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PVA/ι-CA復(fù)合材料構(gòu)建組織工程軟骨的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2021-07-24 22:52
  目的制備PVA/ι-CA復(fù)合材料并對(duì)性能進(jìn)行表征,通過ATDC-5與復(fù)合支架材料的共培養(yǎng),觀察ATDC-5在復(fù)合支架材料上的生物學(xué)行為。皮下植入復(fù)合支架材料,評(píng)價(jià)組織的局部反應(yīng),包括早期的炎癥反應(yīng)和后期的血管化,進(jìn)而評(píng)價(jià)該復(fù)合材料的組織相容性及其用于構(gòu)建組織工程軟骨的可行性。方法1制備含不同卡拉膠(質(zhì)量分?jǐn)?shù)0%、5%、10%、20%、30%)的PVA/ι-CA復(fù)合膜材料和復(fù)合支架材料,并對(duì)支架材料的性能進(jìn)行表征。2將HU-VEC與復(fù)合膜材料共培養(yǎng),通過細(xì)胞黏附實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)、SEM觀察細(xì)胞在材料上的生長(zhǎng)及增殖狀況,篩選出最優(yōu)配比的復(fù)合支架材料做生物實(shí)驗(yàn)。3將ATDC-5接種于優(yōu)選支架材料,復(fù)合培養(yǎng)7、14、21天,通過石蠟切片常規(guī)染色、掃描電鏡、觀察ATDC-5在支架材料上的黏附、增殖情況,通過甲苯胺藍(lán)染色法、Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色、免疫熒光法檢測(cè)Ⅱ型膠原蛋白的表達(dá)。4將優(yōu)選復(fù)合支架材料植入SD大鼠皮下,術(shù)后1、2、3、4周,通過石蠟切片常規(guī)HE染色、Masson染色、VG染色、Fli-1免疫組化及免疫熒光染色觀察,評(píng)價(jià)該復(fù)合支架材料的組織相容性、血管化能力及體內(nèi)降解情況。結(jié)果1... 

