響應(yīng)面法降低肝細胞冷凍保護液中的二甲基亞砜濃度
發(fā)布時間:2021-08-19 23:17
為有效降低干細胞冷凍保護液中的二甲基亞砜(Me2SO,DMSO)濃度,減少其作為冷凍保護劑對細胞低溫保存時產(chǎn)生的毒性,提高細胞存活率,以肝細胞為目標(biāo),采取響應(yīng)面法對冷凍保護劑配方進行了優(yōu)化。結(jié)果表明:冷凍保護劑的最佳配比為DMSO濃度3%、甘油濃度6%、海藻糖濃度0.1%,在此條件下肝細胞復(fù)溫存活率可達到84.35%,研究結(jié)果有效地降低了DMSO的濃度,減少了由此帶來的對肝細胞造成的毒性損害,為后續(xù)的研究奠定了基礎(chǔ)。
【文章來源】:生物技術(shù)進展. 2020,10(02)
【文章頁數(shù)】:5 頁
【部分圖文】:
DMSO和甘油濃度對肝細胞復(fù)活率影響的響應(yīng)面圖及等高線圖
DMSO和海藻糖濃度對肝細胞復(fù)活率影響的響應(yīng)面圖及等高線圖
圖2 DMSO和海藻糖濃度對肝細胞復(fù)活率影響的響應(yīng)面圖及等高線圖本實驗提供了細胞外DMSO的合適濃度,但由于DMSO是一種滲透性保護劑,至于凍存之后在細胞內(nèi)產(chǎn)生了多少DMSO的殘留,還需要進一步的實驗進行確定;其次,有關(guān)于海藻糖的濃度是否還有細化的空間也需進一步探究。在之前實驗過程中發(fā)現(xiàn),大于0.3%濃度的海藻糖會由于保護液的滲透壓太大,從而在凍存前使肝細胞全部死亡,因此對海藻糖的濃度有待更深層次的研究。最后,希望通過本實驗結(jié)果,能夠提示在其他類別的細胞凍存中也降低DMSO毒性的危害,同時積極去尋找新型的無毒保護劑,來逐步替代毒性保護劑。
【參考文獻】:
期刊論文
[1]DMSO與DMF對H9C2心肌細胞毒性及STAT3信號通路的影響[J]. 楊敏,張凱,李建喜,王磊,張康,仇正英,王學(xué)智. 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2019(09)
[2]二甲基甲酰胺致H9c2心肌細胞炎性損傷研究[J]. 榮青秀,楊永堅,張婉婉,馬曉麗,向梅,王璐璐,孫文靜. 中國職業(yè)醫(yī)學(xué). 2017(01)
[3]二甲基亞砜(DMSO)對骨髓瘤細胞RPMI8226影響的研究[J]. 李俊東,裴曉川,白春強,張媛媛,張志華,閆麗娜,李紅,郝長來. 吉林醫(yī)學(xué). 2017(01)
[4]響應(yīng)面法在試驗設(shè)計與優(yōu)化中的應(yīng)用[J]. 李莉,張賽,何強,胡學(xué)斌. 實驗室研究與探索. 2015(08)
[5]對二甲基亞砜在小鼠淋巴瘤細胞實驗中適宜濃度的探索[J]. 胡燕平,文海若,宋捷,左澤平,許雷鳴. 中國新藥雜志. 2015(02)
[6]南瓜籽粕酶法制備血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制肽工藝優(yōu)化[J]. 周紅麗,譚興和,劉志偉,李清明. 農(nóng)業(yè)工程學(xué)報. 2015(S1)
[7]二甲基亞砜誘導(dǎo)小鼠紅白血病細胞分化的差異蛋白質(zhì)組學(xué)[J]. 楊祖立,朱曉芳,施鳴銘,胡繁,趙輔昆,張世馥. 解剖學(xué)報. 2014(04)
[8]DMSO誘導(dǎo)MCF-7細胞凋亡的研究[J]. 扎拉嘎胡,陳莉,買霞,陳小義. 解剖科學(xué)進展. 2008(01)
[9]不同濃度DMSO對胃癌細胞生長的影響[J]. 張衛(wèi)國,史雪勤,王小虎,謝國建,李勝保,吳清明. 重慶醫(yī)學(xué). 2004(11)
