目的構(gòu)建臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源的外泌體-溫敏水凝膠,觀察其溫敏性和侵入性。方法取臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞株Saliai-HMSC(UC)-N,采用沉淀法提取外泌體,PBS重懸后獲得臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源的外泌體重懸液。取Pluronic F-127粉末,避光條件下按20%、22%、24%、26%、28%的濃度梯度分別加入臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源的外泌體重懸液,吹打、靜置后,即得到20%、22%、24%、26%、28%濃度的外泌體-溫敏水凝膠溶液。將不同濃度的外泌體-溫敏水凝膠溶液加入恒溫水浴鍋,測(cè)定初始凝膠化溫度、37℃初始凝膠時(shí)間。使用PKH67對(duì)外泌體進(jìn)行標(biāo)記,配置PKH67標(biāo)記的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源的外泌體重懸液和PKH67標(biāo)記的24%濃度的外泌體-溫敏水凝膠溶液。取臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞分成外泌體組、外泌體-溫敏水凝膠組。外泌體組加入PKH67標(biāo)記的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源的外泌體重懸液,外泌體-溫敏水凝膠組加入PKH67標(biāo)記的24%濃度的外泌體-溫敏水凝膠溶液。兩組細(xì)胞避光孵育12 h后,滴加稀釋的DAPI細(xì)胞核染色液,避光孵育30 min,置于熒光倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞內(nèi)綠色熒光(綠色熒光為PKH67標(biāo)...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細(xì)胞、試劑
    1.2 臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源的外泌體的提取
    1.3 外泌體-溫敏水凝膠的構(gòu)建
    1.4 不同濃度外泌體-溫敏水凝膠溶液的溫敏性測(cè)定
    1.5 24%濃度外泌體-溫敏水凝膠溶液的侵入性測(cè)定
    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 不同濃度外泌體-溫敏水凝膠溶液的溫敏性測(cè)定結(jié)果比較
    2.2 24%濃度外泌體-溫敏水凝膠溶液的侵入性測(cè)定結(jié)果比較
3 討論



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