目的:1.找出制備有良好載藥率、包封率及載生長因子微球緩釋系統(tǒng)的可行方法。2.研究微球緩釋系統(tǒng)釋藥特性,找出促進種子細胞生長所需的生長因子濃度。3.研究載復合生長因子納米微球緩釋系統(tǒng)是否能提高細胞的增殖及分泌能力,促進細胞外基質重構,是否能提高種子細胞在去細胞支架的粘附能力。方法:1.大鼠骨髓間質干細胞的分離、培養(yǎng)及表型鑒定:采用percoll密度梯度離心法對SD大鼠骨髓進行分離培養(yǎng),應用流式細胞儀測定MSCs細胞周期、及表面抗原CD34、CD44、CD45表型鑒定。2.不同生長因子對MSC增殖、粘附功能影響研究:對MSCs分別加入含濃度為0、3.125、6.25、12.5、25、50、100、200 ng·mL^-1的bFGF、PDGF或bFGF+PDGF復合生長因子培養(yǎng)基,置于37℃、5% CO₂及飽和濕度條件下誘導培養(yǎng)24、48、96、144h。采用CCK-8測定種子細胞增殖情況,計數(shù)法測定細胞粘附情況,用流式細胞儀測定細胞周期和凋亡率,檢測MSCsⅠ、Ⅲ型膠原分泌情況。最終確定PDGF-BB和bFGF兩者之間的最佳濃度比例。3.微球緩釋... 

【文章來源】：中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

MSCs生長曲線

A、B、C分別為流式細胞儀CD34、CD44、CD45檢測結果

圖 3：不同濃度 bFGF 對 MSCs 增殖（吸光值 ）的促進作用注：p：與同時間 0 ng·mL-1組對比*p<0.05；與同時間 0 ng·mL-1組對比**p<0.01；與同時間 200 ng·mL-1組相比#p<0.05。


本文編號：3340244