近年來(lái),藥物洗脫支架已成為治療動(dòng)脈粥樣硬化的主要手段,但是由于內(nèi)皮化延遲或不完全導(dǎo)致的晚期血栓及再狹窄,仍是其植入失敗的主要原因。所以支架材料內(nèi)皮化或誘導(dǎo)原位內(nèi)皮化是預(yù)防晚期血栓形成的有希望的策略。因此,將藥物洗脫支架進(jìn)行生物功能分子修飾獲得原位內(nèi)皮化是近年來(lái)研究的熱點(diǎn)。本文通過(guò)在Ti-O膜表面沉積聚多巴胺過(guò)渡層,然后將手性硒代胱氨酸和多肽KREDVC固定在Ti-O膜表面,構(gòu)建具有NO釋放的功能手性表面,以實(shí)現(xiàn)在炎癥環(huán)境下選擇性內(nèi)皮化的效果。在本文中,通過(guò)X光電子能譜（XPS）、原子力顯微鏡（AFM）、水接觸角（WCA）、胺基羧基定量、QCM-D和樣品催化釋放一氧化氮（NO）等檢測(cè)方法對(duì)改性前后的材料進(jìn)行表征。XPS、AFM、WCA、氨羧基定量及QCM-D結(jié)果均表明手性硒代胱氨酸和多肽KREDVC成功固定在多巴胺表面,且手性硒代胱氨酸和KREDVC的接枝比為7:1。QCM-D結(jié)果表明雖然手性分子的固定量一致但L型手性分子表面的蛋白粘附量多于D型表面。NO釋放結(jié)果表明,材料可以穩(wěn)定持續(xù)的釋放NO,L-REDV樣品催化釋放的NO速度為:1.21±0.05×10^-10m... 

