鑒于合成高分子材料通常生物學(xué)活性不足,通過其表面蛋白吸附構(gòu)建具有細胞親和性的活性蛋白界面的研究,已成為近年生物醫(yī)用高分子材料的研究熱點之一。免疫球蛋白IgG的Fc段可以通過疏水相互作用,在疏水材料表面自組裝成單分子蛋白層。我們利用基因工程技術(shù)制備了人上皮鈣黏素蛋白（hE-cadherin）的胞外域和人血管內(nèi)皮細胞生長因子（hVEGF）分別與免疫球蛋白IgG的Fc段結(jié)構(gòu)域結(jié)合為融合蛋白（hE-cad-Fc和hVEGF-Fc）。本研究初步探究了hE-cad-Fc和hVEGF-Fc作為細胞粘附因子和細胞生長因子在聚苯乙烯細胞培養(yǎng)板表面的吸附及其活性蛋白界面的形貌和生物學(xué)活性。結(jié)果表明,hE-cad-Fc和hVEGF-Fc各自的最佳使用濃度分別為5μg/mL和200ng/mL;hE-cad-Fc和hVEGF-Fc分別以高為（6.5±0.4）nm和（3.0±0.3）nm的納米棒形成單分子蛋白層;且在3種不同液性環(huán)境中（PBS,DMEM/F12和DMEM/F12+10%血清）中具有良好的穩(wěn)定性。進一步的細胞實驗結(jié)果表明,該活性蛋白界面顯著改善了聚苯乙烯培養(yǎng)板表面的親水性,同時還提高了人源間充質(zhì)干細... 

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【文章目錄】：
1 前言
2 實驗部分
    2.1 儀器和試劑
    2.2 h E-cad-Fc、h VEGF-Fc、膠原(Collagen)母液的配制
    2.3 h E-cad-Fc、h VEGF-Fc和E/VEGF-Fc的吸附行為表征
    2.4 原子力顯微鏡檢測活性蛋白界面形貌
    2.5 不同液性環(huán)境中E/VEGF-Fc的穩(wěn)定性檢測
    2.6 水接觸角檢測
    2.7 不同基質(zhì)表面h MSCs粘附特性的表征
    2.8 數(shù)據(jù)分析
3 結(jié)果與討論
    3.1 PS培養(yǎng)板表面h E-cad-Fc和h VEGF-Fc的吸附
    3.2 PS培養(yǎng)板表面E/VEGF-Fc活性蛋白界面的形貌
    3.3 PS培養(yǎng)板表面E/VEGF-Fc活性蛋白界面的穩(wěn)定性
    3.4 E/VEGF-Fc修飾后PS培養(yǎng)板表面的親水性
    3.5 E/VEGF-Fc活性蛋白界面介導(dǎo)的h MSCs粘附
4 結(jié)論



本文編號：3689003