本文關(guān)鍵詞：I型膠原的提取及其組裝和表征，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】： 膠原蛋白,簡(jiǎn)稱膠原,是細(xì)胞外基質(zhì)的主要結(jié)構(gòu)蛋白,是結(jié)締組織的主要成份之一。它廣泛存在于動(dòng)物的皮、骨、肌腱、韌帶、血管中,約占哺乳動(dòng)物總蛋白的1/3。膠原蛋白以其良好的生物相容性、生物可降解性和弱抗原性,在藥物釋放和組織工程領(lǐng)域得到了廣泛地應(yīng)用。 本文是以不同種屬的動(dòng)物皮膚為基本原料,通過酸溶法——醋酸萃取提取了鯊魚(Carcharodon carcharias)、牛蛙(Rana catesbeiana)、鵪鶉(Coturnix coturnix)、青魚(Potamalosa richmondia)四種動(dòng)物的I型膠原。用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分析提取的膠原,與標(biāo)準(zhǔn)分子量蛋白比較得到:這四種膠原的肽鏈組成均為α1(I)2α2(I),與I型膠原的肽鏈組成相一致;分別測(cè)量提取的膠原的特征吸收峰,結(jié)果顯示:這四種膠原的最高吸收峰均在225±5 nm,與文獻(xiàn)報(bào)道的膠原的特征吸收峰位置相符。用考馬斯亮藍(lán)染色法測(cè)定四種膠原的濃度,結(jié)果顯示:鯊魚皮膚膠原的提取率相對(duì)最高,鵪鶉皮膚膠原的提取率相對(duì)最低。 以這四種膠原提取液為母液,使用真空冷凍干燥法,得到相應(yīng)的膠原海綿。這四種膠原海綿外觀相似,色澤白或微黃,質(zhì)地均勻,結(jié)構(gòu)較為疏松,肉眼可見許多大小不一的孔隙;進(jìn)一步對(duì)其含水量、潤濕時(shí)間、吸水量、吸水率等物理性能進(jìn)行測(cè)定,數(shù)據(jù)表明膠原海綿親水性好,吸水率較大。用紫外燈照射鯊魚膠原海綿,促使其膠原分子中酪氨酸和苯丙氨酸的交聯(lián),得到的膠原支架材料呈現(xiàn)立體的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。 設(shè)計(jì)使用透析法制備了膠原水凝膠膜,即對(duì)飽和的鯊魚、牛蛙膠原提取液,通過透析、載玻片壓平制備成膠原水凝膠膜。與電紡絲法制備納米級(jí)膠原膜相比,此方法簡(jiǎn)便易行,無需復(fù)雜的儀器設(shè)備。螺旋測(cè)微器測(cè)量膠原水凝膠膜的厚度,在飽和狀態(tài)下得到的鯊魚膠原水凝膠膜為0.210±0.040 mm、牛蛙膠原水凝膠膜為0.070±0.015 mm。對(duì)鯊魚膠原水凝膠膜進(jìn)行SEM和AFM表征,從SEM圖像中能夠清楚地看到膠原纖維,彼此緊密交聯(lián),每根膠原纖維由相互纏繞的三股螺旋形成;AFM結(jié)果顯示單根膠原纖維的直徑在150～200 nm,組成膠原纖維的小片斷的直徑在100±30 nm,與SEM圖得到的結(jié)果相一致。
【關(guān)鍵詞】：膠原 酸溶萃取 交聯(lián) 膠原水凝膠膜
【學(xué)位授予單位】：東南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號(hào)】：R318.08
【目錄】：