【文章來源】:華北理工大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】:71 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略表
引言
第1章 PVA/ι-CA復(fù)合材料的制備及其性能表征
    1.1 前言
    1.2 材料與方法
        1.2.1 主要儀器和實(shí)驗(yàn)試劑
        1.2.2 PVA/ι-CA復(fù)合材料制備及其性能表征
    1.3 結(jié)果與討論
        1.3.1 PVA/ι-CA復(fù)合支架材料結(jié)構(gòu)形貌觀察
        1.3.2 PVA/ι-CA復(fù)合支架材料表征測(cè)試結(jié)果
    1.4 本章小結(jié)
第2章 PVA/ι-CA復(fù)合膜材料的生物學(xué)表征
    2.1 前言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 儀器和實(shí)驗(yàn)試劑
        2.2.2 MTT法檢測(cè)細(xì)胞與復(fù)合膜材料的黏附
        2.2.3 MTT法驗(yàn)證復(fù)合膜材料的細(xì)胞相容性
        2.2.4 血管內(nèi)皮細(xì)胞與復(fù)合膜材料共培養(yǎng)
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 復(fù)合膜材料細(xì)胞黏附實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.2 MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)復(fù)合膜材料上細(xì)胞增殖情況
        2.3.3 細(xì)胞與復(fù)合膜材料共培養(yǎng)后掃描電鏡觀察
    2.4 本章小結(jié)
第3章 ATDC-5 在PVA/ι-CA復(fù)合支架材料上的生物學(xué)行為
    3.1 前言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 主要儀器和實(shí)驗(yàn)試劑
        3.2.2 倒置相差顯微鏡觀察ATDC-5 的生長(zhǎng)狀況
        3.2.3 ATDC-5 與復(fù)合支架材料共培養(yǎng)
        3.2.4 常規(guī)HE染色
        3.2.5 Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色
        3.2.6 免疫熒光法檢測(cè)Ⅱ型膠原蛋白的表達(dá)
        3.2.7 甲苯胺藍(lán)染色
        3.2.8 SEM檢測(cè)
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 倒置相差顯微鏡觀察軟骨細(xì)胞結(jié)果
        3.3.2 HE染色觀察結(jié)果
        3.3.3 Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色觀察結(jié)果
        3.3.4 免疫熒光法檢測(cè)Ⅱ型膠原蛋白的表達(dá)
        3.3.5 甲苯胺藍(lán)染色觀察結(jié)果
        3.3.6 掃描電鏡觀察結(jié)果
    3.4 討論
        3.4.1 聚乙烯醇構(gòu)建復(fù)合支架材料的作用
        3.4.2 卡拉膠對(duì)于制備支架材料的影響
        3.4.3 細(xì)胞相容性評(píng)價(jià)
    3.5 本章小結(jié)
第4章 PVA/ι-CA復(fù)合支架材料動(dòng)物皮下埋植實(shí)驗(yàn)
    4.1 前言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 主要儀器和實(shí)驗(yàn)試劑
        4.2.2 皮下包埋實(shí)驗(yàn)
        4.2.3 HE染色觀察
        4.2.4 Masson染色觀察
        4.2.5 VG染色觀察
        4.2.6 Fli-1 免疫組織化學(xué)染色
        4.2.7 Fli-1 免疫熒光化學(xué)染色
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 大體標(biāo)本觀察結(jié)果
        4.3.2 HE觀察結(jié)果
        4.3.3 Masson染色觀察結(jié)果
        4.3.4 VG染色觀察結(jié)果
        4.3.5 Fli免疫組織化學(xué)染色觀察植入材料的血管生成情況
        4.3.6 Fli免疫熒光化學(xué)染色觀察植入材料的血管生成情況
        4.3.7 HE染色觀察皮下包埋材料假手術(shù)組標(biāo)本
        4.3.8 HE染色觀察皮下包埋紗布組標(biāo)本
        4.3.9 HE染色觀察皮下注射LPS標(biāo)本
    4.4 討論
        4.4.1 影響復(fù)合支架材料血管化的因素
        4.4.2 機(jī)體的炎癥反應(yīng)
    4.5 本章小結(jié)
參考文獻(xiàn)
第5章 綜述 軟骨組織工程的研究進(jìn)展
    5.1 課題的背景和意義
    5.2 關(guān)節(jié)軟骨的結(jié)構(gòu)與性能
        5.2.1 關(guān)節(jié)軟骨的結(jié)構(gòu)
        5.2.2 關(guān)節(jié)軟骨的組成
        5.2.3 關(guān)節(jié)軟骨修復(fù)
    5.3 軟骨組織工程
        5.3.1 種子細(xì)胞
        5.3.2 生長(zhǎng)因子
        5.3.3 支架材料
    5.4 聚乙烯醇水凝膠材料
    5.5 本課題的研究意義和研究?jī)?nèi)容
    參考文獻(xiàn)
結(jié)論
致謝
導(dǎo)師簡(jiǎn)介
作者簡(jiǎn)介
學(xué)位論文數(shù)據(jù)集


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Adsorptive removal of iron and manganese ions from aqueous solutions with microporous chitosan/polyethylene glycol blend membrane[J]. Neama A.Reiad,Omar E.Abdel Salam,Ehab F.Abadir,Farid A.Harraz.  Journal of Environmental Sciences. 2012(08)
[2]殼聚糖-明膠-卡拉膠支架復(fù)合人牙齦成纖維細(xì)胞的體外研究[J]. 孫路,楊伯光,王永蘭,姚芳蓮.  牙體牙髓牙周病學(xué)雜志. 2012(06)
[3]新型軟骨脫細(xì)胞基質(zhì)海綿的制備及生物相容性評(píng)價(jià)[J]. 劉天軍,譚波,羅靜聰,鄧力,解慧琪.  中國(guó)修復(fù)重建外科雜志. 2009(08)
[4]組織工程骨血管化的研究進(jìn)展[J]. 何清義,李強(qiáng),溫立升,許建中.  中國(guó)矯形外科雜志. 2005(19)
[5]天然生物衍生支架材料在骨組織工程中的應(yīng)用進(jìn)展[J]. 翦新春,成洪泉,許春姣.  口腔頜面外科雜志. 2003(03)



本文編號(hào):3301590

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