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納米四氧化三鐵與HeLa細(xì)胞生物相容性的研究

發(fā)布時(shí)間:2017-05-07 19:08

  本文關(guān)鍵詞:納米四氧化三鐵與HeLa細(xì)胞生物相容性的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】: 隨著納米技術(shù)的迅速發(fā)展,納米技術(shù)已應(yīng)用到我們生活中的各個(gè)領(lǐng)域——工業(yè)、食品、醫(yī)療等。其中磁性納米材料作為納米技術(shù)的一個(gè)重要組成部分,由于其本身帶有磁性,在外加局部磁場(chǎng)的條件下,可以準(zhǔn)確的到達(dá)靶部位,故有非常廣闊的應(yīng)用前景,例如構(gòu)建靶向載藥系統(tǒng)、用于靶向基因治療、惡性腫瘤的熱療、磁共振的圖像增強(qiáng)劑等等。由于納米四氧化三鐵是其中使用價(jià)值最高、應(yīng)用最廣泛的一種材料,我們有必要對(duì)其在體內(nèi)使用的安全性及安全使用劑量進(jìn)行深入探討。 我們對(duì)納米四氧化三鐵的生物安全性從兩個(gè)方面進(jìn)行研究——氧化損傷和遺傳毒性。 許多研究已經(jīng)證明,機(jī)體的正常代謝可以產(chǎn)生活性氧自由基,它有很強(qiáng)的氧化性,是機(jī)體產(chǎn)生疾病和衰老的關(guān)鍵之一。由線粒體產(chǎn)生的活性氧自由基可以通過體內(nèi)的其他機(jī)制被清除,比如還原型的谷胱甘肽,超氧化物歧化酶等。所以我們選擇測(cè)定細(xì)胞內(nèi)的活性氧、還原型谷胱甘肽、超氧化物歧化酶和丙二醛作為評(píng)價(jià)氧化損傷程度的生物標(biāo)志物。在生物體內(nèi),活性氧自由基作用于脂質(zhì)發(fā)生過氧化反應(yīng),氧化的終產(chǎn)物為丙二醛。丙二醛會(huì)引起蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子的聚合與交聯(lián),具有一定的程度的細(xì)胞毒性。此時(shí)通過檢測(cè)體內(nèi)丙二醛的水平即可得出脂質(zhì)氧化的水平,因此丙二醛是評(píng)價(jià)脂質(zhì)氧化水平的常用指標(biāo)。 現(xiàn)已發(fā)現(xiàn),氧自由基對(duì)細(xì)胞的氧化損傷會(huì)引起DNA鏈斷裂,還會(huì)引起DNA鏈交聯(lián),包括DNA-DNA交聯(lián)和DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)。DNA損傷會(huì)影響細(xì)胞的功能和DNA的自我修復(fù),這會(huì)增加人類疾病尤其是癌癥的發(fā)病率。所以我們選擇測(cè)定細(xì)胞內(nèi)DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)系數(shù)和彗星實(shí)驗(yàn)來評(píng)價(jià)DNA損傷及其遺傳毒性。 除此之外,在使用各項(xiàng)生物學(xué)標(biāo)志物評(píng)價(jià)之前,先用MTT法檢測(cè)細(xì)胞活力,在此基礎(chǔ)上的安全性評(píng)價(jià)才更有意義。 從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出,低劑量的使用并不會(huì)造成明顯的細(xì)胞損傷及遺傳毒性。當(dāng)納米Fe304懸液的濃度在100μg/ml以內(nèi),所檢測(cè)的7種生物學(xué)安全性評(píng)價(jià)指標(biāo)均沒有出現(xiàn)差異顯著性,這說明該材料在未來被運(yùn)用于人體是可行的。但是體外實(shí)驗(yàn)有其局限性:一,不能準(zhǔn)確模擬人體環(huán)境,取得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果會(huì)有一定的偏差;二,只能得到使用劑量的數(shù)據(jù),無法得知該材料在人體的代謝過程以及排出方式,也無法估計(jì)其對(duì)人體是否會(huì)產(chǎn)生副作用;三,體外實(shí)驗(yàn)中使用的安全劑量在未來的動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中很難找出適當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)換方式,所以還需通過動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)摸索更為合適的使用劑量。
【關(guān)鍵詞】:納米四氧化三鐵 活性氧 谷胱甘肽 丙二醛 超氧化物歧化酶 DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián) DNA斷裂 MTT法
【學(xué)位授予單位】:華中師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2010
【分類號(hào)】:R318.08
【目錄】:
  • 中文摘要4-6
  • Abstract6-11
  • 一.文獻(xiàn)綜述11-22
  • 1.納米材料11
  • 2.納米材料的特性11-12
  • 2.1 納米材料的表面效應(yīng)11
  • 2.2 納米材料的體積效應(yīng)11-12
  • 2.3 納米材料的量子尺寸效應(yīng)12
  • 3 納米材料在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用12-14
  • 3.1 納米技術(shù)在疾病診斷中的應(yīng)用12-13
  • 3.2 納米技術(shù)在疾病治療中的應(yīng)用13-14
  • 4 納米材料在其他領(lǐng)域的應(yīng)用14-15
  • 4.1 納米技術(shù)在陶瓷領(lǐng)域的應(yīng)用14
  • 4.2 納米技術(shù)在微電子學(xué)的應(yīng)用14
  • 4.3 納米技術(shù)在光電領(lǐng)域的應(yīng)用14
  • 4.4 納米技術(shù)在化工領(lǐng)域的應(yīng)用14-15
  • 5 磁性納米材料在生物醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用15-17
  • 5.1 磁性納米顆粒15
  • 5.2 靶向載藥系統(tǒng)15-16
  • 5.3 靶向基因治療16
  • 5.4 惡性腫瘤的熱療16-17
  • 5.5 磁共振的圖像增強(qiáng)劑17
  • 6 納米材料的毒性效應(yīng)17-19
  • 6.1 毒性效應(yīng)17-18
  • 6.2 納米顆粒產(chǎn)生毒性效應(yīng)的機(jī)制18
  • 6.3 納米顆粒物進(jìn)入機(jī)體的途徑18-19
  • 7 安全性評(píng)價(jià)的意義19
  • 8 常用的安全性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)19-22
  • 8.1 活性氧(Reactive Oxygen Specise,ROS)19-20
  • 8.2 谷胱甘肽(Glutathione,GSH)20
  • 8.3 丙二醛(Malondialdehyde,MDA)20
  • 8.4 超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)20-21
  • 8.5 DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)(DNA-protein Crosslinks,DPC)21
  • 8.6 彗星實(shí)驗(yàn)21-22
  • 二.材料與方法22-30
  • 1 實(shí)驗(yàn)材料22-24
  • 1.1 實(shí)驗(yàn)受試細(xì)胞和納米材料22
  • 1.2 化學(xué)試劑22
  • 1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器22
  • 1.4 主要溶液22-24
  • 2 實(shí)驗(yàn)方法24-30
  • 2.1 Hela細(xì)胞暴露納米Fe_3O_4方法24
  • 2.2 細(xì)胞活力(MTT)測(cè)定方法24
  • 2.3 細(xì)胞內(nèi)ROS檢測(cè)實(shí)驗(yàn)方法24-25
  • 2.4 細(xì)胞內(nèi)GSH檢測(cè)實(shí)驗(yàn)方法25
  • 2.5 細(xì)胞內(nèi)MDA含量測(cè)定方法25-26
  • 2.6 細(xì)胞內(nèi)SOD含量測(cè)定方法26
  • 2.7 細(xì)胞內(nèi)DPC測(cè)定方法26-28
  • 2.8 彗星實(shí)驗(yàn)方法28-29
  • 2.9 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析29-30
  • 三.實(shí)驗(yàn)結(jié)果30-38
  • 1 染毒12H的HELA細(xì)胞形態(tài)觀察30-31
  • 2 細(xì)胞活力(MTT)測(cè)定實(shí)驗(yàn)31
  • 3 細(xì)胞內(nèi)ROS測(cè)定實(shí)驗(yàn)31-33
  • 4 細(xì)胞內(nèi)GSH測(cè)定實(shí)驗(yàn)33
  • 5 細(xì)胞內(nèi)MDA含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)33-34
  • 6 細(xì)胞內(nèi)SOD含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)34-35
  • 7 細(xì)胞內(nèi)DPC測(cè)定實(shí)驗(yàn)35
  • 8 彗星實(shí)驗(yàn)35-37
  • 9 結(jié)論37-38
  • 四.討論38-41
  • 1 活性氧的生物學(xué)意義38
  • 2 丙二醛與超氧化物歧化酶38
  • 3 活性氧與DNA損傷38-39
  • 4 納米FE_3O_4的生物安全性39-40
  • 5 下一步計(jì)劃40-41
  • 參考文獻(xiàn)41-44
  • 附錄:研究成果44-45
  • 致謝45-46

