本文關(guān)鍵詞：載細(xì)菌電紡纖維膜的制備及評(píng)價(jià)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：傳統(tǒng)的腫瘤治療方法具有難以克服的缺點(diǎn),如毒副反應(yīng)嚴(yán)重、治療成本高、腫瘤易發(fā)生轉(zhuǎn)移等,細(xì)菌用于腫瘤治療顯示出治療方法簡(jiǎn)單、抗腫瘤效果顯著以及容易與其它腫瘤治療方法進(jìn)行聯(lián)用等特點(diǎn),具有一定的潛力。然而現(xiàn)有的抗腫瘤細(xì)菌大多本身具有毒性,常會(huì)引起不良以及無(wú)法預(yù)料的毒副作用。即使采用如Escherichia coli Nissle 1917這樣的益生菌,在治療時(shí),細(xì)菌會(huì)在體內(nèi)循壞且其中部分并非定植于腫瘤組織,而存于體內(nèi)各個(gè)臟器中,在長(zhǎng)期治療時(shí)不但會(huì)加重其它臟器的除菌負(fù)擔(dān),大量使用時(shí)還需注射抗生素以清除多余細(xì)菌。本研究旨在將細(xì)菌攜載于靜電紡絲纖維膜中,避免在利用細(xì)菌進(jìn)行腫瘤治療時(shí),游離細(xì)菌對(duì)機(jī)體造成的傷害和負(fù)擔(dān)。為此,本研究重點(diǎn)考察了將細(xì)菌攜載在纖維上的不同方式對(duì)細(xì)菌的影響。在利用水不溶性聚合物制備包裹細(xì)菌的電紡纖維時(shí),由于細(xì)菌處于密閉空間中,難以考察電紡過(guò)程對(duì)細(xì)菌的影響。通過(guò)在同軸靜電紡絲時(shí),將氯化鈉顆粒加入聚合物溶液中,使得纖維遇水后形成貫通孔,再通過(guò)Alamar Blue檢測(cè)方法,本研究建立了對(duì)水不溶性聚合物電紡纖維內(nèi)細(xì)菌活性的定量檢測(cè)方案。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,利用同軸靜電紡絲技術(shù)將細(xì)菌包裹入纖維中后,細(xì)菌的活性可以維持在48%,細(xì)菌仍然具備繁殖能力和蛋白表達(dá)能力；細(xì)菌的繁殖能力和蛋白表達(dá)能力隨著在纖維內(nèi)培養(yǎng)時(shí)間的增長(zhǎng)而減弱,這可能是因?yàn)槔w維內(nèi)的空間有限所致。本研究利用共價(jià)接枝方法和親和吸附方法將細(xì)菌固定在電紡纖維膜的表面時(shí),考察了固定過(guò)程對(duì)細(xì)菌的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,無(wú)論是共價(jià)接枝過(guò)程還是親和吸附過(guò)程均未對(duì)細(xì)菌的活性產(chǎn)生影響；細(xì)菌的增殖能力和蛋白表達(dá)也未受明顯影響,細(xì)菌的傳代時(shí)間在傳代5次后回歸正常。
【關(guān)鍵詞】：Escherichia coli Nissle 1917 電紡 同軸紡絲 活性檢測(cè) 表面改性 共價(jià)接枝 親和吸附
【學(xué)位授予單位】：西南交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R318.08
【目錄】：

