bFGF/雙層膠原基復(fù)合材料修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損及其相關(guān)研究
發(fā)布時(shí)間:2022-05-10 18:00
創(chuàng)傷修復(fù)過程是多種生長因子協(xié)調(diào)的時(shí)空控制過程。應(yīng)用外源性生長因子在組織修復(fù)過程中顯示了較好的應(yīng)用前景,但是實(shí)現(xiàn)生長因子的時(shí)空控制,進(jìn)而實(shí)現(xiàn)創(chuàng)傷組織的再生修復(fù),仍然存在著巨大的挑戰(zhàn)。組織工程方法的出現(xiàn),為解決組織修復(fù)提供了一個(gè)新的途徑。構(gòu)建具有時(shí)空控制釋放特點(diǎn)的載生長因子組織工程支架已成為一個(gè)新的研究方向。時(shí)空控制釋放生長因子體現(xiàn)了生長因子釋放的兩個(gè)特點(diǎn):1.所釋放的生長因子聚集與創(chuàng)傷組織局部,作用于相應(yīng)的靶組織和細(xì)胞,并避免釋放于周圍組織引起的不可預(yù)期結(jié)果;2.生長因子釋放應(yīng)該持續(xù)足夠長的時(shí)間,滿足組織再生修復(fù)的需求。生長因子的釋放與支架材料的結(jié)構(gòu)存在一定的相關(guān)性。通過調(diào)整支架材料的疏松或致密結(jié)構(gòu),可以改變所負(fù)載生長因子的釋放行為。據(jù)此,本研究設(shè)計(jì)制備一種具有雙側(cè)疏松或致密程度不同的雙層結(jié)構(gòu)材料,以期通過材料的結(jié)構(gòu)差異調(diào)整生長因子的釋放行為,實(shí)現(xiàn)所負(fù)載生長因子的時(shí)空控制釋放。并將所制備材料應(yīng)用于傳統(tǒng)的治療方法如軟骨下鉆孔術(shù)、微骨折、自體骨軟骨鑲嵌成型術(shù)和自體軟骨細(xì)胞移植術(shù)等難以實(shí)現(xiàn)有效修復(fù)的的創(chuàng)傷軟骨組織。1.研究中選用膠原材料為主要原材料構(gòu)建組織工程支架。由于堿性成纖維細(xì)胞生長因子(...
【文章頁數(shù)】:103 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
第一章 緒論
1 軟骨組織工程的發(fā)展
2 組織工程支架材料
2.1 膠原
2.2 殼聚糖
3 細(xì)胞因子
3.1 成纖維細(xì)胞生長因子
3.2 骨形態(tài)發(fā)生蛋白
3.3 轉(zhuǎn)化生長因子β
3.4 其它細(xì)胞因子
4 抗體芯片技術(shù)
5 課題的提出與主要研究內(nèi)容
6 參考文獻(xiàn)
第二章 bFGF/雙層膠原基復(fù)合材料的制備及其體外釋放動(dòng)力學(xué)研究
1 試劑和儀器
1.1 試劑
1.2 儀器和設(shè)備
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 bDM的制備和表征
2.2 雙層膠原基復(fù)合材料的釋放
3 結(jié)果與討論
3.1 CS-He納米粒子表征
3.2 CFM,CAM表征
3.3 雙層膠原基復(fù)合材料表征
3.4 HSA釋放實(shí)驗(yàn)
4 討論
5 結(jié)論
6 參考文獻(xiàn)
第三章 L929細(xì)胞在雙層膠原基復(fù)合材料上的粘附和增殖研究
1 實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
1.1 實(shí)驗(yàn)材料
1.2 儀器和設(shè)備
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 雙層膠原基復(fù)合材料制備
2.2 L929細(xì)胞體外培養(yǎng)
2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 試驗(yàn)結(jié)果
4 討論
5 結(jié)論
6 參考文獻(xiàn)
第四章 bFGF/雙層膠原基復(fù)合材料修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損的試驗(yàn)研究
1 材料和方法
1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.2 試劑
1.3 儀器和設(shè)備
1.4 脫鈣液的配置
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 復(fù)合和未復(fù)合bFGF的雙層膠原基復(fù)合材料的制備
2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組
2.3 動(dòng)物手術(shù)
2.4 取材和組織學(xué)檢測
2.5 組織學(xué)評分
2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 大體觀察
3.2 組織學(xué)觀察
3.3 Ⅱ型膠原檢測結(jié)果
3.4 組織學(xué)評分結(jié)果
4 討論
5 結(jié)論
6 參考文獻(xiàn)
第五章 bFGF/雙層膠原基復(fù)合材料修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損對關(guān)節(jié)液細(xì)胞因子的影響
1 材料和方法
1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.2 試劑
1.3 儀器和設(shè)備
2 試驗(yàn)方法
2.1 bFGF/雙層膠原基復(fù)合材料的制備
2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組
2.3 動(dòng)物手術(shù)
2.4 取材與檢測
3 試驗(yàn)結(jié)果
3.1 動(dòng)物大體觀察
3.2 趨化因子、細(xì)胞因子和生長因子檢測結(jié)果
4 討論
4.1 陽性細(xì)胞因子生物學(xué)作用