【文章頁(yè)數(shù)】：79 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)制
    1.2 動(dòng)脈粥樣硬化的介入治療進(jìn)展
    1.3 心血管支架表面改性研究進(jìn)展
        1.3.1 心血管支架材料表面改性提高血液相容性研究進(jìn)展
        1.3.2 心血管支架材料表面改性促內(nèi)皮化研究進(jìn)展
    1.4 促內(nèi)皮細(xì)胞特異性粘附多肽REDV及其用于表面改性
    1.5 生物信號(hào)分子---一氧化氮(NO)
        1.5.1 NO的來(lái)源和作用機(jī)制
        1.5.2 NO在心血管支架材料上的應(yīng)用
        1.5.3 NO與氧化應(yīng)激
    1.6 手性界面生物材料
    1.7 論文研究目的與意義、內(nèi)容及技術(shù)路線
        1.7.1 研究目的及意義
        1.7.2 研究?jī)?nèi)容
        1.7.3 技術(shù)路線
第二章 Ti-O表面固定手性硒代胱氨酸及肽KREDVC的制備與表征
    2.1 引言
    2.2 樣品的制備
        2.2.1 Ti-O薄膜的制備
        2.2.2 Ti-O薄膜表面沉積聚多巴胺
        2.2.3 不同手性硒代胱氨酸在聚多巴胺表面的固定
        2.2.4 短肽KREDVC在硒代胱氨酸表面的接枝
    2.3 材料學(xué)表征方法
        2.3.1 橢圓偏光儀
        2.3.2 X射線光電子能譜
        2.3.3 掃描電子顯微鏡
        2.3.4 原子力顯微鏡
        2.3.5 水接觸角
        2.3.6 胺基及羧基定量
            2.3.6.1 胺基定量
            2.3.6.2 羧基定量
        2.3.7 QCM-D
        2.3.8 體外催化釋放NO
    2.4 結(jié)果與分析
        2.4.1 橢圓偏光結(jié)果
        2.4.2 XPS結(jié)果
        2.4.3 SEM結(jié)果
        2.4.4 AFM結(jié)果
        2.4.5 水接觸角結(jié)果
        2.4.6 表面胺基和羧基定量結(jié)果
        2.4.7 QCM-D結(jié)果
        2.4.8 體外催化釋放NO結(jié)果
    2.5 本章小結(jié)
第三章 材料的血液相容性研究
    3.1 引言
    3.2 血液相容性評(píng)價(jià)方法
        3.2.1 纖維蛋白原粘附與變性實(shí)驗(yàn)
        3.2.2 體外血小板粘附實(shí)驗(yàn)
        3.2.3 溶血實(shí)驗(yàn)
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 纖維蛋白原粘附與變性結(jié)果分析
        3.3.2 體外血小板的粘附與激活實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        3.3.3 溶血實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
    3.4 文章小結(jié)
第四章 材料的細(xì)胞相容性評(píng)價(jià)
    4.1 CCK-8步驟及各染色方法
        4.1.1 CCK-8步驟
        4.1.2 免疫熒光染色方法
        4.1.3 AO/PI染色原理及方法
    4.2 細(xì)胞相容性評(píng)價(jià)方法
        4.2.1 內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)
            4.2.1.1 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的提取
            4.2.1.2 內(nèi)皮細(xì)胞的體外靜態(tài)培養(yǎng)
            4.2.1.3 內(nèi)皮細(xì)胞的體外遷移
        4.2.2 平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)
            4.2.2.1 人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的提取
            4.2.2.2 平滑肌細(xì)胞的體外靜態(tài)培養(yǎng)
            4.2.2.3 平滑肌細(xì)胞的體外遷移
        4.2.3 內(nèi)皮和平滑肌細(xì)胞的共培養(yǎng)
        4.2.4 巨噬細(xì)胞的體外靜態(tài)培養(yǎng)
        4.2.5 過(guò)氧化損傷模型下內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)
            4.2.5.1 H_2O_2/EC損傷模型下內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)
            4.2.5.2 樣品釋放NO對(duì) ECs分泌NO功能影響的評(píng)價(jià)
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 內(nèi)皮細(xì)胞的鋪展、粘附與遷移結(jié)果與分析
        4.3.2 平滑肌細(xì)胞的鋪展、粘附、增殖與遷移結(jié)果與分析
        4.3.3 EC和 SMC共培養(yǎng)結(jié)果與分析
        4.3.4 巨噬細(xì)胞的粘附及炎癥因子的釋放分析
        4.3.5 過(guò)氧化損傷模型下內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)結(jié)果分析
    4.4 本章小結(jié)
第五章 小鼠體內(nèi)植入實(shí)驗(yàn)
    5.1 樣品的制備及植入方法
        5.1.1 樣品的制備
        5.1.2 樣品絲的植入方法
    5.2 樣品的取出、切片和免疫熒光染色觀察
    5.3 結(jié)果分析與討論
    5.4 本章小結(jié)
第六章 表面手性對(duì)細(xì)胞行為影響及與NO和KREDVC協(xié)同作用促內(nèi)皮化的機(jī)理討論
    6.1 表面手性對(duì)細(xì)胞粘附行為的影響
    6.2 表面手性、NO及KREDVC協(xié)同作用對(duì)內(nèi)皮化的影響
    6.3 表面手性、NO及KREDVC協(xié)同作用對(duì)內(nèi)膜增生的影響
結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士期間發(fā)表的論文和專利情況


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]NOS及NO/cGMP信號(hào)通路對(duì)哺乳動(dòng)物卵泡發(fā)育的調(diào)控作用[J]. 許木林,鄭開之,孫思宇,石放雄.  中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào). 2013(07)
[2]醫(yī)用生物材料血液相容性評(píng)價(jià)研究概況[J]. 劉欣,史弘道.  透析與人工器官. 2003(01)

碩士論文
[1]TiO表面固定硒代胱氨酸及其NO釋放抑制氧化應(yīng)激內(nèi)皮細(xì)胞損傷的研究[D]. 唐金.西南交通大學(xué) 2018
[2]過(guò)氧化氫介導(dǎo)的氧化應(yīng)激損傷調(diào)控瓣膜纖維化鈣化的分子機(jī)制研究[D]. 熊普熹.第二軍醫(yī)大學(xué) 2014



本文編號(hào)：3682321