發(fā)布時(shí)間：2023-02-18 20:25

　　膜納米管是近年發(fā)現(xiàn)的一種廣泛存在于各類型動(dòng)物細(xì)胞間的長(zhǎng)程連接結(jié)構(gòu)。研究發(fā)現(xiàn),膜納米管可以作為細(xì)胞間通訊、信號(hào)傳導(dǎo)和病原體擴(kuò)散的通道或“橋梁”,在生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域引起了人們的極大關(guān)注。系統(tǒng)地研究膜納米管的運(yùn)輸機(jī)制對(duì)詮釋依賴于膜納米管的細(xì)胞間通訊具有非常重大的意義。禽流感病毒能夠造成流感疫情的周期性流行或偶爾的全球性大爆發(fā),對(duì)公共健康是一個(gè)潛在、巨大的威脅。研究禽流感病毒的侵染機(jī)制并結(jié)合膜納米管研究病毒的胞間傳播機(jī)制,不僅有助于解釋禽流感病毒的跨種屬侵染行為,而且對(duì)預(yù)防和控制病毒性疾病的傳播和流行有很大的幫助。這些機(jī)制的研究都迫切需要一種強(qiáng)有力的技術(shù)來(lái)對(duì)活細(xì)胞中的生物事件進(jìn)行原位、實(shí)時(shí)地長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)測(cè)。單顆粒示蹤技術(shù)能夠?qū)崟r(shí)、動(dòng)態(tài)、原位地示蹤單個(gè)顆�；騿蝹�(gè)分子的運(yùn)動(dòng)軌跡,被廣泛地應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。由于量子點(diǎn)具有熒光強(qiáng)度高、光穩(wěn)定性好等特性,因此作為熒光標(biāo)記物非常適合于長(zhǎng)時(shí)間的單顆粒示蹤。在本工作中,我們以膜納米管和禽流感病毒為研究對(duì)象,利用基于量子點(diǎn)的單顆粒示蹤技術(shù)研究了膜納米管運(yùn)輸機(jī)制及禽流感病毒侵染行為等熱點(diǎn)生物學(xué)問(wèn)題。本論文的主要研究?jī)?nèi)容如下： (1)利用基于量子點(diǎn)的單顆粒示蹤技術(shù)研究...

