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基于DNA探針的生物納米孔傳感分析

發(fā)布時(shí)間:2022-09-30 21:46
  近些年來(lái),隨著各個(gè)學(xué)科的飛速發(fā)展以及學(xué)科之間的交叉,科學(xué)研究水平已經(jīng)達(dá)到了微觀分子的水平。因此,單分子檢測(cè)技術(shù)成為了科研工作者開(kāi)拓出的一個(gè)具有挑戰(zhàn)性的研究領(lǐng)域。納米通道檢測(cè)技術(shù)是從上世紀(jì)九十年代發(fā)展起來(lái)的單分子分析技術(shù)。由于具有快速、無(wú)需熒光標(biāo)記等特點(diǎn),這項(xiàng)技術(shù)已經(jīng)被廣泛用于檢測(cè)各種物質(zhì),如金屬離子、蛋白質(zhì)和多肽等,取得了巨大的的成就并被廣泛應(yīng)用于諸多領(lǐng)域。本論文主要圍繞以下兩個(gè)方面進(jìn)行:1、利用α-溶血素納米孔檢測(cè)銅離子銅對(duì)于生物而言是一種必不可少的微量元素。人體缺乏銅會(huì)引起貧血、肝或腎損傷、威爾遜氏病等病癥,但是如果銅過(guò)多則會(huì)引起腹瀉、嘔吐、肝硬化等病癥。因此,銅離子的檢測(cè)具有重要意義。建立了一種簡(jiǎn)單而有效的策略,利用α-溶血素納米孔靈敏地檢測(cè)銅離子(Cu2+),更重要的是可以實(shí)時(shí)監(jiān)控點(diǎn)擊反應(yīng)。在此,設(shè)計(jì)了兩種單鏈DNA(ssDNA)作為預(yù)探針,一種是疊氮化物修飾的(C10),另一種是炔基修飾的(C6)。當(dāng)存在銅離子(Cu2+)的時(shí)候,銅離子被還原劑還原,兩種ssDNAs通過(guò)點(diǎn)擊反應(yīng)形成一種分叉... 

【文章頁(yè)數(shù)】:60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 單分子技術(shù)檢測(cè)概述
    1.2 納米通道技術(shù)概述
    1.3 納米通道種類
        1.3.1 生物納米通道
        1.3.2 固體納米通道
    1.4 生物納米通道的應(yīng)用
        1.4.1 DNA測(cè)序
        1.4.2 核酸分析
        1.4.3 金屬離子檢測(cè)
        1.4.4 蛋白質(zhì)及多肽分析
    1.5 本論文的研究目的、意義
    參考文獻(xiàn)
第二章 基于納米孔的銅離子傳感
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器設(shè)備
        2.2.1 試劑
        2.2.2 裝置與儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)部分
        2.3.1 溶液的配制
        2.3.2 銅離子的反應(yīng)過(guò)程
        2.3.3 選擇性實(shí)驗(yàn)
        2.3.4 實(shí)際樣本反應(yīng)
        2.3.5 α-HL納米通道構(gòu)建及檢測(cè)過(guò)程
            2.3.5.1 磷脂雙分子層的形成
            2.3.5.2 納米通道的形成
            2.3.5.3 數(shù)據(jù)采集
            2.3.5.4 數(shù)據(jù)處理
        2.3.6 實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化
            2.4.1.1 DNA探針的優(yōu)化
            2.4.1.2 DNA探針濃度的優(yōu)化
        2.4.2 銅離子的納米孔傳感
        2.4.3 銅離子的檢測(cè)靈敏度
        2.4.4 選擇性實(shí)驗(yàn)
        2.4.5 實(shí)際樣品測(cè)定
        2.4.6 實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)
            2.4.6.1 點(diǎn)擊反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率
            2.4.6.2 DNA探針的濃度對(duì)點(diǎn)擊反應(yīng)的影響
    2.5 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第三章 基于納米孔的多組分檢測(cè)策略
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器設(shè)備
        3.2.1 試劑
        3.2.2 裝置與儀器
    3.3 實(shí)驗(yàn)部分
        3.3.1 溶液準(zhǔn)備
        3.3.2 分別檢測(cè)三種蛋白
        3.3.3 同時(shí)檢測(cè)三種蛋白
        3.3.4 三種DNA底物Tm值的測(cè)定
        3.3.5 實(shí)際樣本分析
        3.3.6 α-HL納米通道構(gòu)建及檢測(cè)過(guò)程
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 可行性研究
        3.4.2 三種DNA底物電流信號(hào)分析
        3.4.3 分別檢測(cè)三種蛋白
        3.4.4 同時(shí)檢測(cè)三種蛋白
        3.4.5 實(shí)際樣品分析
    3.5 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第四章 結(jié)論與展望
攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]碳納米管/納米金復(fù)合膜電化學(xué)免疫傳感器用于微囊藻毒素的檢測(cè)研究[J]. 張新愛(ài),申建忠,張帆,馬海樂(lè),韓恩,董曉婭.  分析化學(xué). 2014(09)



本文編號(hào):3684330

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