合。方法:①體外分離培養(yǎng)人羊膜間充質(zhì)干細胞,經(jīng)過傳代培養(yǎng)后觀察細胞的形態(tài);②體外構建Scleraxis慢病毒然后以最適感染復數(shù)轉(zhuǎn)染第3代人羊膜間充質(zhì)干細胞,q-PCR檢測其轉(zhuǎn)染效率;③用酶消化法制備脫細胞羊膜支架,然后體外將轉(zhuǎn)染Scleraxis慢病毒的人羊膜間充質(zhì)干細胞接種到脫細胞羊膜支架上面,鬼筆環(huán)肽染色觀察細胞在支架上的生長情況;④將脫細胞羊膜支架復合轉(zhuǎn)染Scleraxis慢病毒的人羊膜間充質(zhì)干細胞包裹新西蘭大白兔跟腱,然后移植到骨隧道內(nèi),觀察其對腱-骨愈合的影響。結(jié)果與結(jié)論:①第3代人羊膜間充質(zhì)干細胞呈貼壁生長,細胞生長狀態(tài)良好;②Scleraxis慢病毒轉(zhuǎn)染后96 h表達穩(wěn)定的綠色熒光,Slclerxis的m RNA表達水平明顯提高,說明轉(zhuǎn)染成功;③脫細胞羊膜支架的上皮細胞基本消失,證明脫細胞比較徹底,同時其基底...

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圖1脫細胞羊膜支架的制備過程

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圖2倒置相差顯微鏡下觀察人羊膜間充質(zhì)干細胞的形態(tài)(×40)

圖1脫細胞羊膜支架的制備過程圖4實時熒光定量PCR檢測Scleraxis的mRNA表達水平

圖4實時熒光定量PCR檢測Scleraxis的mRNA表達水平

圖2倒置相差顯微鏡下觀察人羊膜間充質(zhì)干細胞的形態(tài)(×40)圖3Scleraxis慢病毒感染人羊膜間充質(zhì)干細胞

圖3Scleraxis慢病毒感染人羊膜間充質(zhì)干細胞

圖4實時熒光定量PCR檢測Scleraxis的mRNA表達水平圖5脫細胞羊膜支架的性能

本文編號：3925193