4.2 各實(shí)驗(yàn)組陽性細(xì)胞因子趨勢分析
5 結(jié)論
6 參考文獻(xiàn)
第六章 bFGF/雙層膠原基復(fù)合材料的安全性評價(jià)
1 材料
1.1 試驗(yàn)材料
1.2 儀器
1.3 動(dòng)物及細(xì)胞株
2 方法
2.1 bDG材料的制備
2.2 材料浸提液制備
2.3 材料浸提液pH值檢測
2.4 細(xì)胞毒性試驗(yàn)
2.5 急性全身毒性試驗(yàn)
2.6 溶血試驗(yàn)
2.7 熱原試驗(yàn)
2.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理方法
3 試驗(yàn)結(jié)果
3.1 pH檢測結(jié)果
3.2 細(xì)胞毒性試驗(yàn)結(jié)果
3.3 急性全身毒性試驗(yàn)結(jié)果
3.4 溶血試驗(yàn)結(jié)果
3.5 熱原試驗(yàn)結(jié)果
4 結(jié)論
5 參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)
博士期間發(fā)表論文、專利及參加的會(huì)議
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]載荷bFGF-PLGA微球的膠原海綿的制備及其體外緩釋性能研究[J]. 武繼民,汪鵬飛,李志宏,劉永清,袁曉燕. 天津大學(xué)學(xué)報(bào). 2010(07)
[2]SELDI蛋白質(zhì)芯片技術(shù)檢測膝骨性關(guān)節(jié)炎患者黏附關(guān)節(jié)液中蛋白質(zhì)的差異改變[J]. 牟文鳳,王亞秋,孫佰秀,王斌. 中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志. 2008(14)
[3]天然支架在軟骨組織工程中應(yīng)用的研究現(xiàn)狀[J]. 張華亮,王文良. 武警醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2008(02)
[4]bFGF對關(guān)節(jié)軟骨缺損的修復(fù)作用[J]. 司全明,侯筱魁,毛賓堯. 實(shí)用骨科雜志. 2008(01)
[5]重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子對大鼠十二指腸潰瘍的治療作用及臨床前安全性評價(jià)[J]. 李文廣,張艷霞,吳勇杰,高明堂. 中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué). 2007(11)
[6]bFGF-PLA-Ns對體外培養(yǎng)成骨細(xì)胞增殖、分化及礦化的影響[J]. 張綱,亓連軍,譚穎徽,盧來春,裘松波,何飛. 第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2007(21)
[7]In Vitro Cytotoxicity and Protein Drug Release Properties of Chitosan/Heparin Microspheres[J]. 賀慶,敖強(qiáng),王愛軍,公衍道,趙南明,張秀芳. Tsinghua Science and Technology. 2007(04)
[8]骨形態(tài)發(fā)生蛋白的基礎(chǔ)研究及臨床應(yīng)用[J]. 宋興賢. 現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生. 2007(07)
[9]低分子肝素-殼聚糖-羧甲纖維素鈉微囊的制備及釋藥性能[J]. 丘曉琳,李國明. 中國醫(yī)藥工業(yè)雜志. 2005(11)
[10]骨形態(tài)發(fā)生蛋白的研究進(jìn)展[J]. 楊寧,陳增海,欒怡,于修平. 山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2004(02)
本文編號:3652422
【文章頁數(shù)】:103 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
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第一章 緒論
1 軟骨組織工程的發(fā)展
2 組織工程支架材料
2.1 膠原
2.2 殼聚糖
3 細(xì)胞因子
3.1 成纖維細(xì)胞生長因子
3.2 骨形態(tài)發(fā)生蛋白
3.3 轉(zhuǎn)化生長因子β
3.4 其它細(xì)胞因子
4 抗體芯片技術(shù)
5 課題的提出與主要研究內(nèi)容
6 參考文獻(xiàn)
第二章 bFGF/雙層膠原基復(fù)合材料的制備及其體外釋放動(dòng)力學(xué)研究
1 試劑和儀器
1.1 試劑
1.2 儀器和設(shè)備
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 bDM的制備和表征
2.2 雙層膠原基復(fù)合材料的釋放
3 結(jié)果與討論
3.1 CS-He納米粒子表征
3.2 CFM,CAM表征
3.3 雙層膠原基復(fù)合材料表征
3.4 HSA釋放實(shí)驗(yàn)
4 討論
5 結(jié)論
6 參考文獻(xiàn)
第三章 L929細(xì)胞在雙層膠原基復(fù)合材料上的粘附和增殖研究
1 實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
1.1 實(shí)驗(yàn)材料
1.2 儀器和設(shè)備
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 雙層膠原基復(fù)合材料制備
2.2 L929細(xì)胞體外培養(yǎng)
2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 試驗(yàn)結(jié)果
4 討論
5 結(jié)論
6 參考文獻(xiàn)
