促紅素對比粒細胞集落刺激因子聯(lián)合辛伐他汀促進組織工程皮膚血管化的實驗研究
發(fā)布時間:2017-04-29 03:04
本文關鍵詞:促紅素對比粒細胞集落刺激因子聯(lián)合辛伐他汀促進組織工程皮膚血管化的實驗研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:利用促紅細胞生成素(Erythropoietin, EPO)與粒細胞集落刺激因子(Granulocyte Colony-Stimulating Factor, G-CSF)聯(lián)合辛伐他汀分別對骨髓中血管內皮祖細胞(endothelial progenitor cells, EPCs)進行動員,優(yōu)選動員方法和時機,觀察其促進組織工程皮膚血管化的作用。方法:第一階段:采用辛伐他汀原料、重組人粒細胞刺激因子注射液和重組人促紅素注射液,參照課題組之前的研究結果及文獻介紹的劑量(辛伐他汀劑量2mg/Kg*d-1, G-CSF劑量100ug/Kg*d-1, EPO劑量3000IU/Kg*d-1)與方法(腹腔注射)進行小鼠骨髓血管內皮祖細胞的動員。選用健康雄性昆明種小白鼠(避免雌激素的干擾)108只,隨機分為聯(lián)合組(G-CSF聯(lián)合辛伐他汀腹腔注射組)、EPO組(EPO腹腔注射組)及陰性對照組(生理鹽水腹腔注射),各組均為36只。各組在動員后1d、3d、5d、7d、10d、14d六個時間點隨機取6只小鼠,心臟采血進行流式細胞儀檢測CD34、Flk-1、 CD133標記細胞的陽性率,結果取均值以x±s表示,統(tǒng)計學處理并進行對比分析。第二階段:選用健康雄性BALB/C裸鼠(避免雌激素的干擾及免疫排斥反應)36只,隨機分為聯(lián)合組(G-CSF聯(lián)合辛伐他汀腹腔注射組)、EPO組(EPO腹腔注射組)及陰性對照組(生理鹽水腹腔注射),各組均為12只,給予持續(xù)動員7天。各組又細分為5d移植小組和7d移植小組,即分別于動員第5天和動員第7天于裸鼠背部移植組織工程皮膚(安體膚,由陜西艾爾膚組織工程有限公司提供)。移植后14d處死,切取移植的組織工程皮膚及周圍組織,取部分組織行4%甲醛固定,常規(guī)病理制片,采用HE染色、免疫組化染色等方法,觀察病理形態(tài)學變化和血管新生情況,統(tǒng)計學處理并進行對比分析。 結果:第一階段:陰性對照組在6個時間點雙熒光陽性細胞比例均無顯著差異(P0.05)。聯(lián)合組與EPO組動員后雙熒光陽性細胞比例逐漸增加且于7d達到高峰。自動員后3d起,各時間點兩組雙熒光陽性細胞比例均有顯著差異(P0.05);EPO組雙熒光陽性細胞比例較聯(lián)合組和對照組增加明顯(P0.05)。第二階段:EPO組、聯(lián)合組與對照組之間新生毛細血管數(shù)均有顯著差異(P0.05)。EPO組的新生毛細血管數(shù)多于聯(lián)合組,而對照組基本無新生血管長入。5d移植組的新生毛細血管數(shù)明顯高于7d移植組(P0.01)。 結論:EPO動員EPCs的作用較G-CSF聯(lián)合辛伐他汀動員作用強,動員7d外周血EPCs含量出現(xiàn)高峰。但相比動員七天移植TES,動員后第五天移植TES更能促進新生毛細血管長入移植區(qū)及TES,有利于TES血管化。因此TES移植時機應選擇在動員后第五天,即EPCs高峰到來之前移植比較合適。
【關鍵詞】:促紅細胞生成素(EPO) 粒細胞集落刺激因子(G-CSF) 辛伐他汀 組織工程皮膚(TES) 血管化(vascularization)
【學位授予單位】:昆明醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2013
【分類號】:R622.1;R318.08
【目錄】:
- 摘要6-8
- Abstract8-10
- 前言10-13
- 材料與方法13-21
- 結果21-29
- 討論29-39
- 結論39
- 本研究的不足之處39-40
- 參考文獻40-45
- 綜述45-52
- 參考文獻49-52
- 碩士研究生期間發(fā)表文章情況52-53
- 致謝53
【參考文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條
1 劉源,金巖,王新文,趙宇,李媛;構建含血管結構的組織工程皮膚的研究[J];中國修復重建外科雜志;2004年06期
本文關鍵詞:促紅素對比粒細胞集落刺激因子聯(lián)合辛伐他汀促進組織工程皮膚血管化的實驗研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
,本文編號:334072
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