本文關(guān)鍵詞：殼聚糖海綿復(fù)合脂肪干細(xì)胞膜片對(duì)2型糖尿病大鼠顱骨極限骨缺損愈合促進(jìn)作用的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：隨著口腔種植技術(shù)的進(jìn)步與創(chuàng)新,T2DM已是種植非禁忌證,但是T2DM患者的種植失敗率仍明顯高于正�；颊�。在臨床工作中,糖尿病患者拔牙后拔牙窩�？梢姽怯喜涣�,即使植入常規(guī)骨替代材料后其骨愈合效果往往也并不理想。因此,研究適合T2DM患者的骨替代材料具有非常重要的意義。ASCs是近些年來的研究熱點(diǎn),對(duì)骨缺損修復(fù)同樣具有革命性意義,是骨組織工程中的干細(xì)胞理想來源。因此我們提出,采用ASCs構(gòu)建的生物材料對(duì)T2DM狀態(tài)下的骨形成具有重要的促進(jìn)作用。在評(píng)價(jià)生物材料成骨效應(yīng)之前,首先應(yīng)當(dāng)建立的是標(biāo)準(zhǔn)的CSD模型,遺憾的是如今國(guó)內(nèi)外對(duì)于CSD模型的研究主要集中于正常動(dòng)物模型,對(duì)于T2DM狀態(tài)下CSD的大小尚屬未知,這勢(shì)必影響評(píng)價(jià)骨修復(fù)材料在T2DM狀態(tài)下的生物活性的可信度�；诖�,本研究分為兩個(gè)部分,首先,通過構(gòu)建T2DM大鼠及正常大鼠顱骨系列骨缺損模型,探索T2DM狀態(tài)下大鼠顱骨CSD值;其次,以殼聚糖海綿為支架,與ASCs膜片復(fù)合后植入T2DM大鼠顱骨CSD模型,觀察殼聚糖海綿復(fù)合ASCs膜片對(duì)T2DM大鼠顱骨CSD模型骨愈合的促進(jìn)作用。第一部分T2DM大鼠顱骨CSD模型的實(shí)驗(yàn)研究目的:探索T2DM大鼠顱骨CSD值的大小。方法:選擇SPF級(jí)9周齡SD大鼠,體重300-320 g,用高脂高糖飼料+小劑量STZ腹腔注射誘導(dǎo)T2DM大鼠模型,建模成功后,將T2DM大鼠及正常大鼠各隨機(jī)分為4組,每組3只,分別于顱骨中央?yún)^(qū)制備直徑為2、3、4、5 mm,穿透顱骨到達(dá)硬腦膜的骨缺損;術(shù)后8周取材,分別行大體觀察、X線檢查及組織學(xué)染色。結(jié)果:T2DM大鼠行顱骨缺損術(shù)后8周,直徑2 mm的顱骨缺損愈合完全,X線阻射,組織學(xué)檢測(cè)可見新骨生成良好;直徑3、4、5 mm的顱骨缺損愈合不完整,X線透射,新骨生成不足。正常大鼠直徑2、3、4mm的缺損愈合完全,X線阻射,組織學(xué)檢測(cè)可見新骨生成良好;直徑5 mm的缺損未見愈合,X線透射,新骨生成較少。結(jié)論:T2DM大鼠的顱骨骨缺損區(qū)愈合明顯差于正常大鼠;T2DM大鼠顱骨CSD參考直徑可定義為3 mm。第二部分殼聚糖海綿復(fù)合ASCs膜片對(duì)T2DM大鼠顱骨CSD愈合促進(jìn)作用的實(shí)驗(yàn)研究目的:觀察殼聚糖復(fù)合ASCs膜片能否促進(jìn)T2DM大鼠顱骨CSD的愈合。方法:體外分離培養(yǎng)大鼠原代ASCs細(xì)胞,通過BCIP/NBT染色、天狼星紅染色、茜素紅染色觀察ASCs的成骨能力,油紅O染色觀察ASCs的成脂能力;使用冷凍干燥機(jī)制備殼聚糖海綿;誘導(dǎo)ASCs成膜后與支架海綿復(fù)合,通過DAPI染色、SEM觀察殼聚糖海綿攜帶ASCs的能力;天狼星紅染色觀察ASCs膜片成膠原能力;并將殼聚糖復(fù)合ASCs膜片植入到T2DM大鼠顱骨CSD骨缺損區(qū),對(duì)照組僅制備缺損不移植任何材料,實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組大鼠各5只。8周后取材,通過大體觀察、Micro CT掃描、組織學(xué)染色觀察殼聚糖復(fù)合ASCs膜片對(duì)于T2DM大鼠顱骨CSD愈合的促進(jìn)情況。結(jié)果:ASCs具有成骨、成脂多向分化能力;殼聚糖海綿能夠很好的攜帶ASCs;ASCs膜片中含有大量的膠原;殼聚糖海綿復(fù)合ASCs膜片植入到顱骨CSD區(qū)后,T2DM大鼠顱骨CSD區(qū)的骨愈合能力明顯優(yōu)于空白對(duì)照組。結(jié)論:殼聚糖海綿復(fù)合ASCs膜片能夠很好的促進(jìn)T2DM大鼠顱骨CSD的骨愈合。
【關(guān)鍵詞】：T2DM CSD 殼聚糖海綿 ASCs 細(xì)胞膜片
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R587.1;R783.1
【目錄】：

