本文關鍵詞：I型膠原的提取及其組裝和表征，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】： 膠原蛋白,簡稱膠原,是細胞外基質的主要結構蛋白,是結締組織的主要成份之一。它廣泛存在于動物的皮、骨、肌腱、韌帶、血管中,約占哺乳動物總蛋白的1/3。膠原蛋白以其良好的生物相容性、生物可降解性和弱抗原性,在藥物釋放和組織工程領域得到了廣泛地應用。 本文是以不同種屬的動物皮膚為基本原料,通過酸溶法——醋酸萃取提取了鯊魚(Carcharodon carcharias)、牛蛙(Rana catesbeiana)、鵪鶉(Coturnix coturnix)、青魚(Potamalosa richmondia)四種動物的I型膠原。用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分析提取的膠原,與標準分子量蛋白比較得到:這四種膠原的肽鏈組成均為α1(I)2α2(I),與I型膠原的肽鏈組成相一致;分別測量提取的膠原的特征吸收峰,結果顯示:這四種膠原的最高吸收峰均在225±5 nm,與文獻報道的膠原的特征吸收峰位置相符。用考馬斯亮藍染色法測定四種膠原的濃度,結果顯示:鯊魚皮膚膠原的提取率相對最高,鵪鶉皮膚膠原的提取率相對最低。 以這四種膠原提取液為母液,使用真空冷凍干燥法,得到相應的膠原海綿。這四種膠原海綿外觀相似,色澤白或微黃,質地均勻,結構較為疏松,肉眼可見許多大小不一的孔隙;進一步對其含水量、潤濕時間、吸水量、吸水率等物理性能進行測定,數據表明膠原海綿親水性好,吸水率較大。用紫外燈照射鯊魚膠原海綿,促使其膠原分子中酪氨酸和苯丙氨酸的交聯(lián),得到的膠原支架材料呈現立體的網狀結構。 設計使用透析法制備了膠原水凝膠膜,即對飽和的鯊魚、牛蛙膠原提取液,通過透析、載玻片壓平制備成膠原水凝膠膜。與電紡絲法制備納米級膠原膜相比,此方法簡便易行,無需復雜的儀器設備。螺旋測微器測量膠原水凝膠膜的厚度,在飽和狀態(tài)下得到的鯊魚膠原水凝膠膜為0.210±0.040 mm、牛蛙膠原水凝膠膜為0.070±0.015 mm。對鯊魚膠原水凝膠膜進行SEM和AFM表征,從SEM圖像中能夠清楚地看到膠原纖維,彼此緊密交聯(lián),每根膠原纖維由相互纏繞的三股螺旋形成;AFM結果顯示單根膠原纖維的直徑在150～200 nm,組成膠原纖維的小片斷的直徑在100±30 nm,與SEM圖得到的結果相一致。
【關鍵詞】：膠原 酸溶萃取 交聯(lián) 膠原水凝膠膜
【學位授予單位】：東南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2006
【分類號】：R318.08
【目錄】：

