目的探討應(yīng)用軟骨細胞外基質(zhì)/絲素仿生支架構(gòu)建組織工程軟骨的可行性。方法1.軟骨細胞外基質(zhì)(ECM)的制備:取山羊新鮮的透明軟骨,應(yīng)用勻漿-脫細胞-冷凍研磨-篩選方法制作軟骨細胞外基質(zhì)粉末。2.軟骨細胞外基質(zhì)/絲素(ECM/SF)的制作:使用冷凍干燥法制作四組支架,并采用京尼平乙醇溶液進行化學交聯(lián)處理。(1)1:1 ECM/SF支架:由細胞外基質(zhì)懸液和絲素溶液1:1混合制作而成。(2)2:1 ECM/SF支架:由細胞外基質(zhì)懸液和絲素溶液2:1混合制作而成。(3)4:1 ECM/SF支架:由細胞外基質(zhì)懸液和絲素溶液4:1混合制作而成。(4)ECM支架:單純由細胞外基質(zhì)懸液制作而成。3.對該支架行壓縮模量測定,傅立葉紅外變換光譜分析其蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu),掃描電鏡(SEM)檢測其微觀結(jié)構(gòu),初步計算其孔徑和孔隙率。對該支架進行CCK-8細胞毒性實驗,活細胞死細胞染色并用熒光顯微鏡觀察判定支架的細胞毒性。4.骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs)的分離與培養(yǎng):BMSCs傳代至2-3代備用。5.生化含量測定等實驗評估骨髓間充質(zhì)干細胞成軟骨分化以及基質(zhì)分泌的能力。6.實時熒光定量PCR測定評估骨髓間充質(zhì)干細胞成軟...

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
文獻綜述
    參考文獻
附錄一 ：攻讀碩士研究生期間發(fā)表文章情況
附錄二 ：縮略詞
致謝



本文編號：3838015