[10]二甲基亞砜對培養(yǎng)人視網(wǎng)膜色素上皮細胞增殖的影響[J]. 彭坤,邢怡橋,項奕,葉美紅,艾明,楊安懷,楊燕寧. 眼科新進展. 2004(02)
本文編號:3352323
【文章來源】:生物技術(shù)進展. 2020,10(02)
【文章頁數(shù)】:5 頁
【部分圖文】:
DMSO和甘油濃度對肝細胞復(fù)活率影響的響應(yīng)面圖及等高線圖
DMSO和海藻糖濃度對肝細胞復(fù)活率影響的響應(yīng)面圖及等高線圖
圖2 DMSO和海藻糖濃度對肝細胞復(fù)活率影響的響應(yīng)面圖及等高線圖本實驗提供了細胞外DMSO的合適濃度,但由于DMSO是一種滲透性保護劑,至于凍存之后在細胞內(nèi)產(chǎn)生了多少DMSO的殘留,還需要進一步的實驗進行確定;其次,有關(guān)于海藻糖的濃度是否還有細化的空間也需進一步探究。在之前實驗過程中發(fā)現(xiàn),大于0.3%濃度的海藻糖會由于保護液的滲透壓太大,從而在凍存前使肝細胞全部死亡,因此對海藻糖的濃度有待更深層次的研究。最后,希望通過本實驗結(jié)果,能夠提示在其他類別的細胞凍存中也降低DMSO毒性的危害,同時積極去尋找新型的無毒保護劑,來逐步替代毒性保護劑。
【參考文獻】:
期刊論文
[1]DMSO與DMF對H9C2心肌細胞毒性及STAT3信號通路的影響[J]. 楊敏,張凱,李建喜,王磊,張康,仇正英,王學(xué)智. 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2019(09)
[2]二甲基甲酰胺致H9c2心肌細胞炎性損傷研究[J]. 榮青秀,楊永堅,張婉婉,馬曉麗,向梅,王璐璐,孫文靜. 中國職業(yè)醫(yī)學(xué). 2017(01)
[3]二甲基亞砜(DMSO)對骨髓瘤細胞RPMI8226影響的研究[J]. 李俊東,裴曉川,白春強,張媛媛,張志華,閆麗娜,李紅,郝長來. 吉林醫(yī)學(xué). 2017(01)
[4]響應(yīng)面法在試驗設(shè)計與優(yōu)化中的應(yīng)用[J]. 李莉,張賽,何強,胡學(xué)斌. 實驗室研究與探索. 2015(08)
[5]對二甲基亞砜在小鼠淋巴瘤細胞實驗中適宜濃度的探索[J]. 胡燕平,文海若,宋捷,左澤平,許雷鳴. 中國新藥雜志. 2015(02)
[6]南瓜籽粕酶法制備血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制肽工藝優(yōu)化[J]. 周紅麗,譚興和,劉志偉,李清明. 農(nóng)業(yè)工程學(xué)報. 2015(S1)
[7]二甲基亞砜誘導(dǎo)小鼠紅白血病細胞分化的差異蛋白質(zhì)組學(xué)[J]. 楊祖立,朱曉芳,施鳴銘,胡繁,趙輔昆,張世馥. 解剖學(xué)報. 2014(04)
[8]DMSO誘導(dǎo)MCF-7細胞凋亡的研究[J]. 扎拉嘎胡,陳莉,買霞,陳小義. 解剖科學(xué)進展. 2008(01)
[9]不同濃度DMSO對胃癌細胞生長的影響[J]. 張衛(wèi)國,史雪勤,王小虎,謝國建,李勝保,吳清明. 重慶醫(yī)學(xué). 2004(11)
[10]二甲基亞砜對培養(yǎng)人視網(wǎng)膜色素上皮細胞增殖的影響[J]. 彭坤,邢怡橋,項奕,葉美紅,艾明,楊安懷,楊燕寧. 眼科新進展. 2004(02)
本文編號:3352323
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