目的:體外培養(yǎng)脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞（adipose-derived stem cells,ADSCs）,了解其生物學(xué)特性,探索脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞膜片的構(gòu)建方法,及其與仿生多孔磷酸三鈣（β-TCP）/Ⅰ型膠原（COL-Ⅰ）支架所構(gòu)建復(fù)合體的成骨性能評(píng)價(jià)。方法:采用貼壁法體外分離、培養(yǎng)和純化ADSCs,光學(xué)顯微鏡觀察其細(xì)胞學(xué)行為;構(gòu)建仿生多孔磷酸三鈣（β-TCP）/Ⅰ型膠原（COL-I）支架,掃描電子顯微鏡及MTT試驗(yàn)研究其物理及生物學(xué)特性;連續(xù)培養(yǎng)法獲得ADSC細(xì)胞膜片,通過HE染色、茜素紅染色檢測其組織學(xué)及成骨特性;將ADSCs細(xì)胞膜片與仿生多孔磷酸三鈣（β-TCP）/Ⅰ型膠原（COL-Ⅰ）支架復(fù)合體在成骨誘導(dǎo)基質(zhì)中培養(yǎng)（組A）作為實(shí)驗(yàn)組,將同樣數(shù)量的散在ADSCs與β-TCP/COL-Ⅰ支架（組B）及單純ADSCs膜片（組C）在成骨誘導(dǎo)基質(zhì)中培養(yǎng)作為對(duì)照組,通過堿性磷酸酶活性和骨鈣蛋白分泌量定量檢測分析比較復(fù)合物的成骨性能。結(jié)果:成功分離并體外培養(yǎng)ADSC,隨傳代逐步純化;成功構(gòu)建仿生多孔β-TCP/COL-Ⅰ支架,掃描電鏡下顯示其具有疏松多孔的三維空間結(jié)構(gòu),MTT試驗(yàn)結(jié)果顯示ADSCs與... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖３－１．倒置相差顯微鏡觀察ＡＤＳＣｓ細(xì)胞形態(tài)：Ａ．原代細(xì)胞接種后２４ｈ，細(xì)胞開始??１２??

圖３－２．掃描電鏡觀察Ｐ－ＴＣＰ／ＣＯＬ－Ｉ支架呈相互連通的多孔三維結(jié)構(gòu)（Ｘ５０）??－－

?Ｗ??圖３－２．掃描電鏡觀察Ｐ－ＴＣＰ／ＣＯＬ－Ｉ支架呈相互連通的多孔三維結(jié)構(gòu)（Ｘ５０）??３．３?Ｐ－ＴＣＰ／ＣＯＬ－Ｉ支架細(xì)胞相容性檢測??各孔內(nèi)都可觀察到有黑紫色結(jié)晶形成，各組細(xì)胞數(shù)量隨培養(yǎng)時(shí)間的延長均有所??增長，實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)上的０Ｄ值無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（ｐ＞０．０５）。結(jié)果表??明：在Ｐ－ＴＣＰ／ＣＯＬ－Ｉ支架上生長的與在普通培養(yǎng)板中生長的ＡＤＳＣ增殖速率沒有??區(qū)別，Ｐ－ＴＣＰ／ＣＯＬ－Ｉ支架無細(xì)胞毒性，細(xì)胞相容性良好。??４?－１?一??＾?Ｂｌａｎｋ?ｃｏｎｔｒｏｌ??＋?ＴＣＰ／ＣＯＬ－Ｉ?ｓｃａｆｆｏｌｄ??丨??〇?＊?＜?ｉ??ｔ?＞??、

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]液氮凍融洗滌血小板對(duì)人牙髓細(xì)胞增殖的影響[J]. 李洪濤,段建民,張宏斌,片山直.  牙體牙髓牙周病學(xué)雜志. 2010(06)
[4]杜仲誘導(dǎo)大鼠間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化中成骨與成脂相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)[J]. 張賢,蔡建平,張艷紅,譚湘陵.  中國組織工程研究與臨床康復(fù). 2010(19)
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[6]脂肪組織源性基質(zhì)細(xì)胞表達(dá)神經(jīng)元表型的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 楊立業(yè),劉相名,孫兵,惠國楨,苗宏生,栗超躍,費(fèi)儉,郭禮和.  中華神經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志. 2002(01)

碩士論文
[1]P38MAPK信號(hào)通路在骨形態(tài)發(fā)生蛋白2誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為心肌樣細(xì)胞中的作用[D]. 田龍.遼寧醫(yī)學(xué)院 2013



本文編號(hào)：3455665