背景:聚左旋乳酸（PLLA）支架材料在生物材料領(lǐng)域中尤其是組織工程學(xué)中應(yīng)用廣泛,但親水性較低、缺乏表面細(xì)胞結(jié)合位點和細(xì)胞黏附性較差等缺點制約著其進一步應(yīng)用。目的:體外實驗觀察小鼠神經(jīng)干細(xì)胞與多壁碳納米管/聚左旋乳酸（MWCNTs/PLLA）納米纖維支架材料復(fù)合培養(yǎng)的生長狀況并檢測其生物相容性。方法:分離培養(yǎng)小鼠神經(jīng)干細(xì)胞,靜電紡絲法制備PLLA納米纖維支架材料并用MWCNTs修飾;取第3代神經(jīng)干細(xì)胞分別接種于PLLA與MWCNTs/PLLA納米纖維支架材料上,進行體外培養(yǎng)。結(jié)果與結(jié)論:1神經(jīng)干細(xì)胞在PLLA及MWCNTs/PLLA支架材料中生存良好,材料無明顯毒性;2神經(jīng)干細(xì)胞在MWCNTs/PLLA材料上表現(xiàn)出比PLLA支架材料更加優(yōu)異的細(xì)胞黏附能力及增殖能力;3掃描電鏡及Hoechst 33342染色顯示神經(jīng)干細(xì)胞在材料表面生長良好,形態(tài)正常;4免疫熒光MAP2染色顯示神經(jīng)干細(xì)胞在MWCNTs/PLLA支架材料上生長并分化為成熟神經(jīng)元,且神經(jīng)元突起生長方向與納米纖維支架方向一致;5結(jié)果表明,MWCNTs/PLLA納米纖維支架材料的細(xì)胞相容性良好,能為神經(jīng)干細(xì)胞提供良好的生長載體且有... 

【文章來源】：中國組織工程研究. 2017,21(06)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

小鼠神經(jīng)干細(xì)胞的鑒定(×100)

s圖注：圖中A(×6000)為掃描電鏡下靜電紡絲PLLA納米纖維支架；B(×6000)和C(×20000)為MWCNTs/PLLA納米纖維支架，MWCNTs/PLLA材料粗糙度更高，更有利于細(xì)胞的黏附；D(×3000)和E(×2000)分別為神經(jīng)干細(xì)胞復(fù)合MWCNTs/PLLA材料培養(yǎng)2d及7d，細(xì)胞沿著納米纖維材料方向分化生長；F(×100)為MWCNTs/PLLA材料Hoechst染色，顯示細(xì)胞形態(tài)正常，未見明顯的凋亡和壞死。PLLA：聚左旋乳酸；MWCNTs/PLLA：多壁碳納米管/聚左旋乳酸。2.52.01.51.00.50MWNTC/PLsAL與LAP值比GAPDHTUJ1MAP2GFAPaaa圖6神經(jīng)干細(xì)胞復(fù)合MWCNTs/PLLA支架材料培養(yǎng)(×100)Figure6Neuralstemcellsculturedonmulti-walledcarbonnanotubes/poly(L-lacticacid)nanofiberscaffolds(×100)圖注：圖中A-C為神經(jīng)干細(xì)胞復(fù)合MWCNT/PLLA支架材料分化培養(yǎng)14d，神經(jīng)元標(biāo)志物MAP2染色顯示神經(jīng)干細(xì)胞分化為成熟神經(jīng)元，且神經(jīng)元突起生長方向與納米材料纖維方向一致；D為熒光定量PCR檢測神經(jīng)元及膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物TUJ1、MAP2與GFAP表達，發(fā)現(xiàn)相對于PLLA支架材料，在MWCNTs/PLLA材料中神經(jīng)干細(xì)胞的分化程度更高，差異有顯著性意義(aP<0.05)。2.01.61.20.80.40PLLAMWCNTs/PLLA光度值吸1d3d5d7d9daaaa圖4神經(jīng)干細(xì)胞在PLLA和MWCNTs/PLLA支架材料上的增殖能力Figure4Theproliferationofneuralstemcellsonpoly(L-lacticacid)andmulti-walledcarbonnanotubes/poly(L-lacticacid)nanofiberscaffolds圖注：隨著時間的增加，兩組材料的吸光度值均增加。在第3，5，7，9天時，MWCNTs/PLLA組的吸光度值均高于PLLA組，差異有顯著性意義(aP<0.05)。PLLA：聚左旋乳酸；MWCNTs/PLLA：多壁碳納米管/聚左旋乳酸。圖注：圖中A為小鼠神經(jīng)干細(xì)胞懸浮?

林成楷，等.多壁碳納米管/聚左旋乳酸復(fù)合納米纖維支架材料與小鼠神經(jīng)干細(xì)胞的生物相容性ISSN2095-4344CN21-1581/RCODEN:ZLKHAH943www.CRTER.orgABC圖1小鼠神經(jīng)干細(xì)胞的鑒定(×100)Figure1Identificationofmouseneuralstemcells(×100)PLLAMWCNTs/PLLA100806040200胞黏附細(xì)率%)(4h8h12haaa圖3神經(jīng)干細(xì)胞復(fù)合PLLA和MWCNTs/PLLA支架材料培養(yǎng)4，8，12h后的細(xì)胞黏附率Figure3Adhesionratesofneuralstemcellsafterincubationwithpoly(L-lacticacid)andmulti-walledcarbonnanotubes/poly(L-lacticacid)nanofiberscaffoldsfor4,8and12hours圖注：隨著時間的增加，神經(jīng)干細(xì)胞在2種材料上的黏附率呈增長趨勢。在不同時間點，MWCNTs/PLLA組的細(xì)胞黏附率均明顯高于PLLA組，差異有顯著性意義(aP<0.05)。PLLA：聚左旋乳酸；MWCNTs/PLLA：多壁碳納米管/聚左旋乳酸。D圖5支架材料和神經(jīng)干細(xì)胞復(fù)合支架材料的形態(tài)學(xué)觀察Figure5Morphologicalobservationofscaffoldsandneuralstemcellsonscaffolds圖注：圖中A(×6000)為掃描電鏡下靜電紡絲PLLA納米纖維支架；B(×6000)和C(×20000)為MWCNTs/PLLA納米纖維支架，MWCNTs/PLLA材料粗糙度更高，更有利于細(xì)胞的黏附；D(×3000)和E(×2000)分別為神經(jīng)干細(xì)胞復(fù)合MWCNTs/PLLA材料培養(yǎng)2d及7d，細(xì)胞沿著納米纖維材料方向分化生長；F(×100)為MWCNTs/PLLA材料Hoechst染色，顯示細(xì)胞形態(tài)正常，未見明顯的凋亡和壞死。PLLA：聚左旋乳酸；MWCNTs/PLLA：多壁碳納米管/聚左旋乳酸。2.52.01.51.00.50MWNTC/PLsAL與LAP值比GAPDHTUJ1MAP2GFAPaaa圖6神經(jīng)干細(xì)胞復(fù)合MWCNTs/PLLA支架材料培養(yǎng)(×100)Figure6Neuralstemcellsculturedonmulti-walledc

【參考文獻】：
期刊論文
[1]組織工程支架在犬急性脊髓損傷修復(fù)中應(yīng)用的初步研究[J]. 倪石磊,齊宏旭,鮑圣德,胡平,王波,張家涌,李良,張揚.  中國微侵襲神經(jīng)外科雜志. 2005(09)



本文編號：3520233