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PLA/HA復(fù)合物的化學(xué)及微結(jié)構(gòu)表面特性對(duì)人MSCs增殖及骨向分化的獨(dú)立影響

發(fā)布時(shí)間:2023-09-29 01:53
  目的:因創(chuàng)傷、疾病導(dǎo)致的器官或組織缺損的修復(fù)一直是臨床亟待解決的難題。近年來(lái)的研究主要致力于發(fā)展能夠代替自體骨移植物的人工合成材料以修復(fù)這些缺損的器官或組織。由于與骨的無(wú)機(jī)成分相似,很長(zhǎng)一段時(shí)間以來(lái),磷酸鈣(calcium phosphate, CaP)陶瓷一直是被廣泛應(yīng)用的人工合成的骨替代材料,但其機(jī)械強(qiáng)度及骨再生能力仍無(wú)法與自然再生骨相比。在保留其人工合成的特性下,很多措施被應(yīng)用于改善CaP陶瓷的生物活性,常用的如改變材料的化學(xué)組成、控制材料的表面形貌等。但CaP陶瓷是相對(duì)復(fù)雜的生物材料,其理化性能交織纏繞在一起,這使得在不改變陶瓷的其它特性的前提下單獨(dú)改變其某一特性變得非常困難。造成的結(jié)果是,很難將某一類型的生物反應(yīng)與材料的某一個(gè)或某幾個(gè)特性關(guān)聯(lián)在一起,而這對(duì)于設(shè)計(jì)與自體骨移植物功能相當(dāng)?shù)男滦凸且浦蔡娲飦?lái)說(shuō)是至關(guān)重要的。為了改善目前存在的人工合成的骨移植替代物,有必要深入理解其某一性能對(duì)生物反應(yīng)的影響,進(jìn)而尋找出恰當(dāng)?shù)姆椒▽⑽覀兤谕男阅芎喜⒃谝黄鹨垣@得新的、改良的功能性生物材料。為此,我們研制出了具有可控的微米級(jí)表面形貌的聚乳酸/納米羥基磷灰石復(fù)合物(poly (lactic...

【文章頁(yè)數(shù)】:102 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
前言
第一部分 PLA/HA復(fù)合物的制備及表面微形貌化
    1. 材料與方法
        1.1. 實(shí)驗(yàn)儀器和實(shí)驗(yàn)材料
            1.1.1. 主要實(shí)驗(yàn)儀器
            1.1.2. 主要實(shí)驗(yàn)材料
        1.2. PLA/HA復(fù)合物的制備
            1.2.1. HA粉的合成
            1.2.2. 制備PLA/HA復(fù)合物
        1.3. PLA/HA復(fù)合物及PLA的表面微形貌化
            1.3.1. 制取聚二甲硅氧烷(Inverse polydimethyl siloxane,PDMS)陰模
            1.3.2. 材料表面微形貌化
    2. 結(jié)果
        2.1. 材料特征
        2.2. PLA/HA復(fù)合物及PLA表面微形貌的特征
    3. 討論
第二部分 不同表面形貌的PLA/HA復(fù)合物及PLA對(duì)hMSCs形態(tài)、增殖、骨向分化和骨相關(guān)基因表達(dá)的影響
    1. 材料與方法
        1.1. 實(shí)驗(yàn)儀器和實(shí)驗(yàn)試劑
            1.1.1. 主要實(shí)驗(yàn)儀器與軟件
            1.1.2. 主要實(shí)驗(yàn)試劑
            1.1.3. 主要培養(yǎng)液和試劑的配制
        1.2. hMSCs的分離和擴(kuò)增
        1.3. hMSCs在不同表面微形貌的PLA/HA復(fù)合物及PLA上的培養(yǎng)…
        1.4. 細(xì)胞形態(tài)的觀察分析
            1.4.1. 熒光顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)(DAPI/Phalloidin染色)
            1.4.2. SEM觀察細(xì)胞形態(tài)
        1.5. 細(xì)胞增殖與骨向分化
            1.5.1. DNA測(cè)定
            1.5.2. 堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)測(cè)定
        1.6. 骨相關(guān)基因表達(dá)的檢測(cè)
            1.6.1. 總RNA的提取
            1.6.2. 逆轉(zhuǎn)錄
            1.6.3. 實(shí)施定量PCR(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)
        1.7. 培養(yǎng)基中Ca2+and Pi濃度的測(cè)定
            1.7.1. Ca2+測(cè)定
            1.7.2. Pi測(cè)定
        1.8. 材料表面形貌的SEM觀察
        1.9. 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    2. 結(jié)果
        2.1. 細(xì)胞粘附與細(xì)胞形態(tài)
        2.2. hMSCs在形貌化的PLA/HA復(fù)合物及PLA上的增殖
        2.3. hMSCs在形貌化的PLA/HA復(fù)合物及PLA上的骨向分化
        2.4. hMSCs培養(yǎng)過(guò)程中Ca2+、Pi濃度的變化
        2.5. 材料表面形貌的變化
    3. 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
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本文編號(hào):3849051

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