• 摘要4-5
• ABSTRACT5-10
• 第一章 緒論10-27
• 1.1 課題研究背景10
• 1.2 膠原概況10-15
• 1.2.1 細胞外基質10-11
• 1.2.2 膠原概念11
• 1.2.3 膠原結構11-14
• 1.2.3.1 膠原構造11-12
• 1.2.3.2 氨基酸組成12-13
• 1.2.3.3 纖維形成蛋白13-14
• 1.2.4 膠原類型及分布14-15
• 1.3 膠原的一般生化特性15-19
• 1.3.1 變性15-16
• 1.3.1.1 蛋白質變性15-16
• 1.3.1.2 膠原變性16
• 1.3.2 復性16
• 1.3.2.1 蛋白質復性16
• 1.3.2.2 膠原復性16
• 1.3.3 其它生化特性16-17
• 1.3.4 膠原的鑒定17-19
• 1.4 膠原的應用19-23
• 1.4.1 在藥物釋放中的應用19-20
• 1.4.1.1 作為藥物和基因輸送系統(tǒng)19-20
• 1.4.1.2 作為可鈣化基質系統(tǒng)20
• 1.4.2 在組織工程中的應用20-22
• 1.4.2.1 作為組織培養(yǎng)系統(tǒng)的支架20-21
• 1.4.2.2 活性人工皮膚21
• 1.4.2.3 骨骼替代物21-22
• 1.4.2.4 膠原海綿22
• 1.4.3 其它方面的應用22-23
• 1.5 本論文的研究意義及主要內容23-24
• 參考文獻24-27
• 第二章 I型膠原蛋白的提取27-42
• 2.1 引言27-28
• 2.2 實驗原理28-29
• 2.3 實驗材料與方法29-34
• 2.3.1 試劑與儀器29-30
• 2.3.2 實驗材料選擇30-31
• 2.3.3 實驗步驟31-32
• 2.3.4 結果表征32-34
• 2.3.4.1 SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳32-33
• 2.3.4.2 考馬斯亮藍染色法測定蛋白質含量33-34
• 2.4 結果與討論34-40
• 2.4.1 前處理溶液的選擇34
• 2.4.2 SDS-PAGE分析34-36
• 2.4.3 紫外分析36-37
• 2.4.4 膠原濃度的測定37-40
• 2.5 本章小結40-41
• 參考文獻41-42
• 第三章 膠原海綿的制備和特性分析42-55
• 3.1 引言42-43
• 3.2 實驗原理43-44
• 3.2.1 真空冷凍干燥43
• 3.2.2 膠原交聯(lián)43-44
• 3.3 實驗材料與方法44-45
• 3.3.1 試劑與儀器44
• 3.3.2 實驗步驟44-45
• 3.4 結果與討論45-53
• 3.4.1 蒸餾水透析45
• 3.4.2 凍干膠原海綿45-47
• 3.4.3 膠原海綿物理性能測試47-51
• 3.4.4 紫外照射交聯(lián)膠原海綿51-53
• 3.5 本章小結53-54
• 參考文獻54-55
• 第四章 膠原水凝膠膜的制備及表征55-70
• 4.1 引言55-57
• 4.1.1 電紡絲原理56-57
• 4.1.2 影響參數57
• 4.2 實驗原理57-59
• 4.2.1 膠原透析57-58
• 4.2.2 膠原凝膠的形成58-59
• 4.2.3 AFM原理59
• 4.3 實驗材料與方法59-60
• 4.3.1 試劑與儀器59
• 4.3.2 實驗步驟59-60
• 4.4 結果與討論60-68
• 4.4.1 透析60-61
• 4.4.2 透析膠原成膜61-62
• 4.4.3 膠原水凝膠膜厚度測定62-63
• 4.4.4 SEM表征63-65
• 4.4.5 AFM表征65-68
• 4.5 本章小結68-69
• 參考文獻69-70
• 第五章 總結和展望70-72
• 5.1 本論文的工作總結70-71
• 5.2 展望71-72
• 附錄72-73
• 致謝73

【引證文獻】

中國期刊全文數據庫 前1條

1 劉志娟;張朝輝;趙雪;李八方;;單環(huán)刺嚑體壁膠原蛋白的提取及其理化性質[J];食品科學;2012年07期

中國碩士學位論文全文數據庫 前5條

1 劉寒;利用黑線鱈和狹鱈加工副產品制備膠原的表征及其功能評價[D];中國海洋大學;2011年

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3 劉志娟;單環(huán)刺嚑體壁膠原蛋白結構和性質的研究[D];中國海洋大學;2012年

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5 陳麗麗;洶魚皮中膠原蛋白的提取、性質及其應用研究[D];江西科技師范大學;2012年

  本文關鍵詞：I型膠原的提取及其組裝和表征，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：357859