目的利用電子束熔融成型技術(shù)(EBM)3D打印鈦合金多孔支架材料,檢測(cè)其對(duì)成骨細(xì)胞(OB)的生物安全性。方法打印3種拓?fù)鋯卧Y(jié)構(gòu)的多孔鈦合金材料(2.0、2.25及2.5 mm的Dode-Medium單元結(jié)構(gòu)),制備各組材料在多個(gè)時(shí)間點(diǎn)的浸提液(浸泡時(shí)間設(shè)24、48、72、96 h),并將浸提液用于成骨細(xì)胞系MC3T3-E1的體外培養(yǎng)。通過(guò)MTT實(shí)驗(yàn),計(jì)算成骨細(xì)胞的相對(duì)增殖率(RGR);通過(guò)蘇木精-伊紅(HE)染色,形態(tài)學(xué)觀察成骨細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài);通過(guò)堿性磷酸酶(ALP)測(cè)定,分析成骨細(xì)胞的分化活性;通過(guò)免疫熒光染色,觀察成骨細(xì)胞中I型膠原(ColⅠ)的表達(dá)水平。結(jié)果在各組材料浸提液孵育下,成骨細(xì)胞貼壁牢固、增殖活躍,生長(zhǎng)狀態(tài)良好。與DMEM孵育的陰性對(duì)照組比較,各材料浸提液組成骨細(xì)胞的相對(duì)增殖率無(wú)顯著性差異;與DMSO孵育的陽(yáng)性對(duì)照組比較,各材料浸提液組成骨細(xì)胞的相對(duì)增殖率顯著升高(P<0.01);各組材料浸提液的細(xì)胞毒性程度評(píng)估均≤1。與DMEM孵育的陰性對(duì)照組比較,各材料浸提液組成骨細(xì)胞的ALP活性與ColⅠ含量均無(wú)顯著性差異;與DMSO孵育的陽(yáng)性對(duì)照組比較,各材料浸提液組成骨...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞系傳代培養(yǎng):
        1.2.2 制備材料浸提液:
        1.2.3 細(xì)胞增殖活力測(cè)定:
        1.2.4 細(xì)胞形態(tài)學(xué)HE染色:
        1.2.5 細(xì)胞堿性磷酸酶ALP活性測(cè)定:
        1.2.6 細(xì)胞免疫熒光染色:
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 細(xì)胞增殖活力及材料毒性評(píng)價(jià)
    2.2 細(xì)胞HE染色結(jié)果
    2.3 細(xì)胞ALP活性檢測(cè)結(jié)果
    2.4 細(xì)胞Col Ⅰ熒光染色結(jié)果
3 討論



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