• 摘要4-5
• ABSTRACT5-10
• 第一章 緒論10-27
• 1.1 課題研究背景10
• 1.2 膠原概況10-15
• 1.2.1 細(xì)胞外基質(zhì)10-11
• 1.2.2 膠原概念11
• 1.2.3 膠原結(jié)構(gòu)11-14
• 1.2.3.1 膠原構(gòu)造11-12
• 1.2.3.2 氨基酸組成12-13
• 1.2.3.3 纖維形成蛋白13-14
• 1.2.4 膠原類型及分布14-15
• 1.3 膠原的一般生化特性15-19
• 1.3.1 變性15-16
• 1.3.1.1 蛋白質(zhì)變性15-16
• 1.3.1.2 膠原變性16
• 1.3.2 復(fù)性16
• 1.3.2.1 蛋白質(zhì)復(fù)性16
• 1.3.2.2 膠原復(fù)性16
• 1.3.3 其它生化特性16-17
• 1.3.4 膠原的鑒定17-19
• 1.4 膠原的應(yīng)用19-23
• 1.4.1 在藥物釋放中的應(yīng)用19-20
• 1.4.1.1 作為藥物和基因輸送系統(tǒng)19-20
• 1.4.1.2 作為可鈣化基質(zhì)系統(tǒng)20
• 1.4.2 在組織工程中的應(yīng)用20-22
• 1.4.2.1 作為組織培養(yǎng)系統(tǒng)的支架20-21
• 1.4.2.2 活性人工皮膚21
• 1.4.2.3 骨骼替代物21-22
• 1.4.2.4 膠原海綿22
• 1.4.3 其它方面的應(yīng)用22-23
• 1.5 本論文的研究意義及主要內(nèi)容23-24
• 參考文獻(xiàn)24-27
• 第二章 I型膠原蛋白的提取27-42
• 2.1 引言27-28
• 2.2 實(shí)驗(yàn)原理28-29
• 2.3 實(shí)驗(yàn)材料與方法29-34
• 2.3.1 試劑與儀器29-30
• 2.3.2 實(shí)驗(yàn)材料選擇30-31
• 2.3.3 實(shí)驗(yàn)步驟31-32
• 2.3.4 結(jié)果表征32-34
• 2.3.4.1 SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳32-33
• 2.3.4.2 考馬斯亮藍(lán)染色法測(cè)定蛋白質(zhì)含量33-34
• 2.4 結(jié)果與討論34-40
• 2.4.1 前處理溶液的選擇34
• 2.4.2 SDS-PAGE分析34-36
• 2.4.3 紫外分析36-37
• 2.4.4 膠原濃度的測(cè)定37-40
• 2.5 本章小結(jié)40-41
• 參考文獻(xiàn)41-42
• 第三章 膠原海綿的制備和特性分析42-55
• 3.1 引言42-43
• 3.2 實(shí)驗(yàn)原理43-44
• 3.2.1 真空冷凍干燥43
• 3.2.2 膠原交聯(lián)43-44
• 3.3 實(shí)驗(yàn)材料與方法44-45
• 3.3.1 試劑與儀器44
• 3.3.2 實(shí)驗(yàn)步驟44-45
• 3.4 結(jié)果與討論45-53
• 3.4.1 蒸餾水透析45
• 3.4.2 凍干膠原海綿45-47
• 3.4.3 膠原海綿物理性能測(cè)試47-51
• 3.4.4 紫外照射交聯(lián)膠原海綿51-53
• 3.5 本章小結(jié)53-54
• 參考文獻(xiàn)54-55
• 第四章 膠原水凝膠膜的制備及表征55-70
• 4.1 引言55-57
• 4.1.1 電紡絲原理56-57
• 4.1.2 影響參數(shù)57
• 4.2 實(shí)驗(yàn)原理57-59
• 4.2.1 膠原透析57-58
• 4.2.2 膠原凝膠的形成58-59
• 4.2.3 AFM原理59
• 4.3 實(shí)驗(yàn)材料與方法59-60
• 4.3.1 試劑與儀器59
• 4.3.2 實(shí)驗(yàn)步驟59-60
• 4.4 結(jié)果與討論60-68
• 4.4.1 透析60-61
• 4.4.2 透析膠原成膜61-62
• 4.4.3 膠原水凝膠膜厚度測(cè)定62-63
• 4.4.4 SEM表征63-65
• 4.4.5 AFM表征65-68
• 4.5 本章小結(jié)68-69
• 參考文獻(xiàn)69-70
• 第五章 總結(jié)和展望70-72
• 5.1 本論文的工作總結(jié)70-71
• 5.2 展望71-72
• 附錄72-73
• 致謝73

【引證文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 劉志娟;張朝輝;趙雪;李八方;;單環(huán)刺嚑體壁膠原蛋白的提取及其理化性質(zhì)[J];食品科學(xué);2012年07期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 劉寒;利用黑線鱈和狹鱈加工副產(chǎn)品制備膠原的表征及其功能評(píng)價(jià)[D];中國海洋大學(xué);2011年

2 許媛媛;膠原海綿的改性及其作為活性因子載體的研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2008年

3 劉志娟;單環(huán)刺嚑體壁膠原蛋白結(jié)構(gòu)和性質(zhì)的研究[D];中國海洋大學(xué);2012年

4 詹永獻(xiàn);草魚魚鰾膠原蛋白理化性質(zhì)及結(jié)構(gòu)特點(diǎn)的研究[D];河南科技大學(xué);2012年

5 陳麗麗;洶魚皮中膠原蛋白的提取、性質(zhì)及其應(yīng)用研究[D];江西科技師范大學(xué);2012年

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本文編號(hào)：357859