近年來,藥物洗脫支架已成為治療動脈粥樣硬化的主要手段,但是由于內(nèi)皮化延遲或不完全導(dǎo)致的晚期血栓及再狹窄,仍是其植入失敗的主要原因。所以支架材料內(nèi)皮化或誘導(dǎo)原位內(nèi)皮化是預(yù)防晚期血栓形成的有希望的策略。因此,將藥物洗脫支架進行生物功能分子修飾獲得原位內(nèi)皮化是近年來研究的熱點。本文通過在Ti-O膜表面沉積聚多巴胺過渡層,然后將手性硒代胱氨酸和多肽KREDVC固定在Ti-O膜表面,構(gòu)建具有NO釋放的功能手性表面,以實現(xiàn)在炎癥環(huán)境下選擇性內(nèi)皮化的效果。在本文中,通過X光電子能譜（XPS）、原子力顯微鏡（AFM）、水接觸角（WCA）、胺基羧基定量、QCM-D和樣品催化釋放一氧化氮（NO）等檢測方法對改性前后的材料進行表征。XPS、AFM、WCA、氨羧基定量及QCM-D結(jié)果均表明手性硒代胱氨酸和多肽KREDVC成功固定在多巴胺表面,且手性硒代胱氨酸和KREDVC的接枝比為7:1。QCM-D結(jié)果表明雖然手性分子的固定量一致但L型手性分子表面的蛋白粘附量多于D型表面。NO釋放結(jié)果表明,材料可以穩(wěn)定持續(xù)的釋放NO,L-REDV樣品催化釋放的NO速度為:1.21±0.05×10^-10m... 

