本文關(guān)鍵詞：導(dǎo)電纖維支架調(diào)控心肌細(xì)胞和肝細(xì)胞的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：電紡纖維支架能夠很好地模擬細(xì)胞胞外基質(zhì)(ECM)的天然空間結(jié)構(gòu),非常適合細(xì)胞的支撐生長(zhǎng),利于形成類組織體,但常規(guī)聚合物纖維支架缺乏導(dǎo)電性,難于滿足培養(yǎng)神經(jīng)細(xì)胞和心肌細(xì)胞等的要求。因此,本論文將多壁碳納米管(CNT)摻雜到高分子聚合物中,并使用高速轉(zhuǎn)動(dòng)接收器制備了不同形貌和電導(dǎo)率的定向纖維支架。聚乙二醇-聚乳酸(PELA)和CNT以不同比例混合,制備了不同電導(dǎo)率的混紡和同軸紡纖維支架,并用于心肌細(xì)胞的研究；聚苯乙烯馬來(lái)酸酐(PMSA)和CNT以不同比例混紡得到導(dǎo)電纖維支架,經(jīng)半乳糖修飾后,用于肝細(xì)胞的研究。心肌細(xì)胞在混紡和同軸紡PELA/CNT導(dǎo)電纖維支架上生長(zhǎng)良好,細(xì)胞狹長(zhǎng)鋪張,與纖維支架取向一致,形成定向的心肌膜片。結(jié)果表明,從心肌細(xì)胞的活力、遷移和蛋白表達(dá)等方面比較,同軸紡纖維支架的綜合性能優(yōu)于混紡導(dǎo)電支架。培養(yǎng)5天后心肌細(xì)胞鋪展生長(zhǎng),但沒(méi)有形成大片區(qū),且跳動(dòng)頻率不同步,其中CNT含量為4-5%纖維支架上的心肌細(xì)胞優(yōu)于其他組,細(xì)胞鋪展、蛋白表達(dá)較為突出。培養(yǎng)10天后心肌細(xì)胞鋪展成片,細(xì)胞更為狹長(zhǎng),跳動(dòng)頻率一致,尤其是在CNT含量為4%的同軸紡支架上,心肌細(xì)胞鋪滿整個(gè)支架,且長(zhǎng)寬比值達(dá)到為6.5,同步跳動(dòng)頻率達(dá)到80次/min,體現(xiàn)出心肌細(xì)胞和導(dǎo)電纖維支架的電機(jī)械耦合良好,適于心肌膜片的研究。肝細(xì)胞在PSMA/CNT導(dǎo)電纖維支架上粘附聚集成球,3天后在支架上恢復(fù)細(xì)胞極性,開(kāi)始部分肝細(xì)胞功能,如白蛋白分泌和尿素合成；培養(yǎng)7天和15天后,與其他支架相比,在CNT含量為3%的支架上肝細(xì)胞成球良好,約為100 μm,保持肝功能良好且持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)。進(jìn)一步研究了對(duì)甲苯磺丁脲、S-華法林、咪達(dá)唑侖、睪酮、對(duì)乙酰氨基酚等藥物在此肝細(xì)胞培養(yǎng)體系上的代謝清除率,結(jié)果表明與體內(nèi)代謝具有一定的相關(guān)性,尤其CNT含量為3%的支架上培養(yǎng)的肝細(xì)胞,其體內(nèi)-體外相關(guān)系數(shù)為0.663；同時(shí)在利福平、谷胱甘肽、酮康唑、丙磺舒等酶誘導(dǎo)劑或抑制劑作用下,研究CYP 3A4和1I相酶的酶活性、睪酮和對(duì)乙酰氨基酚的代謝清除率,結(jié)果表明該肝細(xì)胞模型能夠較好地酶活力和藥物代謝清除率的誘導(dǎo)／抑制響應(yīng)性,體現(xiàn)出該肝細(xì)胞培養(yǎng)模型有望用于體外藥物篩選模型的研究。
【關(guān)鍵詞】：心肌細(xì)胞 肝細(xì)胞 組織工程 導(dǎo)電纖維支架 電導(dǎo)率 肝細(xì)胞功能 藥物代謝 代謝清除率 藥物相互作用
【學(xué)位授予單位】：西南交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R318.08
【目錄】：

