目的:超臨界大面積或大段骨缺損仍舊是臨床面臨的治療難題。由于自體骨移植和異體骨移植所存在的局限性^[1],學(xué)者們致力于研發(fā)人工骨材料,但為了解決人工骨材料成骨效應(yīng)不良的問題,人們關(guān)注到了物理治療方法與人工骨材料聯(lián)合治療的新方案。低強度脈沖超聲波（low-intensity pulsed ultrasound stimulation,LIPUS）是近年來比較被認可的促進骨愈合修復(fù)的一種物理治療方法。由于LIPUS在骨愈合方面的促進作用,及其對三維多孔材料內(nèi)物質(zhì)交換的促進作用。近年來,研究的主要目的是將LIPUS作為輔助手段與人工骨材料聯(lián)合,應(yīng)用于骨缺損修復(fù)的研究,為大面積骨缺損的修復(fù)提供一個新的思路。而LIPUS對于三維多孔材料內(nèi)成骨效應(yīng)影響的適宜參數(shù)（包括強度、頻率、時間等）的研究罕有報道。有研究證實LIPUS對成骨細胞影響的調(diào)控機制是通過調(diào)節(jié)整合素α5β1/PI3K/Akt通路,ROCK-Cot/Tpl2-MEK信號通路,m-TOR通路發(fā)揮作用。以上機制的研究均基于二維平面模型上,而基于二維平面闡述的機制不能完全用于解釋三維多孔材料上的實驗結(jié)果。所以探索LIPUS... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：103 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

體外細胞實驗多孔Ti64材料

aterialise/Magics 軟件生成所加工材料的模型，利用瑞典 Arcam 型電子束逐層金屬快速成形系統(tǒng)三維打印制備多孔鈦合金，該材料的壓縮強度高于 150MP勞強度高于 50MPa，彈性模量低于 20GPa。多孔鈦合金（Ti-6Al-4V, 簡稱 Ti64）材料為直徑 10mm，高度 3mm 的圓柱徑 400-500μm，孔隙率為 65%~70%（實驗材料由中國科學(xué)院金屬研究所提供圖 1.1，圖 1.2。圖 1.1 體外細胞實驗多孔 Ti64 材料

將超聲探頭和培養(yǎng)皿放于水中，探頭與培養(yǎng)板底部保持 5cm 的距離進行加載（圖1.3），加載后繼續(xù)培養(yǎng)細胞 24h。圖1.3 體外細胞實驗超聲加載裝置圖2.2.4 細胞黏附實驗每個材料上接種細胞數(shù)量 2×104個，超聲加載 3d 后檢測，磷酸鹽緩沖液（phosphate buffer solution, PBS） 沖洗 3 次，加入 2.5% 的戊二醛，于 4℃ 條件固定 24h, PBS 沖洗 2 次，隨后依次進行乙醇梯度脫水，（50%，60%，70%


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