本文關鍵詞：力學環(huán)境中LFA-1的激活及IL-8介導的細胞粘附作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：白細胞向受損或炎癥部位遷移的過程，是人體自身免疫系統(tǒng)非常重要的生理過程。在這一過程中，粘附受體家族，特別是整合素家族與其配體的作用，可以讓白細胞穩(wěn)定粘附到內皮細胞上，進而遷移到炎癥部位，發(fā)揮白細胞的免疫功能。 金屬離子誘導的白細胞膜上整合素LFA-1（Lymphocyte function-associated antigen-1）的激活，是白細胞免疫應答的關鍵事件，被激活到中間親和態(tài)的LFA-1，只有和表達在內皮細胞上的配體ICAM-1(Intercellular adhesion molecule-1)結合，才能感受血流剪應力傳遞的力學刺激，開啟隨后發(fā)生的經由outside-in信號通路的完全激活過程。本研究利用流動腔實驗，通過理論模型與實驗觀測數據相結合，，研究剪應力環(huán)境中，當鎂離子誘導LFA-1到中間親和態(tài)后，LFA-1/ICAM-1相互作用的二維反應動力學行為。 實驗結果揭示出外力條件下，復合物確實存在從中間親和態(tài)向高親和態(tài)轉變的過程，并且兩種親和力狀態(tài)都表現出：在wall shear stress0.025dyn/cm2-0.045dyn/cm2（ss0.025dyn/cm2-0.045dyn/cm2）范圍內，隨著壁面剪切力的增大，復合物的解離速度逐漸變大；而當力在ss0.045dyn/cm2-ss0.06dyn/cm2的區(qū)間時，力的增大阻礙了復合物的解離，解離速率變慢；當力處于ss0.06dyn/cm2-ss0.1dyn/cm2時，解離速率隨力的增大而增大。解離速率在力的調控下是一個雙態(tài)變化過程。通過動力學模型的建立，我們得到了中間親和態(tài)向高親和態(tài)的轉換效率，它隨力的增加，先維持在0.3左右(ss0.025dyn/cm2-ss0.05dyn/cm2)，當力達到ss0.06dyn/cm2后可提升至1.6左右，力對親和態(tài)的轉換確有非常重要的作用。趨化因子IL-8與其受體的作用，亦如整合素LFA-1/ICAM-1一樣，受到力的調控。 通過測定的這些動力學參數，可以讓我們更好的了解分子對間的力學調控機制，深化對白細胞在炎癥免疫應答、血栓形成等生理病理過程中負責機制的理解，旨在為相關創(chuàng)新藥物的設計，相應疾病的新干預療法提供有用的信息和新的思路。
【關鍵詞】：LFA-1 整合素的激活 細胞黏附 中間親和態(tài) IL-8
【學位授予單位】：華南理工大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R318.01
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-10
• 第一章 緒論10-31
• 1.1 研究背景及意義10-17
• 1.1.1 白細胞的生理學意義10-11
• 1.1.2 白細胞的穩(wěn)定粘附11-12
• 1.1.3 整合素家族12-16
• 1.1.4 配體 ICAM-1 的結構16-17
• 1.2 國內外的研究現狀17-22
• 1.2.1 LFA-1 的構象研究17-18
• 1.2.2 力調控的整合素的激活研究18-20
• 1.2.3 二價金屬離子對整合素親和力的調控20-21
• 1.2.4 IL-8 激活作用的研究21-22
• 1.3 目前研究采用的主要實驗技術22-27
• 1.3.1 原子力顯微鏡（Atomic Force Microscopy）22-24
• 1.3.2 生物膜力探針（Biomembrane Fore Probe）24-26
• 1.3.3 流動腔技術（Flow Chamber）26-27
• 1.3.4 分子動力學模擬27
• 1.4 整合素激活模型的研究進展27-29
• 1.5 科學問題的提出及研究的主要內容29-31
• 1.5.1 科學問題的提出29
• 1.5.2 論文研究的主要內容29-31
• 第二章 流動腔功能化測試31-39
• 2.1 實驗材料及設備31-33
• 2.1.1 細胞31
• 2.1.2 蛋白分子及實驗試劑31
• 2.1.3 實驗儀器設備31-33
• 2.2 實驗方法33-36
• 2.2.1 細胞培養(yǎng)33-34
• 2.2.2 流動腔系統(tǒng)穩(wěn)定性測試34-35
• 2.2.3 流動腔系統(tǒng)下整合素 LFA-1 與其配體 ICAM-1 的特異性測試35-36
• 2.3 實驗結果36-38
• 2.3.1 流動腔流速測試36-37
• 2.3.2 特異性實驗37-38
• 2.4 討論38
• 2.5 本章小結38-39
• 第三章 力對整合素 LFA-1 激活的調控作用39-50
• 3.1 實驗材料39
• 3.1.1 細胞39
• 3.1.2 主要試劑39
• 3.2 實驗方法39-41
• 3.2.1 底板功能化39
• 3.2.2 細胞懸浮液的配制39
• 3.2.3 流動腔實驗方法39-40
• 3.2.4 恒力介導的整合素 LFA-1 親和態(tài)轉變模型40-41
• 3.3 結果及分析41-47
• 3.3.1 LFA-1/ICMA-1 介導的細胞拴縛受到壁面剪切力的調節(jié)41-43
• 3.3.2 LFA-1 親和態(tài)的轉變對鍵的解離及生存時間的影響及力的依賴特性43-45
• 3.3.3 LFA-1 親和態(tài)的轉變45-47
• 3.4 討論47-49
• 3.5 本章小結49-50
• 第四章 力對趨化因子 IL-8 介導的粘附作用的影響50-56
• 4.1 實驗材料50
• 4.1.1 實驗試劑50
• 4.2 實驗方法50
• 4.2.1 細胞懸浮液的配制50
• 4.2.2 底板功能化50
• 4.2.3 流動腔實驗50
• 4.3 結果及分析50-54
• 4.3.1 IL-8 的特異性實驗50-51
• 4.3.2 力調控著 IL-8 與其受體的相互作用51-54
• 4.4 討論54-55
• 4.5 本章小結55-56
• 總結與展望56-58
• 參考文獻58-63
• 攻讀碩士學位期間取得的研究成果63-64
• 致謝64-65
• 附件65

【參考文獻】

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  本文關鍵詞：力學環(huán)境中LFA-1的激活及IL-8介導的細胞粘附作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：378979