目的：通過酶消化法在體外利用人臍帶及乳鼠坐骨神經(jīng)分離出臍帶間充質(zhì)干細胞和雪旺細胞并進行傳代培養(yǎng)和鑒定，在體外與材料復(fù)合構(gòu)建出殼聚糖-NT3細胞復(fù)合支架材料，并將其植入構(gòu)建好的大鼠脊髓橫斷損傷模型中，通過設(shè)置相應(yīng)的對照組及相關(guān)檢測指標，檢測細胞復(fù)合支架材料對大鼠脊髓橫斷損傷的修復(fù)效果。方法:以人臍帶為取材來源，采用經(jīng)典膠原酶消化法分離出臍帶間充質(zhì)干細胞，傳代培養(yǎng)，顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，繪制增殖曲線，用流式細胞儀進行表面抗原鑒定。以SD新生乳鼠的坐骨神經(jīng)分離出雪旺細胞并傳代，以免疫組織化學(xué)方法和光學(xué)顯微鏡觀察細胞形態(tài)進行鑒定。將傳代后的臍帶間充質(zhì)干細胞和雪旺細胞與殼聚糖-NT3支架（由暨南大學(xué)理工學(xué)院提供）復(fù)合，構(gòu)建出細胞復(fù)合材料，設(shè)計相應(yīng)的動物實驗分組，按分組情況植入相應(yīng)植入物，經(jīng)行為學(xué)、影像學(xué)、組織學(xué)等評估脊髓損傷的治療效果。結(jié)果:以酶消化法成功從臍帶中分離培養(yǎng)出間充質(zhì)干細胞，并經(jīng)細胞形態(tài)觀察、流式檢測鑒定顯示所提取細胞均高度表達間充質(zhì)干細胞的標記（CD73、CD90、CD105）和黏附分子標記（CD54、CD44、CD29、）不表達造血干細胞標記（CD45、CD40、CD34）和人類... 

【文章來源】：暨南大學(xué)廣東省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

人臍帶間充質(zhì)干細胞的生長曲線

16圖2-6 流式鑒定流式細胞儀檢測人臍帶間充質(zhì)干細胞的表面標志顯示：臍帶干細胞均統(tǒng)一高表達間充質(zhì)干細胞的表面標記（CD73、CD90、CD105）和黏附分子標記（CD54 、CD44、CD29、），不表達造血干細胞標記（CD45、CD40、CD34）和人類白細胞抗原標記（HLA-DR）

術(shù)后4周各組橫斷位MRI圖像

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3383744