目的:探討人羊膜間充質(zhì)干細胞（human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSCs）在RADA和RGD短肽水凝膠中的生長狀況、增殖能力、細胞周期、干性基因表達及分化,研究水凝膠聯(lián)合hAMSCs對小鼠全皮層缺損創(chuàng)面的修復效應和機制。方法:1.對RADA和RGD水凝膠分別采用透射電鏡觀察短肽水凝膠微觀結(jié)構(gòu)、圓二色光譜和流變學分析行表征檢測;2.采用兩酶分步消化法分離hAMSCs,并行貼壁培養(yǎng)、純化細胞至P3代建立hAMSCs與RADA和RGD水凝膠細胞支架復合體以及二維對照組模型,觀察各組細胞形態(tài);采用Live/Dead檢測hAMSCs在支架中的存活情況;CCK-8檢測hAMSCs在水凝膠支架中的生長增殖情況;流式細胞術(shù)檢測各組細胞周期情況;采用qPCR對比分析hAMSCs于水凝膠及2D環(huán)境中培養(yǎng)第4天時干性、生長因子、炎性因子和成骨分化基因的mRNA表達水平。3.將C57小鼠（N=120）隨機分為六組:無血清培養(yǎng)基（對照）組,RADA水凝膠組,RGD水凝膠組,hAMSCs移植組,RADA+hAMSCs移植組和RGD+hAMSCs移植組。造模后第4,8,... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學貴州省

【文章頁數(shù)】：99 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

%的RADA和RGD水凝膠成膠圖

圖 1.2 自組裝短肽溶液的透射電鏡圖（×200000）Fig 1.2 TEM images of 0.05% of self-assembling peptide in aqueous solution.（A）RADA;(B)RGD.Scale bar:100nm.2.3 圓二色譜圖圓二色譜可用于檢測蛋白和短肽材料的空間結(jié)構(gòu)信息，RADA 和 RGD 溶液在218nm 處有負峰，在 197nm 處有一個正峰，說明這兩種短肽的二級結(jié)構(gòu)為β折疊，其中 RADA 中的β折疊結(jié)構(gòu)比 RGD 更多。

圖 1.2 自組裝短肽溶液的透射電鏡圖（×200000）1.2 TEM images of 0.05% of self-assembling peptide in aqueous so（A）RADA;(B)RGD.Scale bar:100nm.圖可用于檢測蛋白和短肽材料的空間結(jié)構(gòu)信息，RADA 和峰，在 197nm 處有一個正峰，說明這兩種短肽的二級結(jié)的β折疊結(jié)構(gòu)比 RGD 更多。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]β折疊型自組裝短肽水凝膠特性及在神經(jīng)組織工程中的應用前景[J]. 衛(wèi)巍,劉燕飛,何洋,張玲.  中國組織工程研究. 2018(10)
[2]短肽RADA16-1自組裝纖維長度與止血關(guān)系研究[J]. 李佳楠,鐘小忠,王婷.  江漢大學學報(自然科學版). 2013(05)
[3]再生胰腺提取物誘導人羊膜間充質(zhì)干細胞定向分化為胰島素分泌細胞[J]. 張艷梅,王佃亮,曾虹燕,王烈明,孫晉偉,張珍,東莎莎.  生物工程學報. 2012(02)



本文編號：3527532