第一章新型骨形態(tài)發(fā)生蛋白7衍生多肽對骨髓基質干細胞生物學行為的影響目的：觀察采用FMOC/tBu固相多肽合成法人工合成的新型骨形態(tài)發(fā)生蛋白7衍生多肽對骨髓基質干細胞生物學行為的影響,包括增殖、成骨分化及礦化。方法：骨形態(tài)發(fā)生蛋白7衍生多肽采用FMOC/tBu固相多肽合成法合成。大鼠骨髓基質干細胞通過原代分離培養(yǎng)獲得,并用流式細胞儀鑒定其表面標志物CD90,CD34。將傳至第3代的骨髓基質干細胞分為實驗組和對照組,在實驗組細胞培養(yǎng)基加入終質量濃度為100mg/L的骨形態(tài)發(fā)生蛋白7衍生多肽,對照組中不添加多肽。經過2,4,6,8,10d時間的培養(yǎng)后,對各組細胞進行MTT檢測,評價骨髓基質干細胞的增殖情況；對各組細胞進行7,14,21d的培養(yǎng)后,采用細胞內鈣含量法和堿性磷酸酶法評價各組細胞的活性及其成骨分化情況,并通過鈣黃綠素染色觀察各組細胞的礦化情況。結果：經FMOC/tBu固相多肽合成法和高效液相色譜法可獲得純純度為97%的骨形態(tài)發(fā)生蛋白7衍生多肽（KQLNAISVLYFDD）。原代培養(yǎng)大鼠骨髓基質干細胞生長良好,通過流式細胞儀檢測其細胞表面標志CD90和CD34,陽性率分別達到91.5... 

【文章來源】：中南大學湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

BMP-7蛋白質的晶體結構，其中紅色序列為BMP-7衍生多膚的設計合成模板FigureI-1BMP-7proteincrystalstructureinwhichredsequencedesignforBMP-7derivedpeptides

3.1 BMP-7蛋白質的晶體結構及合成的BMP-7衍生多肽質譜儀和色譜儀測定其序列及純度，結果表明BMP-7多肽的分子量1524.78m/z,純度為 97.64% (圖 1-1，圖 1-2)

可見部分細胞內有f丐黃綠素沉積，發(fā)出綠色焚光(圖1-7),培養(yǎng)14d時，細胞內媽黃綠素沉積顯著增加，發(fā)出強烈的明亮綠色焚光(圖1-8)；對照組誘導培養(yǎng)7 d時僅有個別細胞發(fā)出綠色熒光(圖1-9)，培養(yǎng)14 d時綠色熒光僅輕微增加(圖1-10)。這說明實驗組骨髓基質干細胞的礦化明顯強于對照組�！鰣D1-7實驗組誘導培養(yǎng)7d后，轉黃綠素陽性細胞發(fā)出綠色突光，可見部分細胞內有甸黃綠素沉積，發(fā)出綠色突光（X200 )Figurel-7 In the experimental group BMSCs was induced for Id. The calcein positive ceilsshowed green fluorescence ( x200 )11

【參考文獻】：
期刊論文
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