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環(huán)糊精聚合物結(jié)合核酸探針檢測(cè)小分子和DNA的研究

發(fā)布時(shí)間:2017-05-11 09:00

  本文關(guān)鍵詞:環(huán)糊精聚合物結(jié)合核酸探針檢測(cè)小分子和DNA的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:環(huán)糊精聚合物由于具有協(xié)同效應(yīng)、交聯(lián)劑效應(yīng)、鄰基效應(yīng)及多價(jià)結(jié)合效應(yīng),表現(xiàn)出比環(huán)糊精單體更強(qiáng)的客體分子識(shí)別能力。將環(huán)糊精聚合物應(yīng)用于分析檢測(cè),可望增強(qiáng)檢測(cè)信號(hào),提高檢測(cè)靈敏度。基于環(huán)糊精聚合物的熒光增強(qiáng)效應(yīng),本論文發(fā)展了基于環(huán)糊精聚合物和核酸探針的復(fù)合熒光探針,,包括以下三部分內(nèi)容: 1.制備了四種環(huán)糊精聚合物,包括線型β-環(huán)糊精聚合物(L-β-CDP)、線型γ-環(huán)糊精聚合物(L-γ-CDP)、吊鈴狀β-環(huán)糊精聚合物(P-β-CDP)、吊鈴狀γ-環(huán)糊精聚合物(P-γ-CDP),這些環(huán)糊精聚合物能夠與雙標(biāo)芘DNA鏈(dPy-DNA)形成復(fù)合物探針�?疾炝诉@些探針用于金剛烷胺檢測(cè)的可行性,結(jié)果表明,四種復(fù)合物探針中,P-γ-CDP/dPy-DNA復(fù)合物探針對(duì)金剛烷胺的檢測(cè)靈敏度最高,可用于金剛烷胺的定量檢測(cè)。該方法檢測(cè)下限為0.1mmol/L,同時(shí)表現(xiàn)出良好的特異性。 2.基于膽固醇和雙標(biāo)芘DNA鏈與吊鈴狀β-環(huán)糊精聚合物的競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合作用,以及環(huán)糊精聚合物的熒光增強(qiáng)效應(yīng),發(fā)展了一種檢測(cè)膽固醇的熒光開(kāi)關(guān)探針。雙標(biāo)芘DNA鏈與吊鈴狀β-環(huán)糊精聚合物形成復(fù)合物探針,熒光得到顯著增強(qiáng);當(dāng)膽固醇存在時(shí),膽固醇與環(huán)糊精聚合物競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合,雙標(biāo)芘DNA鏈被釋放出來(lái),使得復(fù)合物探針的熒光被部分猝滅,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)膽固醇的高靈敏檢測(cè)。該方法檢測(cè)下限為0.1μmol/L,特異性好。 3.基于線型β-環(huán)糊精聚合物的熒光增強(qiáng)效應(yīng)發(fā)展了一種DNA檢測(cè)的新方法。線型β-環(huán)糊精聚合物能夠與雙標(biāo)芘DNA鏈形成復(fù)合物探針,熒光得到顯著增強(qiáng);當(dāng)體系中存在目標(biāo)鏈時(shí),目標(biāo)鏈與雙標(biāo)芘DNA鏈競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合,破壞復(fù)合物探針,使得復(fù)合物探針的熒光被部分猝滅,熒光強(qiáng)度降低�;谶@一機(jī)理,實(shí)現(xiàn)了腫瘤相關(guān)基因p53DNA的定量檢測(cè)。該工作為環(huán)糊精聚合物在檢測(cè)DNA方面的應(yīng)用提供了新的思路。
【關(guān)鍵詞】:環(huán)糊精聚合物 核酸探針 膽固醇 金剛烷胺 p53DNA
【學(xué)位授予單位】:湖南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類(lèi)號(hào)】:R318;R3411
【目錄】:
  • 摘要5-6
  • Abstract6-11
  • 本文所用英文縮略詞表11-12
  • 第1章 緒論12-23
  • 1.1 環(huán)糊精及環(huán)糊精聚合物的概念12-14
  • 1.2 環(huán)糊精聚合物的制備14-15
  • 1.2.1 線型環(huán)糊精聚合物的制備14
  • 1.2.2 吊鈴狀環(huán)糊精聚合物的制備14
  • 1.2.3 項(xiàng)鏈狀環(huán)糊精聚合物的制備14-15
  • 1.3 環(huán)糊精聚合物的性能15-16
  • 1.3.1 協(xié)同效應(yīng)15
  • 1.3.2 鄰基效應(yīng)15
  • 1.3.3 交聯(lián)劑效應(yīng)15-16