• 摘要7-8
• Abstract8-13
• 第1章 緒論13-23
• 1.1 細(xì)菌固定化13-15
• 1.1.1 細(xì)菌固定的方法13-14
• 1.1.2 細(xì)菌固定的載體14
• 1.1.3 細(xì)菌固定的應(yīng)用14-15
• 1.2 靜電紡纖維15-18
• 1.2.1 電紡纖維簡(jiǎn)介15-16
• 1.2.2 芯殼結(jié)構(gòu)靜電紡纖維16-17
• 1.2.3 同軸靜電紡纖維的原理及研究現(xiàn)狀17-18
• 1.3 靜電紡纖維的表面改性18-19
• 1.3.1 靜電紡纖維的表面改性方法18-19
• 1.3.2 靜電紡纖維膜表面改性的應(yīng)用現(xiàn)狀19
• 1.4 細(xì)菌在腫瘤治療中的應(yīng)用19-22
• 1.4.1 腫瘤細(xì)菌治療的研究現(xiàn)狀20
• 1.4.2 腫瘤治療用細(xì)菌的改造20-21
• 1.4.3 ECN的特點(diǎn)及在疾病治療中的應(yīng)用21-22
• 1.5 本課題的研究意義與內(nèi)容22-23
• 第2章 蛋白表達(dá)和分泌型EcN菌的構(gòu)建23-40
• 2.1 實(shí)驗(yàn)部分23-32
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料23-24
• 2.1.2 EcN的培養(yǎng)24
• 2.1.3 pET28a-GFP質(zhì)粒轉(zhuǎn)化EcN24
• 2.1.4 pe1B-EGFP基因擴(kuò)增24-26
• 2.1.5 pGEX-4T-1載體改造26-28
• 2.1.6 pGEXM-pe1B-EGFP重組載體的構(gòu)建28-30
• 2.1.7 pe1B-EGFP在ECN中的表達(dá)30-32
• 2.2 結(jié)果與討論32-39
• 2.2.1 轉(zhuǎn)染pET28a-GFP質(zhì)粒ECN菌的表征32-33
• 2.2.2 pe1B-EGFP基因擴(kuò)增后的電泳分析33-34
• 2.2.3 pGEX-4T-1載體的PCR鑒定和測(cè)序34-36
• 2.2.4 pGEXM-pe1B-EGFP重組載體的鑒定36-37
• 2.2.5 pe1B-EGFP在ECN中的表達(dá)37-39
• 2.3 本章小結(jié)39-40
• 第3章 靜電紡纖維包埋細(xì)菌的研究40-50
• 3.1 實(shí)驗(yàn)部分40-42
• 3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料40
• 3.1.2 氯化鈉顆粒的制備及表征40-41
• 3.1.3 電紡纖維膜的制備及表征41
• 3.1.4 電紡纖維膜中細(xì)菌活率的表征41
• 3.1.5 電紡纖維膜中細(xì)菌增殖能力的表征41-42
• 3.1.6 電紡纖維膜中細(xì)菌的蛋白表達(dá)表征42
• 3.1.7 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)處理42
• 3.2 結(jié)果與討論42-49
• 3.2.1 載細(xì)菌纖維膜的結(jié)構(gòu)與形貌表征42-44
• 3.2.2 電紡纖維中細(xì)菌的活率44-47
• 3.2.3 電紡纖維中細(xì)菌的生長(zhǎng)行為47-48
• 3.2.4 電紡纖維中細(xì)菌的蛋白表達(dá)48-49
• 3.3 本章小結(jié)49-50
• 第4章 電紡纖維膜表面接枝細(xì)菌的研究50-63
• 4.1 實(shí)驗(yàn)部分50-53
• 4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料50
• 4.1.2 電紡纖維膜的制備與表征50-51
• 4.1.3 電紡纖維的醛基改性51
• 4.1.4 電紡纖維的糖基改性51
• 4.1.5 改性纖維膜的表征51-52
• 4.1.6 改性纖維膜上接枝細(xì)菌52
• 4.1.7 纖維接枝細(xì)菌的表征52-53
• 4.1.8 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)處理53
• 4.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析與討論53-62
• 4.2.1 電紡纖維膜的形貌表征53-54
• 4.2.2 共價(jià)接枝細(xì)菌改性纖維的表征54-57
• 4.2.3 親和吸附細(xì)菌改性纖維的表征57-60
• 4.2.4 改性纖維接枝細(xì)菌的表征60-62
• 4.3 本章小結(jié)62-63
• 全文結(jié)論63-64
• 致謝64-65
• 參考文獻(xiàn)65-72
• 攻讀碩士期間發(fā)表論文72-73

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 張麗,程虎民,馬季銘;非水反相微乳中NaCl納米粒子的制備[J];物理化學(xué)學(xué)報(bào);2002年01期

  本文關(guān)鍵詞：載細(xì)菌電紡纖維膜的制備及評(píng)價(jià)，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：341548