目的:探討間充質(zhì)干細胞(MSCs)聯(lián)合內(nèi)皮祖細胞(EPCs)體外促進組織工程血管化。方法:利用全骨髓貼壁法結(jié)合差時貼壁法分離、擴增小鼠骨髓來源的MSCs和EPCs,運用流式細胞技術(shù)測定MSCs和EPCs的表面標記物。取第3代MSCs和EPCs,分別按3×106個接種于無紡布聚乙醇酸支架(PGA)上后體外培養(yǎng)8周(MSCs+EPCs組按1.5×106個以1∶1的比例共同接種)。細胞-支架復合物常規(guī)切片行HE染色,顯微鏡下觀察組織形態(tài)。通過免疫組化染色評價CD31、CD34在各實驗組中的表達情況。結(jié)果:組織形態(tài)學觀察可見MSCs+EPCs組的細胞數(shù)目及組織形態(tài)較MSCs組、EPCs組多且規(guī)則,PGA代謝產(chǎn)物已基本完全降解。免疫組化結(jié)果顯示CD31、CD34在MSCs組、EPCs組、MSCs+EPCs組中的染色得分為(1.67±0.82)、(1.33±0.52),(4.83±1.33)、(5.33±1.03),(8.67±0.52)、(8.00±2.45),各組差異有統(tǒng)計學意義。結(jié)論:MSCs聯(lián)合EPCs體外可促進組織工程血管化,并且其增殖分化和促血管生成能力高于單一培養(yǎng)組。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實驗動物
    1.2 試劑和儀器
    1.3 細胞培養(yǎng)
    1.4 表面標記物測定
    1.5 支架材料處理
    1.6 細胞接種及培養(yǎng)
    1.7 組織學和免疫組織化學
    1.8 統(tǒng)計學處理
2 結(jié)果
    2.1 細胞形態(tài)學觀察
    2.2 MSCs和EPCs表面標記物測定結(jié)果
    2.3 HE組織形態(tài)學結(jié)果 (8周)
    2.4 免疫組化結(jié)果 (8周)
3 討論



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