發(fā)布時(shí)間：2021-08-19 23:17

　　為有效降低干細(xì)胞冷凍保護(hù)液中的二甲基亞砜（Me₂SO,DMSO）濃度,減少其作為冷凍保護(hù)劑對(duì)細(xì)胞低溫保存時(shí)產(chǎn)生的毒性,提高細(xì)胞存活率,以肝細(xì)胞為目標(biāo),采取響應(yīng)面法對(duì)冷凍保護(hù)劑配方進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果表明:冷凍保護(hù)劑的最佳配比為DMSO濃度3%、甘油濃度6%、海藻糖濃度0.1%,在此條件下肝細(xì)胞復(fù)溫存活率可達(dá)到84.35%,研究結(jié)果有效地降低了DMSO的濃度,減少了由此帶來的對(duì)肝細(xì)胞造成的毒性損害,為后續(xù)的研究奠定了基礎(chǔ)。 

【文章來源】：生物技術(shù)進(jìn)展. 2020,10(02)

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

DMSO和甘油濃度對(duì)肝細(xì)胞復(fù)活率影響的響應(yīng)面圖及等高線圖

DMSO和海藻糖濃度對(duì)肝細(xì)胞復(fù)活率影響的響應(yīng)面圖及等高線圖

圖2 DMSO和海藻糖濃度對(duì)肝細(xì)胞復(fù)活率影響的響應(yīng)面圖及等高線圖本實(shí)驗(yàn)提供了細(xì)胞外DMSO的合適濃度,但由于DMSO是一種滲透性保護(hù)劑,至于凍存之后在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生了多少DMSO的殘留,還需要進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行確定;其次,有關(guān)于海藻糖的濃度是否還有細(xì)化的空間也需進(jìn)一步探究。在之前實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn),大于0.3%濃度的海藻糖會(huì)由于保護(hù)液的滲透壓太大,從而在凍存前使肝細(xì)胞全部死亡,因此對(duì)海藻糖的濃度有待更深層次的研究。最后,希望通過本實(shí)驗(yàn)結(jié)果,能夠提示在其他類別的細(xì)胞凍存中也降低DMSO毒性的危害,同時(shí)積極去尋找新型的無毒保護(hù)劑,來逐步替代毒性保護(hù)劑。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]DMSO與DMF對(duì)H9C2心肌細(xì)胞毒性及STAT3信號(hào)通路的影響[J]. 楊敏,張凱,李建喜,王磊,張康,仇正英,王學(xué)智.  浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2019(09)
[2]二甲基甲酰胺致H9c2心肌細(xì)胞炎性損傷研究[J]. 榮青秀,楊永堅(jiān),張婉婉,馬曉麗,向梅,王璐璐,孫文靜.  中國(guó)職業(yè)醫(yī)學(xué). 2017(01)
[3]二甲基亞砜（DMSO）對(duì)骨髓瘤細(xì)胞RPMI8226影響的研究[J]. 李俊東,裴曉川,白春強(qiáng),張媛媛,張志華,閆麗娜,李紅,郝長(zhǎng)來.  吉林醫(yī)學(xué). 2017(01)
[4]響應(yīng)面法在試驗(yàn)設(shè)計(jì)與優(yōu)化中的應(yīng)用[J]. 李莉,張賽,何強(qiáng),胡學(xué)斌.  實(shí)驗(yàn)室研究與探索. 2015(08)
[5]對(duì)二甲基亞砜在小鼠淋巴瘤細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中適宜濃度的探索[J]. 胡燕平,文海若,宋捷,左澤平,許雷鳴.  中國(guó)新藥雜志. 2015(02)
[6]南瓜籽粕酶法制備血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制肽工藝優(yōu)化[J]. 周紅麗,譚興和,劉志偉,李清明.  農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào). 2015(S1)
[7]二甲基亞砜誘導(dǎo)小鼠紅白血病細(xì)胞分化的差異蛋白質(zhì)組學(xué)[J]. 楊祖立,朱曉芳,施鳴銘,胡繁,趙輔昆,張世馥.  解剖學(xué)報(bào). 2014(04)
[8]DMSO誘導(dǎo)MCF-7細(xì)胞凋亡的研究[J]. 扎拉嘎胡,陳莉,買霞,陳小義.  解剖科學(xué)進(jìn)展. 2008(01)
[9]不同濃度DMSO對(duì)胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)的影響[J]. 張衛(wèi)國(guó),史雪勤,王小虎,謝國(guó)建,李勝保,吳清明.  重慶醫(yī)學(xué). 2004(11)
[10]二甲基亞砜對(duì)培養(yǎng)人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞增殖的影響[J]. 彭坤,邢怡橋,項(xiàng)奕,葉美紅,艾明,楊安懷,楊燕寧.  眼科新進(jìn)展. 2004(02)



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