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PI3K/Akt/mTOR介導的細胞自噬在鉭顆粒促成骨細胞增殖中的作用研究

發(fā)布時間:2021-08-10 09:52
  研究背景金屬鉭(Tantalum)具有熔點高、強度大、抗磨損、耐腐蝕等良好的物理性質和極其穩(wěn)定的化學性質,且生物組織易在其表面生長,故又有“親生物金屬”之稱。多孔鉭具有較高的孔隙率和表面能,以及良好的生物相容性和細胞浸潤性,彈性模量更接近骨組織,被稱為“骨小梁”金屬。研究表明.:表面載有多孔鉭涂層的植入體有利于形成三維骨整合,促進成骨細胞的早期附著、增殖、分化和礦化,改善植入物的初期穩(wěn)定性。而植入體表面的涂層鉭顆粒與種植體周圍組織和細胞直接接觸,可引起一系列應激反應,可能影響骨形成和骨吸收的動態(tài)平衡。那么,鉭顆粒與成骨細胞直接接觸,對其增殖有什么影響呢?其機制如何?目前尚未見相關報道。研究目的本研究將小鼠MC3T3-E1成骨細胞與不同濃度的微米鉭或納米鉭顆粒共培養(yǎng)以模擬多孔鉭涂層種植體表面的微環(huán)境,分析鉭顆粒對細胞增殖的影響,以及PI3K/Akt/mTOR通路介導的自噬在鉭顆粒促增殖反應中的作用。研究方法1.用透射電鏡、掃描電鏡、動態(tài)光散射儀等對鉭顆粒的理化特性進行表征。2.分別將不同濃度的微米鉭或納米鉭顆粒與MC3T3-E1細胞共培養(yǎng)6、12、24、48 h,通過CCK-8法摸索并篩... 

【文章來源】:南方醫(yī)科大學廣東省

【文章頁數】:108 頁

【學位級別】:博士

【部分圖文】:

PI3K/Akt/mTOR介導的細胞自噬在鉭顆粒促成骨細胞增殖中的作用研究


圖1-1微米鉭顆粒的電鏡表征??Fi.?1-1?Characterization?of?tantalum?microarticlesTa-MPsbTEM?and?SEM??

透射電鏡,顆粒形狀,長條,透射電鏡


2結果??2.1微米鉭表征??圖1-1為微米鉭顆粒的透射電鏡和掃描電鏡表征圖,可見微米鉭顆粒形狀不??規(guī)則,呈類球形或長條形,大小不均勻,粒徑從100?nm到數pm不等。圖1-2??為DLS表征結果,可見微米鉭顆粒的平均水合粒徑為1281?nm。??圖1-1微米鉭顆粒的電鏡表征??Fig.?1-1?Characterization?of?tantalum?micro?particles?(Ta-MPs)?by?TEM?and?SEM??(a)、(b)分別為微米鉭顆粒的透射電鏡和掃描電鏡表征結果,微米鉭顆粒形狀不規(guī)則,呈類??球形或長條形,大小不均勻。??II??

細胞形態(tài),放大圖,毒性等級,細胞


消化后的MC3T3-E1細胞呈球形,接種后4?6?h開始貼壁,細胞形態(tài)逐漸??舒展開。在倒置顯微鏡下觀察,貼壁后的細胞形態(tài)不規(guī)則,呈梭形、三角形、??多角形等,高倍鏡下可見有突起從細胞周圍伸出(圖1-3?a,b);隨后細胞繼續(xù)增??殖,密度逐漸增大,呈散在的簇狀生長,呈長梭形或多角形,高倍鏡下細胞核??清晰可見,細胞突起更多更長(圖1-3?c,d);到對數生長期,細胞數量明顯增多,??呈集落樣生長,高倍鏡下見細胞突起互相連接成片,細胞更飽滿(圖1-3?e,f);??之后進入生長抑制期,細胞互相擠壓,呈鋪路石狀,細胞間隙變小,高倍鏡下??見細胞呈圓形,突起減少甚至消失,有時還會出現死亡細胞(圖1-3?g,h)。??2.4微米鉭顆粒對細胞增殖的影響??表1-3、1-4為不同濃度微米鉭顆粒處理不同時間后MC3T3-E1的0D值和??相對增殖率以及微米鉭顆粒的毒性等級。結果顯示,當微米鉭SlOOfig/mL時,??其毒性等級均S1級;當微米鉭=lmg/mL時,其毒性等級幾乎都達到3級;當微??米鉭達到10?mg/mL時

【參考文獻】:
期刊論文
[1]人工種植牙載藥方式及材料的研究進展[J]. 王培歡,劉洪臣.  口腔頜面修復學雜志. 2017(06)
[2]鉭及多孔鉭表面改性技術在組織工程學及口腔醫(yī)學的研究進展[J]. 董偉,劉洪臣.  中華老年口腔醫(yī)學雜志. 2017(02)
[3]新型多孔鉭人工種植牙[J]. 劉洪臣,路榮建.  中華老年口腔醫(yī)學雜志. 2016(01)
[4]鉭基金屬生物材料在種植牙中的研究進展[J]. 張桂蘭,劉洪臣.  中華老年口腔醫(yī)學雜志. 2015(05)
[5]選擇性自噬的研究[J]. 肖伊寧,蔣欣,呂佩源,李玲.  腦與神經疾病雜志. 2015(04)

碩士論文
[1]TGF-β1在多孔鉭修復頜面骨缺損中的促骨生成作用研究[D]. 張倩.第三軍醫(yī)大學 2016
[2]堿性成纖維細胞生長因子促進多孔鉭顆粒修復頜骨缺損的實驗研究[D]. 朱璨.第三軍醫(yī)大學 2016
[3]多孔鉭顆粒對頜骨缺損修復效果的實驗研究[D]. 鐘建鑫.第三軍醫(yī)大學 2015
[4]鉭顆粒對人單核細胞毒性及分泌細胞因子影響的研究[D]. 張耀坤.南方醫(yī)科大學 2014



本文編號:3333842

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