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 動脈粥樣硬化的發(fā)病機制
    1.2 動脈粥樣硬化的介入治療進展
    1.3 心血管支架表面改性研究進展
        1.3.1 心血管支架材料表面改性提高血液相容性研究進展
        1.3.2 心血管支架材料表面改性促內(nèi)皮化研究進展
    1.4 促內(nèi)皮細胞特異性粘附多肽REDV及其用于表面改性
    1.5 生物信號分子---一氧化氮(NO)
        1.5.1 NO的來源和作用機制
        1.5.2 NO在心血管支架材料上的應(yīng)用
        1.5.3 NO與氧化應(yīng)激
    1.6 手性界面生物材料
    1.7 論文研究目的與意義、內(nèi)容及技術(shù)路線
        1.7.1 研究目的及意義
        1.7.2 研究內(nèi)容
        1.7.3 技術(shù)路線
第二章 Ti-O表面固定手性硒代胱氨酸及肽KREDVC的制備與表征
    2.1 引言
    2.2 樣品的制備
        2.2.1 Ti-O薄膜的制備
        2.2.2 Ti-O薄膜表面沉積聚多巴胺
        2.2.3 不同手性硒代胱氨酸在聚多巴胺表面的固定
        2.2.4 短肽KREDVC在硒代胱氨酸表面的接枝
    2.3 材料學(xué)表征方法
        2.3.1 橢圓偏光儀
        2.3.2 X射線光電子能譜
        2.3.3 掃描電子顯微鏡
        2.3.4 原子力顯微鏡
        2.3.5 水接觸角
        2.3.6 胺基及羧基定量
            2.3.6.1 胺基定量
            2.3.6.2 羧基定量
        2.3.7 QCM-D
        2.3.8 體外催化釋放NO
    2.4 結(jié)果與分析
        2.4.1 橢圓偏光結(jié)果
        2.4.2 XPS結(jié)果
        2.4.3 SEM結(jié)果
        2.4.4 AFM結(jié)果
        2.4.5 水接觸角結(jié)果
        2.4.6 表面胺基和羧基定量結(jié)果
        2.4.7 QCM-D結(jié)果
        2.4.8 體外催化釋放NO結(jié)果
    2.5 本章小結(jié)
第三章 材料的血液相容性研究
    3.1 引言
    3.2 血液相容性評價方法
        3.2.1 纖維蛋白原粘附與變性實驗
        3.2.2 體外血小板粘附實驗
        3.2.3 溶血實驗
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 纖維蛋白原粘附與變性結(jié)果分析
        3.3.2 體外血小板的粘附與激活實驗結(jié)果與分析
        3.3.3 溶血實驗結(jié)果分析
    3.4 文章小結(jié)
第四章 材料的細胞相容性評價
    4.1 CCK-8步驟及各染色方法
        4.1.1 CCK-8步驟
        4.1.2 免疫熒光染色方法
        4.1.3 AO/PI染色原理及方法
    4.2 細胞相容性評價方法
        4.2.1 內(nèi)皮細胞的體外培養(yǎng)
            4.2.1.1 人臍靜脈內(nèi)皮細胞的提取
            4.2.1.2 內(nèi)皮細胞的體外靜態(tài)培養(yǎng)
            4.2.1.3 內(nèi)皮細胞的體外遷移
        4.2.2 平滑肌細胞的體外培養(yǎng)
            4.2.2.1 人臍動脈平滑肌細胞的提取
            4.2.2.2 平滑肌細胞的體外靜態(tài)培養(yǎng)
            4.2.2.3 平滑肌細胞的體外遷移
        4.2.3 內(nèi)皮和平滑肌細胞的共培養(yǎng)
        4.2.4 巨噬細胞的體外靜態(tài)培養(yǎng)
        4.2.5 過氧化損傷模型下內(nèi)皮細胞的培養(yǎng)
            4.2.5.1 H_2O_2/EC損傷模型下內(nèi)皮細胞的培養(yǎng)
            4.2.5.2 樣品釋放NO對 ECs分泌NO功能影響的評價
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 內(nèi)皮細胞的鋪展、粘附與遷移結(jié)果與分析
        4.3.2 平滑肌細胞的鋪展、粘附、增殖與遷移結(jié)果與分析
        4.3.3 EC和 SMC共培養(yǎng)結(jié)果與分析
        4.3.4 巨噬細胞的粘附及炎癥因子的釋放分析
        4.3.5 過氧化損傷模型下內(nèi)皮細胞的培養(yǎng)結(jié)果分析
    4.4 本章小結(jié)
第五章 小鼠體內(nèi)植入實驗
    5.1 樣品的制備及植入方法
        5.1.1 樣品的制備
        5.1.2 樣品絲的植入方法
    5.2 樣品的取出、切片和免疫熒光染色觀察
    5.3 結(jié)果分析與討論
    5.4 本章小結(jié)
第六章 表面手性對細胞行為影響及與NO和KREDVC協(xié)同作用促內(nèi)皮化的機理討論
    6.1 表面手性對細胞粘附行為的影響
    6.2 表面手性、NO及KREDVC協(xié)同作用對內(nèi)皮化的影響
    6.3 表面手性、NO及KREDVC協(xié)同作用對內(nèi)膜增生的影響
結(jié)論
致謝
參考文獻
攻讀碩士期間發(fā)表的論文和專利情況


【參考文獻】：
期刊論文
[1]NOS及NO/cGMP信號通路對哺乳動物卵泡發(fā)育的調(diào)控作用[J]. 許木林,鄭開之,孫思宇,石放雄.  中國細胞生物學(xué)學(xué)報. 2013(07)
[2]醫(yī)用生物材料血液相容性評價研究概況[J]. 劉欣,史弘道.  透析與人工器官. 2003(01)

碩士論文
[1]TiO表面固定硒代胱氨酸及其NO釋放抑制氧化應(yīng)激內(nèi)皮細胞損傷的研究[D]. 唐金.西南交通大學(xué) 2018
[2]過氧化氫介導(dǎo)的氧化應(yīng)激損傷調(diào)控瓣膜纖維化鈣化的分子機制研究[D]. 熊普熹.第二軍醫(yī)大學(xué) 2014



本文編號：3682321