• 縮略語表6-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-13
• 文獻(xiàn)回顧13-23
• 第一部分 T2DM大鼠顱骨CSD的實(shí)驗(yàn)研究23-31
• 1 實(shí)驗(yàn)材料23-24
• 1.1 主要實(shí)驗(yàn)試劑與材料23-24
• 1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器24
• 1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物24
• 2 實(shí)驗(yàn)方法24-27
• 2.1 實(shí)驗(yàn)分組24
• 2.2 T2DM大鼠模型的建立24
• 2.3 制備大鼠顱骨骨缺損模型24-25
• 2.4 大體觀察25
• 2.5 X線檢查25
• 2.6 Masson三色染色觀察25-27
• 3 結(jié)果27-29
• 3.1 T2DM模型動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)27
• 3.2 大體觀察27-28
• 3.3 X線檢查28
• 3.4 Masson三色染色檢測(cè)結(jié)果28-29
• 4 討論29-31
• 第二部分 殼聚糖海綿復(fù)合ASCS膜片對(duì)T2DM大鼠顱骨CSD愈合促進(jìn)作用的研究31-46
• 1 實(shí)驗(yàn)材料31-33
• 1.1 主要實(shí)驗(yàn)試劑與材料31-32
• 1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器32
• 1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物32-33
• 2 實(shí)驗(yàn)方法33-38
• 2.1 實(shí)驗(yàn)分組33
• 2.2 T2DM大鼠模型的建立33
• 2.3 ASCs提取、培養(yǎng)33-34
• 2.4 ASCs形態(tài)觀察及成骨成脂能力觀察34-35
• 2.5 殼聚糖海綿的制作35
• 2.6 殼聚糖海綿攜載ASCs的能力觀察35-36
• 2.7 ASCs膜片的培養(yǎng)及其成膠原能力觀察36
• 2.8 殼聚糖海綿復(fù)合ASCs膜片植入T2DM大鼠CSD骨缺損處36-37
• 2.9 大體觀察37
• 2.10 Micro CT掃描37-38
• 2.11 Masson三色染色觀察38
• 2.12 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法38
• 3 結(jié)果38-44
• 3.1 ASCs形態(tài)觀察及成骨成脂能力觀察38-40
• 3.2 殼聚糖海綿及殼聚糖攜帶ASCs觀察40-41
• 3.3 ASCs膜片的培養(yǎng)及其成骨能力觀察41
• 3.4 大體觀察41-42
• 3.5 Micro CT42-43
• 3.6 Masson三色染色結(jié)果43-44
• 4 討論44-46
• 小結(jié)46-47
• 參考文獻(xiàn)47-59
• 研究成果59-60
• 致謝60

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 郝濤;高琳;陽琰;廖鑫;;2型糖尿病患者血清C反應(yīng)蛋白水平與牙周病關(guān)系[J];實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志;2009年03期

  本文關(guān)鍵詞：殼聚糖海綿復(fù)合脂肪干細(xì)胞膜片對(duì)2型糖尿病大鼠顱骨極限骨缺損愈合促進(jìn)作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：340308