不同濃度海藻糖對液氮深低溫保存同種帶瓣大動脈組織的保護作用及其對caspase-3表達的影響
發(fā)布時間:2022-05-10 19:59
目的觀察海藻糖作為冷凍保護劑凍存同種帶瓣大動脈組織,尋求最佳的冷凍保護劑并探討冷凍保護劑的最佳適宜濃度以及帶瓣大動脈組織caspase-3的表達。方法在液氮中凍存時間點分為12個月,15個月,18個月,依據凍存液不同分為5組,分別是:0.1mol/L DMSO(對照組),0.1mol/L海藻糖(實驗組1),0.1mol/L海藻糖+0.1mol/L DMSO(實驗組2),0.2mol/L海藻糖+0.1mol/L DMSO(實驗組3),0.3mol/L海藻糖+0.1mol/L DMSO(實驗組4)。免疫組化光鏡觀察組織細胞凋亡,測定血糖濃度檢測組織細胞代謝情況。采用RT-PCR和Western Blot方法分別測定Caspase-3的相對表達量。新鮮組作為陰性對照。結果隨著保存時間的延長,同種帶瓣大動脈組織和細胞破壞逐漸加重。光鏡下觀察,新鮮大動脈組織均為弱陽性,各組標本與新鮮組織比較均有明顯改變(d=37-43,P<0.05)。各組之間除實驗組2和實驗組3比較無差異外(d=66-72,P>0.05)其余各組比較均有差異(d=0-42,P<0.05),細胞凋亡最輕的是新鮮...
【文章頁數】:38 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
引言
第一章 材料和方法
1.1 實驗對象
1.1.1 采用Jashari等的抗生素配方
1.1.2 實驗分組
1.2 試劑和儀器設備
1.2.1 主要試劑
1.2.2 主要儀器設備
1.3 凍存液的配置
1.4 保存
1.5 解凍及漂洗
1.6 實驗方法
1.6.1 免疫組化
1.6.1.1 免疫組化方法
1.6.1.2 免疫組化結果判讀
1.6.2 糖代謝測定
1.6.3 RT-PCR
1.6.4 Western-Blot
1.7 統(tǒng)計方法
第二章 實驗結果
2.1 肉眼觀察
2.2 光鏡觀察
2.3 糖代謝
2.4 RT-PCR
2.5 Western-Blot
第三章 討論
3.1 同種帶瓣大動脈組織的保存
3.3 同種帶瓣大動脈的應用
3.4 同種帶瓣動脈的滅菌、降溫和復溫
3.5 細胞凋亡
3.6 葡萄糖消耗量測定
3.7 海藻糖與DMSO
結論
參考文獻
文獻綜述
參考文獻
附錄
攻讀學位期間發(fā)表的論文
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]大鼠皮膚的冷凍干燥保存[J]. 楊維,姜曼,耿文鑫,嚴興榮,都慧聰,魏菁,劉亮岐,趙潔,李立文,陳富林. 中國組織工程研究與臨床康復. 2009(41)
[2]兔胚胎玻璃化冷凍的研究[J]. 金花子,金慶國,李鐘淑,鄭東吉,方南洙. 延邊大學農學學報. 2009(02)
[3]冷凍干燥保存兔血小板的實驗研究[J]. 劉景漢,張長虹,周俊,盧發(fā)強,楊連貴. 中國輸血雜志. 2008(09)
[4]海藻多糖對博來霉素誘導的大鼠肺間質纖維化模型的干預作用研究[J]. 秦華,李棟,曹廣生. 齊魯藥事. 2008(09)
[5]純化后海藻硫酸多糖-蛋白復合物誘導人肝癌細胞SMMC-7721凋亡作用的研究[J]. 嵇蓉,王長振,叢建波,先宏,孫存普,吳可. 解放軍藥學學報. 2008(04)
[6]海藻糖對紅細胞保養(yǎng)液中ATP酶活性的保護作用[J]. 高勇,孟憲軍. 中國輸血雜志. 2008(07)
