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響應(yīng)面法降低肝細胞冷凍保護液中的二甲基亞砜濃度

發(fā)布時間:2021-08-19 23:17
  為有效降低干細胞冷凍保護液中的二甲基亞砜(Me2SO,DMSO)濃度,減少其作為冷凍保護劑對細胞低溫保存時產(chǎn)生的毒性,提高細胞存活率,以肝細胞為目標(biāo),采取響應(yīng)面法對冷凍保護劑配方進行了優(yōu)化。結(jié)果表明:冷凍保護劑的最佳配比為DMSO濃度3%、甘油濃度6%、海藻糖濃度0.1%,在此條件下肝細胞復(fù)溫存活率可達到84.35%,研究結(jié)果有效地降低了DMSO的濃度,減少了由此帶來的對肝細胞造成的毒性損害,為后續(xù)的研究奠定了基礎(chǔ)。 

【文章來源】:生物技術(shù)進展. 2020,10(02)

【文章頁數(shù)】:5 頁

【部分圖文】:

響應(yīng)面法降低肝細胞冷凍保護液中的二甲基亞砜濃度


DMSO和甘油濃度對肝細胞復(fù)活率影響的響應(yīng)面圖及等高線圖

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DMSO和海藻糖濃度對肝細胞復(fù)活率影響的響應(yīng)面圖及等高線圖

等高線圖,海藻糖,響應(yīng)面,細胞


圖2 DMSO和海藻糖濃度對肝細胞復(fù)活率影響的響應(yīng)面圖及等高線圖本實驗提供了細胞外DMSO的合適濃度,但由于DMSO是一種滲透性保護劑,至于凍存之后在細胞內(nèi)產(chǎn)生了多少DMSO的殘留,還需要進一步的實驗進行確定;其次,有關(guān)于海藻糖的濃度是否還有細化的空間也需進一步探究。在之前實驗過程中發(fā)現(xiàn),大于0.3%濃度的海藻糖會由于保護液的滲透壓太大,從而在凍存前使肝細胞全部死亡,因此對海藻糖的濃度有待更深層次的研究。最后,希望通過本實驗結(jié)果,能夠提示在其他類別的細胞凍存中也降低DMSO毒性的危害,同時積極去尋找新型的無毒保護劑,來逐步替代毒性保護劑。

【參考文獻】:
期刊論文
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本文編號:3352323

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