毛囊干細(xì)胞與異種膀胱脫細(xì)胞基質(zhì)生物相容性研究
本文關(guān)鍵詞:毛囊干細(xì)胞與異種膀胱脫細(xì)胞基質(zhì)生物相容性研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:通過構(gòu)建毛囊干細(xì)胞(Hair follicle stem cells,HFSCs)與異種膀胱脫細(xì)胞基質(zhì)(bladder acellular matrix, BAM)為支架的細(xì)胞支架復(fù)合物,觀察細(xì)胞支架復(fù)合物的體外生物相容性,為HFSCs和異種BAM復(fù)合物修復(fù)膀胱缺損的研究提供前期的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法:聯(lián)合應(yīng)用顯微分離法、二步酶法及差速貼壁法獲取大鼠HFSCs,倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)特征,表面標(biāo)志物CK15、β1整合素及CD34聯(lián)合用于鑒定;制備新西蘭兔BAM,通過掃描電鏡和Masson染色檢測(cè)材料脫細(xì)胞效果,采用二次沉淀法將P3代HFSCs靜態(tài)接種于BAM表面,倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),并繪制細(xì)胞生長曲線,組織學(xué)檢測(cè)和掃描電鏡觀察細(xì)胞在材料表面的生長狀況。結(jié)果:純化的HFSCs集落呈典型的“鋪路石狀”,CK15角質(zhì)蛋白抗體免疫熒光染色呈陽性表達(dá),流式細(xì)胞儀檢測(cè)PE標(biāo)記的CD34呈較高表達(dá),F(xiàn)ITC標(biāo)記的β1整合素成高表達(dá)。制備的BAM為白色半透明膜狀,掃描電鏡下觀察為纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),未見細(xì)胞殘留。Masson染色提示BAM為膠原結(jié)構(gòu),無明顯細(xì)胞殘留,細(xì)胞毒性檢測(cè)表明材料無細(xì)胞毒性。細(xì)胞材料體外復(fù)合培養(yǎng)48h后倒置顯微鏡下觀察BAM周圍HFSCs生長狀態(tài)良好,HFSCs-BAM材料上細(xì)胞生長曲線與對(duì)照組類似,7-8天左右進(jìn)入生長平臺(tái)期,掃描電鏡下觀察HFSCs伸展、粘附于BAM支架表面。體外復(fù)合培養(yǎng)1周行組織學(xué)檢測(cè),可見1~3層細(xì)胞鋪于支架材料表面。結(jié)論:HFSCs與異種BAM有良好的生物相容性,進(jìn)一步為HFSCs修復(fù)膀胱缺損疾病的研究奠定了基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】:毛囊干細(xì)胞 膀胱脫細(xì)胞基質(zhì) 支架 相容性 修復(fù)
【學(xué)位授予單位】:新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R318.08
【目錄】:
- 摘要7-8
- Abstract8-10
- 前言10-13
- 內(nèi)容與方法13-23
- 1. 實(shí)驗(yàn)材料13-15
- 2. 毛囊干細(xì)胞培養(yǎng)及鑒定及增殖實(shí)驗(yàn)15-17
- 3. 兔膀胱脫細(xì)胞基質(zhì)的制備及鑒定17-20
- 4. 毛囊干細(xì)胞與膀胱脫細(xì)胞基質(zhì)體外生物相容性的研究20-22
- 5. 技術(shù)路線圖22-23
- 結(jié)果23-30
- 討論30-39
- 小結(jié)39-40
- 致謝40-41
- 參考文獻(xiàn)41-47
- 綜述47-54
- 參考文獻(xiàn)51-54
- 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)位論文54-55
- 導(dǎo)師評(píng)閱表55
【參考文獻(xiàn)】
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本文關(guān)鍵詞:毛囊干細(xì)胞與異種膀胱脫細(xì)胞基質(zhì)生物相容性研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號(hào):331115
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