第四章 bFGF/雙層膠原基復(fù)合材料修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損的試驗(yàn)研究
1 材料和方法
1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.2 試劑
1.3 儀器和設(shè)備
1.4 脫鈣液的配置
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 復(fù)合和未復(fù)合bFGF的雙層膠原基復(fù)合材料的制備
2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組
2.3 動(dòng)物手術(shù)
2.4 取材和組織學(xué)檢測
2.5 組織學(xué)評分
2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 大體觀察
3.2 組織學(xué)觀察
3.3 Ⅱ型膠原檢測結(jié)果
3.4 組織學(xué)評分結(jié)果
4 討論
5 結(jié)論
6 參考文獻(xiàn)
第五章 bFGF/雙層膠原基復(fù)合材料修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損對關(guān)節(jié)液細(xì)胞因子的影響
1 材料和方法
1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.2 試劑
1.3 儀器和設(shè)備
2 試驗(yàn)方法
2.1 bFGF/雙層膠原基復(fù)合材料的制備
2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組
2.3 動(dòng)物手術(shù)
2.4 取材與檢測
3 試驗(yàn)結(jié)果
3.1 動(dòng)物大體觀察
3.2 趨化因子、細(xì)胞因子和生長因子檢測結(jié)果
4 討論
4.1 陽性細(xì)胞因子生物學(xué)作用
4.2 各實(shí)驗(yàn)組陽性細(xì)胞因子趨勢分析
5 結(jié)論
6 參考文獻(xiàn)
第六章 bFGF/雙層膠原基復(fù)合材料的安全性評價(jià)
1 材料
1.1 試驗(yàn)材料
1.2 儀器
1.3 動(dòng)物及細(xì)胞株
2 方法
2.1 bDG材料的制備
2.2 材料浸提液制備
2.3 材料浸提液pH值檢測
2.4 細(xì)胞毒性試驗(yàn)
2.5 急性全身毒性試驗(yàn)
2.6 溶血試驗(yàn)
2.7 熱原試驗(yàn)
2.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理方法
3 試驗(yàn)結(jié)果
3.1 pH檢測結(jié)果
3.2 細(xì)胞毒性試驗(yàn)結(jié)果
3.3 急性全身毒性試驗(yàn)結(jié)果
3.4 溶血試驗(yàn)結(jié)果
3.5 熱原試驗(yàn)結(jié)果
4 結(jié)論
5 參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)
博士期間發(fā)表論文、專利及參加的會(huì)議
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]載荷bFGF-PLGA微球的膠原海綿的制備及其體外緩釋性能研究[J]. 武繼民,汪鵬飛,李志宏,劉永清,袁曉燕. 天津大學(xué)學(xué)報(bào). 2010(07)
[2]SELDI蛋白質(zhì)芯片技術(shù)檢測膝骨性關(guān)節(jié)炎患者黏附關(guān)節(jié)液中蛋白質(zhì)的差異改變[J]. 牟文鳳,王亞秋,孫佰秀,王斌. 中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志. 2008(14)
[3]天然支架在軟骨組織工程中應(yīng)用的研究現(xiàn)狀[J]. 張華亮,王文良. 武警醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2008(02)
[4]bFGF對關(guān)節(jié)軟骨缺損的修復(fù)作用[J]. 司全明,侯筱魁,毛賓堯. 實(shí)用骨科雜志. 2008(01)
[5]重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子對大鼠十二指腸潰瘍的治療作用及臨床前安全性評價(jià)[J]. 李文廣,張艷霞,吳勇杰,高明堂. 中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué). 2007(11)
[6]bFGF-PLA-Ns對體外培養(yǎng)成骨細(xì)胞增殖、分化及礦化的影響[J]. 張綱,亓連軍,譚穎徽,盧來春,裘松波,何飛. 第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2007(21)
[7]In Vitro Cytotoxicity and Protein Drug Release Properties of Chitosan/Heparin Microspheres[J]. 賀慶,敖強(qiáng),王愛軍,公衍道,趙南明,張秀芳. Tsinghua Science and Technology. 2007(04)
[8]骨形態(tài)發(fā)生蛋白的基礎(chǔ)研究及臨床應(yīng)用[J]. 宋興賢. 現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生. 2007(07)
[9]低分子肝素-殼聚糖-羧甲纖維素鈉微囊的制備及釋藥性能[J]. 丘曉琳,李國明. 中國醫(yī)藥工業(yè)雜志. 2005(11)
[10]骨形態(tài)發(fā)生蛋白的研究進(jìn)展[J]. 楊寧,陳增海,欒怡,于修平. 山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2004(02)
本文編號:3652422
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