【文章頁(yè)數(shù)】：115 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要 Abstract 第1章 緒論
1.1 引言
1.2 單顆粒示蹤技術(shù)
    1.2.1 成像方法
    1.2.2 數(shù)據(jù)處理
    1.2.3 單顆粒示蹤技術(shù)的應(yīng)用
1.3 量子點(diǎn)的熒光性質(zhì)及其應(yīng)用
    1.3.1 量子點(diǎn)的熒光性質(zhì)
    1.3.2 量子點(diǎn)在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用
1.4 基于量子點(diǎn)的單顆粒示蹤技術(shù)及其應(yīng)用
    1.4.1 量子點(diǎn)在單顆粒示蹤領(lǐng)域的優(yōu)越性
    1.4.2 基于量子點(diǎn)的單顆粒示蹤技術(shù)在生物領(lǐng)域的應(yīng)用
1.5 本文的選題背景和研究?jī)?nèi)容
參考文獻(xiàn) 第2章 基于量子點(diǎn)的單顆粒示蹤技術(shù)研究癌細(xì)胞間膜納米管的運(yùn)輸機(jī)制
2.1 引言
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.2.1 試劑和儀器
    2.2.2 緩沖溶液的配制
    2.2.3 細(xì)胞培養(yǎng)及量子點(diǎn)標(biāo)記麥胚凝集素
    2.2.4 熒光標(biāo)記細(xì)胞的微絲、微管結(jié)構(gòu)及肌球蛋白
    2.2.5 對(duì)細(xì)胞微絲、微管結(jié)構(gòu)及ATP的藥物抑制
    2.2.6 顯微注射肌球蛋白抗體
    2.2.7 共聚焦顯微成像
    2.2.8 圖像處理及數(shù)據(jù)分析
2.3 結(jié)果與討論
    2.3.1 A549細(xì)胞膜納米管的形成及骨架組成
    2.3.2 量子點(diǎn)標(biāo)記的麥胚凝集素在膜納米管內(nèi)的運(yùn)動(dòng)行為
    2.3.3 量子點(diǎn)標(biāo)記的麥胚凝集素在膜納米管內(nèi)的相互作用
    2.3.4 量子點(diǎn)標(biāo)記的麥胚凝集素在膜納米管內(nèi)的運(yùn)動(dòng)依賴于微絲
    2.3.5 量子點(diǎn)標(biāo)記的麥胚凝集素在膜納米管內(nèi)的運(yùn)動(dòng)受肌球蛋白驅(qū)動(dòng)
2.4 結(jié)論
參考文獻(xiàn) 第3章 基于量子點(diǎn)的單顆粒示蹤技術(shù)研究與膜納米管相關(guān)的禽流感病毒侵染機(jī)制
3.1 引言
3.2 實(shí)驗(yàn)部分
    3.2.1 試劑與儀器
    3.2.2 緩沖溶液的配制及細(xì)胞培養(yǎng)
    3.2.3 禽流感H9N2病毒的擴(kuò)增
    3.2.4 禽流感H9N2病毒滴度的測(cè)定
    3.2.5 量子點(diǎn)標(biāo)記禽流感H9N2病毒的包膜
    3.2.6 熒光標(biāo)記細(xì)胞的微絲、微管結(jié)構(gòu)及病毒HA蛋白
    3.2.7 共聚焦顯微成像觀察、圖像處理及數(shù)據(jù)分析
3.3 結(jié)果與討論
    3.3.1 Vero細(xì)胞間膜納米管的形態(tài)和骨架結(jié)構(gòu)
    3.3.2 禽流感H9N2病毒對(duì)Vero細(xì)胞膜納米管的誘導(dǎo)效應(yīng)
    3.3.3 細(xì)胞膜納米管相關(guān)的病毒侵染過(guò)程
    3.3.4 病毒在細(xì)胞膜納米管內(nèi)的運(yùn)動(dòng)行為分析
3.4 結(jié)論
參考文獻(xiàn) 第4章 基于單顆粒示蹤技術(shù)研究禽流感病毒在人細(xì)胞內(nèi)的侵染機(jī)制及其依賴膜納米管的胞間運(yùn)動(dòng)行為
4.1 引言
4.2 實(shí)驗(yàn)部分
    4.2.1 試劑和儀器
    4.2.2 緩沖溶液的配制
    4.2.3 MDCK細(xì)胞和HBE細(xì)胞的培養(yǎng)
    4.2.4 H9N2禽流感病毒的擴(kuò)增、病毒滴度的測(cè)定
    4.2.5 量子點(diǎn)標(biāo)記禽流感H9N2病毒的包膜
    4.2.6 熒光標(biāo)記細(xì)胞的微絲、微管、晚期內(nèi)體及細(xì)胞核
    4.2.7 對(duì)細(xì)胞微絲、微管結(jié)構(gòu)的藥物抑制
    4.2.8 細(xì)胞上唾液酸受體的標(biāo)記
    4.2.9 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)唾液酸受體表達(dá)量
    4.2.10 共聚焦顯微成像觀察
    4.2.11 圖像處理及數(shù)據(jù)分析
4.3 結(jié)果與討論
    4.3.1 禽流感H9N2病毒在HBE細(xì)胞中群體化侵染行為
    4.3.2 單個(gè)禽流感H9N2病毒在細(xì)胞內(nèi)侵染行為
    4.3.3 唾液酸受體在兩種細(xì)胞上的表達(dá)量對(duì)比
    4.3.4 唾液酸受體SAα2,3Gal和SAα2,6Gal在細(xì)胞中的運(yùn)動(dòng)行為
    4.3.5 禽流感H9N2病毒在HBE細(xì)胞間膜納米管中的運(yùn)動(dòng)行為
4.6 結(jié)論
參考文獻(xiàn) 第5章 總結(jié)與展望
參考文獻(xiàn) 附錄：攻讀博士學(xué)位期間已發(fā)表及待發(fā)表的研究成果 致謝



本文編號(hào)：3745472