半月板撕裂是一種最常見的膝關(guān)節(jié)損傷。雖然外科手術(shù)方法可以縫合修復(fù)撕裂的半月板,但其僅在外周的血管區(qū)域有效并且通常有30%幾率發(fā)生再撕裂。部分或全部半月板切除術(shù)短時(shí)間內(nèi)能減緩關(guān)節(jié)疼痛和改善功能,但會(huì)增加關(guān)節(jié)軟骨的壓力,導(dǎo)致軟骨退變、骨關(guān)節(jié)炎和膝關(guān)節(jié)不穩(wěn)定。半月板組織工程旨在再生受損組織,為修復(fù)半月板損傷提供了可行的解決方案。其中,支架是組織工程的一大要素。半月板脫細(xì)胞基質(zhì)保留了生物化學(xué)組成、生物活性和三維結(jié)構(gòu),具有與天然半月板相當(dāng)?shù)纳锪W(xué)性質(zhì),且免疫原性低、有再生潛力,是構(gòu)建組織工程半月板的一種理想支架�？墒前朐掳鍍�(nèi)緊密排列的膠原纖維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)使其基質(zhì)密度過高,顯示出較低的孔隙率,限制了損傷處細(xì)胞的增殖、遷移和基質(zhì)重塑。無論是外源接種的種子細(xì)胞還是關(guān)節(jié)腔內(nèi)鄰近的滑膜細(xì)胞都無法滲入支架內(nèi)部,進(jìn)而再分布合成必要的細(xì)胞外基質(zhì),長(zhǎng)期來看不具有重塑和維持組織穩(wěn)態(tài)的能力。因此,本試驗(yàn)首先對(duì)天然半月板以垂直于下表面方向穿透全層進(jìn)行均勻打孔,然后通過反復(fù)凍融、SDS洗滌和超聲波清洗等步驟進(jìn)行脫細(xì)胞處理以制備基質(zhì)支架,通過DNA定量試驗(yàn)和組織學(xué)染色確認(rèn)脫細(xì)胞效果,并檢測(cè)打孔對(duì)脫細(xì)胞處理時(shí)間的影響以及打孔后...

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 半月板概述
        1.1.1 半月板的解剖結(jié)構(gòu)
        1.1.2 半月板的生物化學(xué)
        1.1.3 半月板的血液供給
        1.1.4 半月板的生物力學(xué)功能
    1.2 半月板的損傷與修復(fù)
        1.2.1 損傷原因與分類
        1.2.2 半月板切除術(shù)
        1.2.3 半月板同種異體移植
    1.3 脫細(xì)胞基質(zhì)支架在半月板組織工程中的應(yīng)用
        1.3.1 半月板脫細(xì)胞基質(zhì)支架的制備
        1.3.2 脫細(xì)胞基質(zhì)支架的生物力學(xué)性能
        1.3.3 脫細(xì)胞基質(zhì)支架的細(xì)胞浸潤(rùn)
    1.4 BMSCs在半月板組織工程中的應(yīng)用
第二章 打孔增加半月板基質(zhì)支架孔隙率的可行性研究
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 主要試劑
        2.1.2 主要儀器
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 半月板的采集與打孔處理
        2.2.2 半月板脫細(xì)胞處理及支架DNA含量檢測(cè)
        2.2.3 打孔支架的組織學(xué)觀察
        2.2.4 打孔支架的孔隙率與力學(xué)性能測(cè)定
        2.2.5 打孔支架微觀結(jié)構(gòu)及BMSCs附著的掃描電鏡觀察
        2.2.6 打孔支架上BMSCs的增殖檢測(cè)
        2.2.7 打孔支架上BMSCs的軟骨向分化檢測(cè)
        2.2.8 統(tǒng)計(jì)方法
    2.3 試驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 支架的DNA定量檢測(cè)結(jié)果
        2.3.2 支架的組織學(xué)觀察結(jié)果
        2.3.3 支架的孔隙率與力學(xué)性能檢測(cè)結(jié)果
        2.3.4 支架微觀結(jié)構(gòu)與BMSCs附著掃描電鏡觀察結(jié)果
        2.3.5 支架上BMSCs的增殖結(jié)果
        2.3.6 支架上BMSCs的軟骨分化檢測(cè)結(jié)果
    2.4 討論
        2.4.1 半月板基質(zhì)支架的孔隙率
        2.4.2 半月板基質(zhì)支架的力學(xué)性能
第三章 打孔支架復(fù)合BMSCs構(gòu)建組織工程半月板的體內(nèi)移植效果研究
    3.1 試驗(yàn)材料
        3.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
        3.1.2 主要試劑與儀器
    3.2 試驗(yàn)方法
        3.2.1 體外構(gòu)建組織工程化半月板
        3.2.2 試驗(yàn)動(dòng)物分組
        3.2.3 建立半月板缺損模型進(jìn)行組織工程化半月板移植
        3.2.4 試驗(yàn)犬術(shù)后臨床觀察
        3.2.5 試驗(yàn)犬膝關(guān)節(jié)解剖觀察
        3.2.6 半月板移植物的組織學(xué)與免疫組織化學(xué)觀察
        3.2.7 股骨髁和脛骨平臺(tái)的組織學(xué)觀察
        3.2.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
    3.3 試驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 臨床觀察和Lysholm評(píng)分結(jié)果
        3.3.2 解剖觀察結(jié)果
        3.3.3 半月板移植物的組織學(xué)染色結(jié)果
        3.3.4 半月板移植物的免疫組織化學(xué)染色結(jié)果
        3.3.5 股骨髁與脛骨平臺(tái)的組織學(xué)染色結(jié)果
    3.4 討論
        3.4.1 半月板移植手術(shù)
        3.4.2 打孔半月板移植物在體內(nèi)的修復(fù)
        3.4.3 半月板移植物對(duì)軟骨的保護(hù)
第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3876955