本文關(guān)鍵詞：制備兔頸總動脈脫細(xì)胞基質(zhì)的方法研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景：心血管類疾病嚴(yán)重危害人類身體健康,血管重建在臨床上具有十分重要的地位,尋找合適的血管移植物逐漸成為人們關(guān)注的重要課題。目前臨床上用于血管支架的生物材料包括天然血管、脫細(xì)胞基質(zhì)、人工替代物等。組織工程和再生醫(yī)學(xué)迅猛發(fā)展,目前全生物化的異種血管移植已成為熱點(diǎn)研究內(nèi)容。已開發(fā)的材料在大中口徑血管替代物方面取得較好的效果,但小口徑血管(直徑小于6mm)的通暢率較低,替代人小動脈的人工血管移植由于內(nèi)膜增厚、易形成血栓等原因一直未獲得滿意的效果。臨床上急需尋求不易形成血栓的小口徑血管替代物。 本實(shí)驗(yàn)采用多種去除細(xì)胞的方法組合,來制備兔頸總動脈脫細(xì)胞血管支架,并對不同方案制備的脫細(xì)胞支架進(jìn)行評價(jià),目的是希望得到制備兔頸總動脈脫細(xì)胞血管支架的優(yōu)化方案。 方法：聯(lián)合采用物理處理法、化學(xué)處理法和酶學(xué)處理法去除細(xì)胞,制備兔頸總動脈脫細(xì)胞血管支架,應(yīng)用組織染色、電子顯微鏡、細(xì)胞毒性評價(jià)以及皮下包埋等方法觀察組織工程血管的管壁構(gòu)建組織學(xué)、脫細(xì)胞支架的細(xì)胞毒性以及免疫原性。 結(jié)果：我們組合出三種制備脫細(xì)胞血管支架的方案,均能夠?qū)⑼妙i總動脈脫細(xì)胞完全,無殘存細(xì)胞及細(xì)胞殘片,細(xì)胞外基質(zhì)保存完好,血管支架三維結(jié)構(gòu)保存完好,脫細(xì)胞前后的生物力學(xué)性能無明顯改變,脫細(xì)胞的支架具有低細(xì)胞毒性和免疫原性。 結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)探尋的幾種脫細(xì)胞方法所制備的組織工程血管能夠比較完全地去除掉血管壁上的細(xì)胞,并且能夠較完整地保存細(xì)胞外基質(zhì)成分,為組織工程方法制備具有分層結(jié)構(gòu)的組織工程血管的提供參考。
【關(guān)鍵詞】：組織工程 血管支架 細(xì)胞外基質(zhì)
【學(xué)位授予單位】：廈門大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R318.08
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-7
• 目錄7-13
• 第一章 緒論13-29
• 1.1 組織工程學(xué)(Tissue engineering)的建立和發(fā)展13-14
• 1.2 血管組織工程的建立14-28
• 1.2.1 血管移植進(jìn)展15-17
• 1.2.2 血管結(jié)構(gòu)17-18
• 1.2.3 血管組織工程的種子細(xì)胞18-21
• 1.2.3.1 自體血管壁細(xì)胞18-20
• 1.2.3.2 干細(xì)胞20-21
• 1.2.4 細(xì)胞外基質(zhì)21-23
• 1.2.5 血管支架材料23-26
• 1.2.5.1 天然生物支架材料24
• 1.2.5.2 高分子支架材料24-25
• 1.2.5.2.1 PLA和PGA24-25
• 1.2.5.2.2 PCL25
• 1.2.5.3 脫細(xì)胞的材料25-26
• 1.2.6 信號——合適的生物化學(xué)或者生物力學(xué)信號26-27
• 1.2.6.1 生化組織重建——異物反應(yīng)和傷口愈合26
• 1.2.6.2 蛋白吸附26
• 1.2.6.3 巨噬細(xì)胞粘附26-27
• 1.2.6.4 異物巨噬細(xì)胞形成27
• 1.2.7 ECM重建27
• 1.2.8 組織工程血管重建27-28
• 1.3 立題依據(jù)28-29
• 第二章 材料與方法29-39
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料29-32
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動物29
• 2.1.2 主要試劑29-30
• 2.1.3 主要儀器30-32
• 2.1.4 細(xì)胞株32
• 2.2 研究方法32-39
• 2.2.0 標(biāo)本采集32
• 2.2.1 脫細(xì)胞血管制備32-33
• 2.2.2 包埋33-34
• 2.2.3 石蠟切片34
• 2.2.4 H&E染色34-35
• 2.2.5 Masson三色染色35
• 2.2.6 天狼星紅(Sirius Red)染色35-36
• 2.2.7 DAPI細(xì)胞核熒光染色36
• 2.2.8 掃描電鏡樣品制備36
• 2.2.9 縫線耐受力測試36-37
• 2.2.10 爆破壓力測試37
• 2.2.11 細(xì)胞毒性檢測37-38
• 2.2.12 血管皮下包埋手術(shù)步驟38
• 2.2.13 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法38-39
• 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果39-52
• 3.1 血管外觀39-40
• 3.2 通過HE和DAPI染色比較不同消化方案處理后細(xì)胞成分的存留40-42
• 3.3 幾套方案所保留的細(xì)胞外基質(zhì)成分比較42-44
• 3.4 掃描電鏡觀察44-46
• 3.5 機(jī)械性能測試46-47
• 3.6 細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)47-49
• 3.7 生物相容性實(shí)驗(yàn)49-52
• 第四章 討論52-59
• 4.1 血管材料的選擇52-54
• 4.1.1 人工合成材料52-53
• 4.1.2 天然生物材料53-54
• 4.2 脫細(xì)胞血管基質(zhì)的制備方法54-56
• 4.3 本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果分析56-59
• 參考文獻(xiàn)59-67
• 致謝67

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 張燕搏;姜明;王強(qiáng);唐秀杰;楊秀濱;胡平;吳清玉;;組織工程血管材料體外細(xì)胞毒性評價(jià)實(shí)驗(yàn)研究[J];中華實(shí)用診斷與治療雜志;2011年06期

2 ;Tissue engineering of blood vessels with endothelial cells differentiated from mouse embryonic stem cells[J];Cell Research;2003年05期

  本文關(guān)鍵詞：制備兔頸總動脈脫細(xì)胞基質(zhì)的方法研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：354851