發(fā)布時間：2021-08-28 06:54

　　目的:稀土鎂合金（Mg-Nd-Zn-Zr）因其生物可吸收降解性和優(yōu)良的機械性能等特點,在運用作為神經(jīng)外科可吸收的顱骨固定材料方面具有良好的應(yīng)用前景。本課題主要研究稀土鎂合金對神經(jīng)細胞的生物相容性。方法:1.不同稀釋濃度的稀土鎂合金浸提液的制備;2.星型膠質(zhì)細胞和神經(jīng)干細胞的原代培養(yǎng)及純化,并通過免疫熒光來鑒定;3.通過MTT法評估稀土鎂合金浸提液對星型膠質(zhì)細胞活性的影響,流式細胞術(shù)檢測星型膠質(zhì)細胞的細胞周期,再通過Western blot方法來檢測各組相關(guān)增殖蛋白的表達。4.通過cck-8法分別檢測1天和3天后稀土鎂合金浸提液對神經(jīng)干細胞的細胞毒性影響,Q-PCR檢測實驗各組浸提液對神經(jīng)干細胞PCNA、BAX、BCL-2的基因表達情況,最后誘導神經(jīng)干細胞分化,再通過免疫熒光方法鑒定分化后的細胞。結(jié)果:1.細胞毒性結(jié)果顯示,稀土合金浸提液對星型膠質(zhì)細胞和神經(jīng)干細胞兩種細胞均未表現(xiàn)出毒性作用。稀土鎂合金浸提液稀釋3x、10x倍稀釋濃度時與細胞有著良好的生物相容性;2.細胞增殖實驗結(jié)果表明,稀土鎂合金浸提液稀釋在低濃度（10x）時對星型膠質(zhì)和神經(jīng)干細胞增殖有促進作用,在高濃度（1x）培養(yǎng)時,... 

【文章來源】：湖南師范大學湖南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖I星型膠質(zhì)細胞的形態(tài)學特征

３．浸提液對膠質(zhì)細胞周期的影響??不同濃度實驗組的浸提液處理星形膠質(zhì)細胞２４?ｈ后，經(jīng)流式細胞儀檢測，??結(jié)果可以看出（圖３），浸提液處理后的星形膠質(zhì)細胞的細胞周期受到了部分影??響。浸提液濃度在稀釋ｌｘ時（圖３Ｅ），細胞周期進程即受到影響，細胞多數(shù)停??留在Ｇｌ期，ｓ期的細胞較其他組有降低，而ｌ〇ｘ組細胞數(shù)Ｓ期和Ｇ２期較３＞＜、??ｌ〇ｘ組稍有升高（圖４）。根據(jù)統(tǒng)計結(jié)果可知，ｌ〇ｘ組細胞處于增殖期多，ｌｘ組最??少（表?３）。（＊＊代表?Ｐ＜０．０ｌ，?＊代表?Ｐ＜０．０５）。??Ｂ?Ｓ：：??Ａ?Ｓ?°?Ｃ?４?＝??ＯｅｗＨ?ｍ?＊?＊?Ｃｌ＾ｉｉ＊?ｌ＾－ｌ?成?？?？０??Ｄ?＊?Ｅ?ｒ，??（＾?ｉ??圖３浸提液對肢質(zhì)細胞周期的影響??Ａ：陰性對照組?Ｂ：１０ｘ組?Ｃ：３ｘ組?Ｄ：２ｘ組?Ｅ：ｌｘ組??－１２－??

濃度的浸提液下，細胞的相對死亡率均在２０％以下，毒性評級為１級，即合金材??料浸提液對星型膠質(zhì)細胞無明顯細胞毒性作用（表２）。細胞死亡率跟浸提液濃??度呈線性關(guān)系（圖２）。將培養(yǎng)的星型膠質(zhì)細胞經(jīng)不同濃度梯度分組的浸提液處??理后，通過ＭＴＴ法測定出ＯＤ值并計算出細胞死亡率百分比，公式為：細胞死??亡率＝（１?一實驗組ＯＤ值／對照組ＯＤ值戶１００％，根據(jù)公式計算出細胞死亡率跟??濃度的變化關(guān)系（表２），根據(jù)統(tǒng)計結(jié)果繪制的圖表可看出，細胞死亡率與濃度??呈線性相關(guān)（圖２），即隨著浸提液濃度的增高，細胞死亡率也隨著增高，但都??在安全范圍內(nèi)，當浸提液濃度稀釋到ｌｘ時，星型膠質(zhì)細胞死亡率約為１９．３％，??此時細胞生存抑制率高于陰性對照組，當浸提液濃度稀釋到時，星型膠質(zhì)細??胞死亡率跟陰性對照組差別最小，當浸提液濃度稀釋到ｌ〇ｘ時，星型膠質(zhì)細胞死??亡率為最小。因此

【參考文獻】：
期刊論文
[1]鎂離子對成骨細胞活力和分化的促進作用及其機制研究[J]. 王健,馬翔宇,馮亞非,馬田成,雷偉,王林.  現(xiàn)代生物醫(yī)學進展. 2015(15)
[2]鎂離子對大鼠血管平滑肌細胞鈣化相關(guān)因子表達的影響[J]. 白亞玲,徐金升,靳晶晶,張俊霞,張勝雷,崔立文,張慧然.  中國全科醫(yī)學. 2015(06)
[3]稀土元素在口腔醫(yī)學領(lǐng)域應(yīng)用研究進展[J]. 胡穎,甄蕾,杜毅.  中國實用口腔科雜志. 2013(12)
[4]鎂金屬纖維絲與雪旺細胞共培養(yǎng)時細胞增殖及神經(jīng)生長因子的表達[J]. 李伯翰,劉洪臣.  中華老年口腔醫(yī)學雜志. 2013(03)
[5]磷酸鈣表面改性鎂合金的生物腐蝕性能及細胞相容性(英文)[J]. 徐麗萍,張二林,楊珂.  Transactions of Nonferrous Metals Society of China. 2012(08)
[6]顱骨缺損成形術(shù)中應(yīng)用材料新進展[J]. 宋啟民,費昶,張建.  國際神經(jīng)病學神經(jīng)外科學雜志. 2011(05)
[7]生物可降解鎂合金植入材料的醫(yī)用特征[J]. 姜海英,艾紅軍.  中國組織工程研究與臨床康復. 2011(34)
[8]醫(yī)用材料Mg-Y-Nd-Zr合金的組織及力學性能[J]. 丁雨田,于善坤,胡勇,方元,李暢.  蘭州理工大學學報. 2010(01)
[9]主要稀土元素對鎂合金組織和性能的影響[J]. 黃曉鋒,朱凱,曹喜娟,田載友.  新技術(shù)新工藝. 2008(11)
[10]可降解鎂合金的動物體內(nèi)骨誘導作用[J]. 洪巖松,楊柯,張廣道,黃晶晶,郝玉全,艾紅軍.  金屬學報. 2008(09)

碩士論文
[1]鎂離子對神經(jīng)細胞的保護性作用的研究[D]. 萬娟.華東師范大學 2006



本文編號：3368035