目的:探討間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)聯(lián)合內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)體外促進(jìn)組織工程血管化。方法:利用全骨髓貼壁法結(jié)合差時(shí)貼壁法分離、擴(kuò)增小鼠骨髓來(lái)源的MSCs和EPCs,運(yùn)用流式細(xì)胞技術(shù)測(cè)定MSCs和EPCs的表面標(biāo)記物。取第3代MSCs和EPCs,分別按3×106個(gè)接種于無(wú)紡布聚乙醇酸支架(PGA)上后體外培養(yǎng)8周(MSCs+EPCs組按1.5×106個(gè)以1∶1的比例共同接種)。細(xì)胞-支架復(fù)合物常規(guī)切片行HE染色,顯微鏡下觀察組織形態(tài)。通過(guò)免疫組化染色評(píng)價(jià)CD31、CD34在各實(shí)驗(yàn)組中的表達(dá)情況。結(jié)果:組織形態(tài)學(xué)觀察可見(jiàn)MSCs+EPCs組的細(xì)胞數(shù)目及組織形態(tài)較MSCs組、EPCs組多且規(guī)則,PGA代謝產(chǎn)物已基本完全降解。免疫組化結(jié)果顯示CD31、CD34在MSCs組、EPCs組、MSCs+EPCs組中的染色得分為(1.67±0.82)、(1.33±0.52),(4.83±1.33)、(5.33±1.03),(8.67±0.52)、(8.00±2.45),各組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:MSCs聯(lián)合EPCs體外可促進(jìn)組織工程血管化,并且其增殖分化和促血管生成能力高于單一培養(yǎng)組。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    1.2 試劑和儀器
    1.3 細(xì)胞培養(yǎng)
    1.4 表面標(biāo)記物測(cè)定
    1.5 支架材料處理
    1.6 細(xì)胞接種及培養(yǎng)
    1.7 組織學(xué)和免疫組織化學(xué)
    1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察
    2.2 MSCs和EPCs表面標(biāo)記物測(cè)定結(jié)果
    2.3 HE組織形態(tài)學(xué)結(jié)果 (8周)
    2.4 免疫組化結(jié)果 (8周)
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