[7]人血小板的冷凍干燥保存:細胞內外保護劑的作用[J]. 周新麗,張紹志,陳光明. 制冷學報. 2008(02)
[8]新型抗凍劑海藻糖對低溫保存皮膚組織α-輔肌動蛋白表達的實驗研究[J]. 賈曉明,于瑜,李東杰. 中國修復重建外科雜志. 2008(04)
[9]二甲亞砜對血小板凍存中功能保護作用的實驗研究[J]. 周俊,劉景漢,金玉,歐陽錫林,楊連貴. 中國實驗血液學雜志. 2007(06)
[10]海藻多糖抗衰老作用的研究進展[J]. 劉金鳳,曲有樂. 黑龍江醫(yī)藥科學. 2006(06)
本文編號:3652604
【文章頁數】:38 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
引言
第一章 材料和方法
1.1 實驗對象
1.1.1 采用Jashari等的抗生素配方
1.1.2 實驗分組
1.2 試劑和儀器設備
1.2.1 主要試劑
1.2.2 主要儀器設備
1.3 凍存液的配置
1.4 保存
1.5 解凍及漂洗
1.6 實驗方法
1.6.1 免疫組化
1.6.1.1 免疫組化方法
1.6.1.2 免疫組化結果判讀
1.6.2 糖代謝測定
1.6.3 RT-PCR
1.6.4 Western-Blot
1.7 統(tǒng)計方法
第二章 實驗結果
2.1 肉眼觀察
2.2 光鏡觀察
2.3 糖代謝
2.4 RT-PCR
2.5 Western-Blot
第三章 討論
3.1 同種帶瓣大動脈組織的保存
3.3 同種帶瓣大動脈的應用
3.4 同種帶瓣動脈的滅菌、降溫和復溫
3.5 細胞凋亡
3.6 葡萄糖消耗量測定
3.7 海藻糖與DMSO
結論
參考文獻
文獻綜述
參考文獻
附錄
攻讀學位期間發(fā)表的論文
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]大鼠皮膚的冷凍干燥保存[J]. 楊維,姜曼,耿文鑫,嚴興榮,都慧聰,魏菁,劉亮岐,趙潔,李立文,陳富林. 中國組織工程研究與臨床康復. 2009(41)
[2]兔胚胎玻璃化冷凍的研究[J]. 金花子,金慶國,李鐘淑,鄭東吉,方南洙. 延邊大學農學學報. 2009(02)
[3]冷凍干燥保存兔血小板的實驗研究[J]. 劉景漢,張長虹,周俊,盧發(fā)強,楊連貴. 中國輸血雜志. 2008(09)
[4]海藻多糖對博來霉素誘導的大鼠肺間質纖維化模型的干預作用研究[J]. 秦華,李棟,曹廣生. 齊魯藥事. 2008(09)
[5]純化后海藻硫酸多糖-蛋白復合物誘導人肝癌細胞SMMC-7721凋亡作用的研究[J]. 嵇蓉,王長振,叢建波,先宏,孫存普,吳可. 解放軍藥學學報. 2008(04)
[6]海藻糖對紅細胞保養(yǎng)液中ATP酶活性的保護作用[J]. 高勇,孟憲軍. 中國輸血雜志. 2008(07)
[7]人血小板的冷凍干燥保存:細胞內外保護劑的作用[J]. 周新麗,張紹志,陳光明. 制冷學報. 2008(02)
[8]新型抗凍劑海藻糖對低溫保存皮膚組織α-輔肌動蛋白表達的實驗研究[J]. 賈曉明,于瑜,李東杰. 中國修復重建外科雜志. 2008(04)
[9]二甲亞砜對血小板凍存中功能保護作用的實驗研究[J]. 周俊,劉景漢,金玉,歐陽錫林,楊連貴. 中國實驗血液學雜志. 2007(06)
[10]海藻多糖抗衰老作用的研究進展[J]. 劉金鳳,曲有樂. 黑龍江醫(yī)藥科學. 2006(06)
本文編號:3652604
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