• 摘要7-8
• Abstract8-13
• 第一章 緒論13-25
• 1.1 組織工程支架13-16
• 1.1.1 組織工程概況13-14
• 1.1.2 組織工程支架的研究現(xiàn)狀14
• 1.1.3 導(dǎo)電組織工程支架的研究現(xiàn)狀14
• 1.1.4 電紡纖維作為組織工程支架的研究現(xiàn)狀14-15
• 1.1.5 導(dǎo)電纖維支架的研究現(xiàn)狀15-16
• 1.2 心肌組織的體外構(gòu)建16-18
• 1.2.1 心肌組織、細(xì)胞的特點(diǎn)、功能17-18
• 1.2.2 心肌組織體外構(gòu)建的研究現(xiàn)狀18
• 1.3 肝組織的體外構(gòu)建18-23
• 1.3.1 肝組織、細(xì)胞的特點(diǎn)、功能18-19
• 1.3.2 肝組織體外構(gòu)建的研究現(xiàn)狀19-21
• 1.3.3 藥物篩選模型的研究現(xiàn)狀21-22
• 1.3.4 體外構(gòu)建組織用于藥物篩選的研究現(xiàn)狀22-23
• 1.4 本課題的研究意義與內(nèi)容23-25
• 1.4.1 研究意義和內(nèi)容23-24
• 1.4.2 創(chuàng)新點(diǎn)24-25
• 第二章 聚合物導(dǎo)電纖維調(diào)控心肌細(xì)胞行為的研究25-43
• 2.1 試驗(yàn)部分25-29
• 2.1.1 試驗(yàn)材料25-26
• 2.1.2 導(dǎo)電定向纖維的制備26
• 2.1.3 纖維的形貌和結(jié)構(gòu)26
• 2.1.4 纖維的力學(xué)和導(dǎo)電性能26-27
• 2.1.5 細(xì)胞的提取及纖維上的培養(yǎng)27
• 2.1.6 纖維上心肌細(xì)胞的形貌27
• 2.1.7 纖維上心肌細(xì)胞的活性27-28
• 2.1.8 纖維上心肌細(xì)胞的蛋白分泌28-29
• 2.1.9 纖維上心肌細(xì)胞的波動(dòng)29
• 2.1.10 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)處理29
• 2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論29-40
• 2.2.1 電紡纖維支架的形貌表征29-31
• 2.2.2 電紡纖維支架的力學(xué)性能31-32
• 2.2.3 電紡纖維支架的導(dǎo)電性能32-33
• 2.2.4 電紡纖維支架的細(xì)胞活力33
• 2.2.5 電紡纖維支架上心肌細(xì)胞的形貌33-35
• 2.2.6 各種纖維膜上的細(xì)胞的蛋白分泌35-39
• 2.2.7 電紡纖維支架的細(xì)胞的跳動(dòng)頻率39-40
• 2.3 討論40-42
• 2.4 本章小結(jié)42-43
• 第三章 導(dǎo)電纖維支架對(duì)肝細(xì)胞的研究43-55
• 3.1 試驗(yàn)部分43-47
• 3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料43
• 3.1.2 導(dǎo)電電紡纖維支架的制備43-44
• 3.1.3 導(dǎo)電電紡纖維支架的改性44
• 3.1.4 纖維的形貌和結(jié)構(gòu)44
• 3.1.5 纖維的力學(xué)和導(dǎo)電性能44
• 3.1.6 肝細(xì)胞的提取及纖維上的培養(yǎng)44-45
• 3.1.7 導(dǎo)電纖維支架上肝細(xì)胞的形貌45
• 3.1.8 纖維上肝細(xì)胞的活性45
• 3.1.9 導(dǎo)電纖維支架上肝細(xì)胞的熒光染色和膽管形態(tài)45-46
• 3.1.10 導(dǎo)電纖維支架上肝細(xì)胞的功能46-47
• 3.1.11 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)處理47
• 3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果47-52
• 3.2.1 導(dǎo)電電紡纖維支架的形貌47-48
• 3.2.2 導(dǎo)電纖維支架的力學(xué)性能和導(dǎo)電性能48-49
• 3.2.3 導(dǎo)電纖維支架上肝細(xì)胞的活力49-50
• 3.2.4 導(dǎo)電纖維支架上肝細(xì)胞的形貌50-51
• 3.2.5 導(dǎo)電纖維支架上肝細(xì)胞的功能51-52
• 3.3 結(jié)果討論52-53
• 3.4 本章小結(jié)53-55
• 第四章 體外培養(yǎng)肝細(xì)胞用于藥物代謝的研究55-63
• 4.1 實(shí)驗(yàn)部分55-57
• 4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料55
• 4.1.2 肝細(xì)胞代謝實(shí)驗(yàn)55-56
• 4.1.3 藥物代謝的誘導(dǎo)和抑制實(shí)驗(yàn)56-57
• 4.1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法57
• 4.2 結(jié)果分析57-60
• 4.2.1 藥物代謝清除率57-58
• 4.2.2 與體內(nèi)相關(guān)性評(píng)價(jià)分析58
• 4.2.3 肝細(xì)胞代謝酶的誘導(dǎo)和抑制效果58-59
• 4.2.4 肝細(xì)胞藥物代謝的誘導(dǎo)和抑制效果59-60
• 4.3 結(jié)果討論60-62
• 4.4 本章小結(jié)62-63
• 全文結(jié)論63-65
• 致謝65-66
• 參考文獻(xiàn)66-73
• 攻讀碩士期間發(fā)表論文73-74
• 論文成果申明74

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 丁義濤,陳鐘,張鶴云;肝細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)的一種簡(jiǎn)便方法[J];江蘇醫(yī)藥;2001年07期

2 閔峰;郝飛;劉冰;劉國(guó)棟;黃紀(jì)明;蔣天倫;;樹(shù)，

本文編號(hào)：390639