  • 1.3.4 多價(jià)結(jié)合效應(yīng)16
  • 1.4 環(huán)糊精聚合物在生物醫(yī)學(xué)方面的應(yīng)用16-22
  • 1.4.1 環(huán)糊精聚合物在分析檢測(cè)方面的應(yīng)用16-20
  • 1.4.2 環(huán)糊精聚合物在分離純化方面的應(yīng)用20
  • 1.4.3 環(huán)糊精聚合物在基因載體方面的應(yīng)用20-21
  • 1.4.4 環(huán)糊精聚合物在藥物運(yùn)輸方面的應(yīng)用21-22
  • 1.5 本論文擬開(kāi)展的工作22-23
  • 第2章 基于環(huán)糊精聚合物的金剛烷胺檢測(cè)研究23-37
  • 2.1 前言23
  • 2.2 實(shí)驗(yàn)部分23-29
  • 2.2.1 試劑和儀器23-26
  • 2.2.2 線型環(huán)糊精聚合物的合成26
  • 2.2.3 吊鈴狀環(huán)糊精聚合物的合成26-27
  • 2.2.4 環(huán)糊精聚合物的表征27-28
  • 2.2.5 環(huán)糊精聚合物熒光增強(qiáng)效應(yīng)的考察28
  • 2.2.6 復(fù)合物探針檢測(cè)金剛烷胺可行性的考察28
  • 2.2.7 金剛烷胺檢測(cè)靈敏度與特異性的考察28-29
  • 2.3 結(jié)果與討論29-36
  • 2.3.1 金剛烷胺檢測(cè)原理29-30
  • 2.3.2 環(huán)糊精聚合物的合成30-31
  • 2.3.3 環(huán)糊精聚合物的表征31-32
  • 2.3.4 環(huán)糊精聚合物熒光增強(qiáng)效應(yīng)的考察32-33
  • 2.3.5 復(fù)合物探針檢測(cè)金剛烷胺可行性的考察33-34
  • 2.3.6 金剛烷胺的檢測(cè)34-35
  • 2.3.7 特異性考察35-36
  • 2.4 小結(jié)36-37
  • 第3章 基于吊鈴狀環(huán)糊精聚合物的熒光增強(qiáng)效應(yīng)檢測(cè)膽固醇37-49
  • 3.1 前言37-38
  • 3.2 實(shí)驗(yàn)部分38-40
  • 3.2.1 試劑和儀器38-39
  • 3.2.2 復(fù)合物探針檢測(cè)膽固醇可行性的考察39-40
  • 3.2.3 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化40
  • 3.2.4 膽固醇的定量檢測(cè)40
  • 3.2.5 特異性考察40
  • 3.3 結(jié)果與討論40-48
  • 3.3.1 膽固醇檢測(cè)原理40-41
  • 3.3.2 復(fù)合物探針用于檢測(cè)膽固醇可行性的考察41-44
  • 3.3.3 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化44-47
  • 3.3.4 膽固醇的定量檢測(cè)47
  • 3.3.5 特異性考察47-48
  • 3.4 小結(jié)48-49
  • 第4章 基于線型環(huán)糊精聚合物的熒光增強(qiáng)效應(yīng)檢測(cè) p53 DNA49-57
  • 4.1 前言49
  • 4.2 實(shí)驗(yàn)部分49-51
  • 4.2.1 試劑和儀器49-50
  • 4.2.2 DNA 檢測(cè)可行性的考察50
  • 4.2.3 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化50-51
  • 4.2.4 不同長(zhǎng)度 cDNA 對(duì)復(fù)合物影響51
  • 4.2.5 DNA 檢測(cè)及特異性考察51
  • 4.3 結(jié)果與討論51-55
  • 4.3.1 DNA 檢測(cè)原理51-52
  • 4.3.2 DNA 檢測(cè)的可行性52-53
  • 4.3.3 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化53-54
  • 4.3.4 不同長(zhǎng)度 cDNA 對(duì)復(fù)合物影響54-55
  • 4.3.5 DNA 檢測(cè)55
  • 4.4 小結(jié)55-57
  • 結(jié)論57-58
  • 參考文獻(xiàn)58-68
  • 致謝68

【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞:環(huán)糊精聚合物結(jié)合核酸探針檢測(cè)小分子和DNA的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):356887

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