促紅素對(duì)比粒細(xì)胞集落刺激因子聯(lián)合辛伐他汀促進(jìn)組織工程皮膚血管化的實(shí)驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2017-04-29 03:04
本文關(guān)鍵詞:促紅素對(duì)比粒細(xì)胞集落刺激因子聯(lián)合辛伐他汀促進(jìn)組織工程皮膚血管化的實(shí)驗(yàn)研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:利用促紅細(xì)胞生成素(Erythropoietin, EPO)與粒細(xì)胞集落刺激因子(Granulocyte Colony-Stimulating Factor, G-CSF)聯(lián)合辛伐他汀分別對(duì)骨髓中血管內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelial progenitor cells, EPCs)進(jìn)行動(dòng)員,優(yōu)選動(dòng)員方法和時(shí)機(jī),觀察其促進(jìn)組織工程皮膚血管化的作用。方法:第一階段:采用辛伐他汀原料、重組人粒細(xì)胞刺激因子注射液和重組人促紅素注射液,參照課題組之前的研究結(jié)果及文獻(xiàn)介紹的劑量(辛伐他汀劑量2mg/Kg*d-1, G-CSF劑量100ug/Kg*d-1, EPO劑量3000IU/Kg*d-1)與方法(腹腔注射)進(jìn)行小鼠骨髓血管內(nèi)皮祖細(xì)胞的動(dòng)員。選用健康雄性昆明種小白鼠(避免雌激素的干擾)108只,隨機(jī)分為聯(lián)合組(G-CSF聯(lián)合辛伐他汀腹腔注射組)、EPO組(EPO腹腔注射組)及陰性對(duì)照組(生理鹽水腹腔注射),各組均為36只。各組在動(dòng)員后1d、3d、5d、7d、10d、14d六個(gè)時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)取6只小鼠,心臟采血進(jìn)行流式細(xì)胞儀檢測(cè)CD34、Flk-1、 CD133標(biāo)記細(xì)胞的陽(yáng)性率,結(jié)果取均值以x±s表示,統(tǒng)計(jì)學(xué)處理并進(jìn)行對(duì)比分析。第二階段:選用健康雄性BALB/C裸鼠(避免雌激素的干擾及免疫排斥反應(yīng))36只,隨機(jī)分為聯(lián)合組(G-CSF聯(lián)合辛伐他汀腹腔注射組)、EPO組(EPO腹腔注射組)及陰性對(duì)照組(生理鹽水腹腔注射),各組均為12只,給予持續(xù)動(dòng)員7天。各組又細(xì)分為5d移植小組和7d移植小組,即分別于動(dòng)員第5天和動(dòng)員第7天于裸鼠背部移植組織工程皮膚(安體膚,由陜西艾爾膚組織工程有限公司提供)。移植后14d處死,切取移植的組織工程皮膚及周?chē)M織,取部分組織行4%甲醛固定,常規(guī)病理制片,采用HE染色、免疫組化染色等方法,觀察病理形態(tài)學(xué)變化和血管新生情況,統(tǒng)計(jì)學(xué)處理并進(jìn)行對(duì)比分析。 結(jié)果:第一階段:陰性對(duì)照組在6個(gè)時(shí)間點(diǎn)雙熒光陽(yáng)性細(xì)胞比例均無(wú)顯著差異(P0.05)。聯(lián)合組與EPO組動(dòng)員后雙熒光陽(yáng)性細(xì)胞比例逐漸增加且于7d達(dá)到高峰。自動(dòng)員后3d起,各時(shí)間點(diǎn)兩組雙熒光陽(yáng)性細(xì)胞比例均有顯著差異(P0.05);EPO組雙熒光陽(yáng)性細(xì)胞比例較聯(lián)合組和對(duì)照組增加明顯(P0.05)。第二階段:EPO組、聯(lián)合組與對(duì)照組之間新生毛細(xì)血管數(shù)均有顯著差異(P0.05)。EPO組的新生毛細(xì)血管數(shù)多于聯(lián)合組,而對(duì)照組基本無(wú)新生血管長(zhǎng)入。5d移植組的新生毛細(xì)血管數(shù)明顯高于7d移植組(P0.01)。 結(jié)論:EPO動(dòng)員EPCs的作用較G-CSF聯(lián)合辛伐他汀動(dòng)員作用強(qiáng),動(dòng)員7d外周血EPCs含量出現(xiàn)高峰。但相比動(dòng)員七天移植TES,動(dòng)員后第五天移植TES更能促進(jìn)新生毛細(xì)血管長(zhǎng)入移植區(qū)及TES,有利于TES血管化。因此TES移植時(shí)機(jī)應(yīng)選擇在動(dòng)員后第五天,即EPCs高峰到來(lái)之前移植比較合適。
【關(guān)鍵詞】:促紅細(xì)胞生成素(EPO) 粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF) 辛伐他汀 組織工程皮膚(TES) 血管化(vascularization)
【學(xué)位授予單位】:昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類(lèi)號(hào)】:R622.1;R318.08
【目錄】:
- 摘要6-8
- Abstract8-10
- 前言10-13
- 材料與方法13-21
- 結(jié)果21-29
- 討論29-39
- 結(jié)論39
- 本研究的不足之處39-40
- 參考文獻(xiàn)40-45
- 綜述45-52
- 參考文獻(xiàn)49-52
- 碩士研究生期間發(fā)表文章情況52-53
- 致謝53
【參考文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條
1 劉源,金巖,王新文,趙宇,李媛;構(gòu)建含血管結(jié)構(gòu)的組織工程皮膚的研究[J];中國(guó)修復(fù)重建外科雜志;2004年06期
本文關(guān)鍵詞:促紅素對(duì)比粒細(xì)胞集落刺激因子聯(lián)合辛伐他汀促進(jìn)組織工程皮膚血管化的實(shí)驗(yàn)研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
,本文編號(hào):334072
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