【引證文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 馬萍;秦龍娟;張亞然;杜娟;尤會(huì)會(huì);楊旭;;高效氯氰菊酯對(duì)小鼠肝細(xì)胞的氧化損傷[J];環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào);2012年03期

2 馬萍;丁書茂;秦龍娟;張亞然;杜娟;楊旭;;農(nóng)藥高效氯氰菊酯對(duì)小鼠腎細(xì)胞氧化損傷的研究[J];華中師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2011年04期

3 馬萍;焦銘;尤會(huì)會(huì);趙靜云;杜娟;羅清;楊旭;;農(nóng)藥毒死蜱對(duì)小鼠腦細(xì)胞氧化損傷的研究[J];環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào);2013年03期

4 馬萍;周慧芬;陳姣娥;武陽;陳紹恢;楊旭;;維生素E對(duì)氯氰菊酯致小鼠肺組織氧化損傷的拮抗[J];環(huán)境與健康雜志;2013年03期

5 馬萍;陳姣娥;甘亞平;曾強(qiáng);毛琳;楊旭;;氯氰菊酯對(duì)小鼠睪丸組織的氧化損傷和維生素E的抗氧化作用[J];環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué);2013年06期

6 馬萍;甘亞平;陳姣娥;曾強(qiáng);武陽;楊旭;;毒死蜱對(duì)雄性小鼠生殖毒性的影響[J];生態(tài)毒理學(xué)報(bào);2012年06期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 朱文君;亞慢性阿維菌素中毒對(duì)王鴿肝腎細(xì)胞凋亡及CYP450酶系影響的研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年


  本文關(guān)鍵詞:納米四氧化三鐵與HeLa細(xì)胞生物相容性的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):350420

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